李斌+劉麗平+郭鴻+等

蘭州大學(xué)第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，甘肅蘭州 730000

[摘要] 目的 探討環(huán)氧合酶2（COX-2）和核因子-κB（NF-κB）在膿毒癥大鼠的肝組織炎性反應(yīng)中的表達(dá)及其相互關(guān)系。 方法 隨機(jī)選擇54只200～220 g成年Wistar大鼠分為3組，假手術(shù)A組（實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前2 h腹腔內(nèi)注射生理鹽水，麻醉后行開(kāi)腹手術(shù)，不做模型誘導(dǎo)，n = 6）；膿毒癥模型B組[實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前2 h腹腔內(nèi)注射生理鹽水，麻醉后盲腸結(jié)扎穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）建立腹腔感染模型，n = 24]；NS398干預(yù)C組（CLP建立腹腔感染模型，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前2 h腹腔內(nèi)注射N(xiāo)S398 10 mg/kg，n = 24）。以CLP法建立動(dòng)物模型，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測(cè)COX-2 mRNA在肝臟組織的表達(dá)，免疫組織化學(xué)法（Elisa）測(cè)定NF-κB在肝細(xì)胞中表達(dá)，并檢測(cè)肝臟功能，如谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和肝臟大體標(biāo)本及病理變化。 結(jié)果 ①COX-2 mRNA 在A組呈低表達(dá)（1040.82±2.77），各時(shí)點(diǎn)C組較B組明顯降低。②肝細(xì)胞中NF-κB在A組表達(dá)較低[3 h：（0.60±0.54），6 h：（0.60±0.54），12 h：（0.60±0.54），24 h：（0.60±0.54）]，膿毒癥后其表達(dá)明顯增高[3 h：（2.60±0.55），6 h：（7.20±1.09），12 h：（12.20±0.32），24 h：（6.40±0.73）]；在同一時(shí)點(diǎn)比較，B組低于C組[3 h：（1.60±1.89），6 h：（6.60±0.79），12 h：（9.20±2.68），24 h：（4.80±1.60）]（P < 0.05）。③Pearson相關(guān)分析，COX-2 mRNA與NF-κB呈直線正相關(guān)（r=0.685，P = 0.042）。④膿毒癥后肝臟轉(zhuǎn)氨酶明顯增高[ALT：3 h：（174.00±18.73）U/L，6 h：（204.67±23.59）U/L，12 h：（311.00±44.53）U/L，24 h：（506.67±24.79）U/L；AST：3 h：（619.67±145.81）U/L，6 h：（594.00±34.59）U/L，12 h：（1027.66±136.21）U/L，24 h：（1518.33±139.38）U/L]，NS-398干預(yù)后降低[ALT：3 h：（105.33±18.01）U/L，6 h：（157.00±32.36）U/L，12 h：（101.00±16.52）U/L，24 h：（93.33±10.41）U/L；AST：3 h：（217.00±26.21）U/L，6 h：（461.33±22.01）U/L，12 h：（322.00±72.33）U/L，24 h：（268.00±98.57）U/L]，C組與B組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），提示經(jīng)干預(yù)肝臟病理?yè)p傷減輕。 結(jié)論 COX-2在膿毒癥后引起的肝損傷中占有重要地位，NS-398通過(guò)特異性抑制COX-2來(lái)抑制肝細(xì)胞中NF-κB的表達(dá)，從而減輕肝細(xì)胞損傷。

[關(guān)鍵詞] 膿毒癥；COX-2；NS398；肝損傷；NF-κB

[中圖分類(lèi)號(hào)] R631.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2014）03（b）-0014-05

Express of cyclooxygenase-2 and NF-κB for hepatocellular injury in rats with sepsis

LI Bin LIU Liping GUO Hong LI Xun

Intensive Care Units， the First Hospital of Lanzhou University， Gansu Province， Lanzhou 730000， China

[Abstract] Objective To study the expression of cyclooxygenase 2 and NF-κB on hepatic inflammatory reaction of rats with sepsis and their interrelation. Methods 54 Wistar rats （200-220 g） were randomly divided into 3 groups. A： sham group （with saline injected into intraperitoneal 2 h before the experiment， and operation after anesthesia， no-maked model induced， n = 6）； B： sepsis model group （with saline injected into intraperitoneal 2 h before the experiment， and to make sepsis model after anesthesia by using CLP， n = 24）； C： NS-398 intervention group （ to make sepsis model by using CLP， NS398 10 mg/kg injected into intraperitoneal 2 h before the experiment， n = 24）. Animal model was established with cecum ligation perforation （CLP） method. RT-PCR were used to determine COX-2 mRNA expression in liver tissue， NF-κB of hepatocyte was detected by immunohistochemical method. At the same time， ALT， AST and liver pathological changes were detected. Results ①The expression of COX-2 mRNA were lower in group A （1040.82±2.77）， higher in group B than C at the same time. ②The expression of NF-κB were lower in hepatocyte in group A [3 h： （0.60±0.54）， 6 h： （0.60±0.54）， 12 h： （0.60±0.54）， 24 h： （0.60±0.54）]， but higher after CLP [3 h： （2.60±0.55）， 6 h： （7.20±1.09）， 12 h： （12.20±0.32）， 24 h： （6.40±0.73）]， but were higher in group B than in group C [3 h： （1.60±1.89）， 6 h： （6.60±0.79）， 12 h： （9.20±2.68）， 24 h： （4.80±1.60）] at the same time （P < 0.05）. According to Pearson correlation analysis， it was positive correlation between cyclooxygenase-2 mRNA and NF-κB （r = 0.685， P = 0.042）. ③Serum ALT and AST were significantly increased in B [ALT： 3 h： （174.00±18.73）U/L， 6 h： （204.67±23.59）U/L， 12 h： （311.00±44.53）U/L， 24 h： （506.67±24.79）U/L； AST： 3 h： （619.67±145.81）U/L， 6 h： （594.00±34.59）U/L， 12 h： （1027.66±136.21）U/L， 24 h： （1518.33±139.38）U/L] than group C [ALT： 3 h： （105.33±18.01）U/L， 6 h： （157.00±32.36）U/L， 12 h： （101.00±16.52）U/L， 24 h： （93.33±10.41）U/L； AST： 3 h： （217.00±26.21）U/L， 6 h： （461.33±22.01）U/L， 12 h： （322.00±72.33）U/L， 24 h： （268.00±98.57）U/L]， but significantly decreased in group C than group B （P < 0.05）. Those prompted Hepatic pathologic injury extenuate after intervention. Conclusion COX-2 plays an important role in hepatic injury by sepsis， NS-398 can peculiarly inhibit the expression of NF-κB by inhibiting COX-2， thus relieves injury of hepatocyte.

[Key words] Sepsis； Cyclooxygenase-2； NS398； Hepatic injury； NF-κB

膿毒癥（sepsis）是ICU最為常見(jiàn)的疾病，常常繼發(fā)于嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、休克、大手術(shù)后，而膿毒性休克、多器官功能障礙綜合征（MODS）等是其進(jìn)一步發(fā)展而來(lái)的，已成為當(dāng)今外科ICU首要死亡原因[1-2]，而肝臟是最常受累的器官之一。核因子-κB（NF-κB）是炎癥和免疫應(yīng)答中的關(guān)鍵因素，能夠在基因水平調(diào)控一些致炎癥細(xì)胞因子和誘生型酶，如環(huán)氧合酶2（cyclooxygenase-2，COX-2）、一氧化氮合酶（iNOS）等的表達(dá)[1-3]。COX-2一般在正常組織較少表達(dá)，它主要表達(dá)在一些與炎癥有密切關(guān)系的細(xì)胞或組織上，在炎癥因子和（或）細(xì)胞因子等的刺激下大量表達(dá)，參與和加重炎性反應(yīng)，且其表達(dá)水平與炎癥的嚴(yán)重程度相關(guān)[4-6]。國(guó)內(nèi)外對(duì)于NF-κB和COX-2在膿毒癥后肝損傷中的作用及相互關(guān)系報(bào)道不多，所以本研究試圖通過(guò)建立膿毒癥后肝組織炎性反應(yīng)模型，研究二者在其中的表達(dá)和相互關(guān)系，探索保護(hù)肝細(xì)胞的新方法。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)分組和給藥方法

體重200～220 g Wistar雄性大鼠54只（購(gòu)于蘭州大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心），稱(chēng)重后隨機(jī)分為3組：假手術(shù)A組（實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前2 h腹腔內(nèi)注射生理鹽水，麻醉后行開(kāi)腹手術(shù)，不做模型誘導(dǎo)，n=6）；膿毒癥模型B組（實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前2 h腹腔內(nèi)注射生理鹽水，麻醉后CLP建立腹腔感染模型，n=24）；NS398干預(yù)C組（CLP建立腹腔感染模型，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前2 h腹腔內(nèi)注射N(xiāo)S398 10 mg/kg，n=24）。將B、C兩組根據(jù)取材時(shí)間不同又分為4組，每組6只。除干預(yù)措施不同外，其余喂養(yǎng)相同，分別于造模后3、6、12、24 h，假手術(shù)組在術(shù)后6 h抽取大鼠門(mén)靜脈血標(biāo)本，用于檢測(cè)肝功能，包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）；取肝組織觀察病理學(xué)改變、免疫組織化學(xué)染色和RT-PCR。

1.2 動(dòng)物模型的建立

盲腸結(jié)扎穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）腹腔感染模型建立參照Flammand等[7]的方法。實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物禁食12 h，自由飲水，腹腔內(nèi)注射1%氯胺酮10 mL/kg，麻醉成功后，無(wú)菌操作，腹正中2 cm切口進(jìn)腹，于盲腸出口處用4號(hào)線結(jié)扎，18G套管針將盲腸貫通穿孔一次，穿孔為兩個(gè)，擠出少量腸內(nèi)容物，還納腸管于腹腔，間斷縫合腹壁。術(shù)后各組動(dòng)物均自由進(jìn)食飲水。

1.3 主要藥物和試劑

NS398購(gòu)于Sigma公司，NF-κB p65免疫組化試劑盒、SABC試劑盒購(gòu)于武漢博士德公司，Trizol柱式RNA抽提試劑盒、AMV cDNA第一鏈合成試劑盒為上海生工公司產(chǎn)品，2×HotStart Taq PCR Mastermix試劑盒為北京天為時(shí)代公司產(chǎn)品。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)和方法

1.4.1 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）觀察COX-2 mRNA水平變化 ①取-80℃冰箱保存肝組織50 μg，用Trizol柱式總RNA抽提試劑盒提取總RNA，并檢測(cè)純度和完整性。②RT-PCR（二步法，按照說(shuō)明書(shū)操作）：引物序列（5′→3′）：COX-2上游引物CTG TAT CCC GCC CTG CTG GT；下游引物GAG GCA CTT GCG TTG ATG GT[8]；產(chǎn)物287 bp。β-actin（內(nèi)參照）上游引物GAT GGT GGG TAT GGG TCA GAA；下游引物CTA GGA GCC AGG GCA GTA ATC；產(chǎn)物839 bp（均由上海生工公司合成）。反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性3 min，然后按94℃ 30 s，50℃ 30 s，72℃ 1 min進(jìn)行28個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸10 min。PCR產(chǎn)物6 μL，在1.8%瓊脂糖膠上電泳，EB染色，凝膠成像儀照相記錄。分析結(jié)果以COX-2與相應(yīng)β-actin條帶灰度（IOD）之比值Q表示（Q=IODCOX-2/IODβ-actin），用Quantity One 4.0圖像分析軟件分析IOD。

1.4.2 肝細(xì)胞NF-κB表達(dá)的測(cè)定采用Elisa法（免疫組織化學(xué)法） 肝組織標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μm切片，分別做HE和NF-κB免疫組化標(biāo)記，采用SABC法，按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。經(jīng)DAB顯色后，蘇木精復(fù)染，中性樹(shù)膠封固。用已知的陽(yáng)性片作為陽(yáng)性對(duì)照，每組均用PBS 代替一抗作陰性對(duì)照。所有切片均在同一條件下的顯微鏡下觀察，結(jié)果以胞質(zhì)或胞核中發(fā)現(xiàn)棕黃色顆?；蚝稚w粒為陽(yáng)性細(xì)胞，陰性對(duì)照則無(wú)棕黃色反應(yīng)產(chǎn)物。取光學(xué)顯微鏡下每平方毫米視野（20×或40×）中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，隨機(jī)選擇5個(gè)視野，其中每平方毫米內(nèi)的平均陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)作為計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。采用以下評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[9]。染色強(qiáng)度分為4級(jí)：0級(jí)：陰性，1級(jí)：弱陽(yáng)性染色，2級(jí)：中度陽(yáng)性，3級(jí)：強(qiáng)陽(yáng)性染色。每張切片按所見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞范圍分為5級(jí)：0級(jí)：陰性，1級(jí)：1%≤陽(yáng)性細(xì)胞≤25%，2級(jí)：25%<陽(yáng)性細(xì)胞≤50%，3級(jí)：50%<陽(yáng)性細(xì)胞≤75%，4級(jí)：75%<陽(yáng)性細(xì)胞≤100%，每張切片的染色積分以?xún)烧咧捅硎尽?/p>

1.4.3 肝功能檢測(cè) 用日立7020全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)肝功能指標(biāo)ALT、AST。

1.4.4 超微結(jié)構(gòu)觀察 TEM-1230透射電鏡觀察肝臟超微結(jié)構(gòu)改變。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均由SPSS 13.0軟件分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)滿(mǎn)足方差齊性時(shí)，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）描述，多組比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA）方法，組間兩兩比較采用Bonfferoni法。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RT-PCR觀察COX-2在不同組、不同時(shí)間變化結(jié)果

由圖像軟件分析相應(yīng)條帶后可知：肝組織中COX-2 mRNA在假手術(shù)組呈低表達(dá)（1040.82±2.77）；CLP造模后3 h表達(dá)明顯增強(qiáng)（2064.04±6.78），到6 h達(dá)到高峰（3992.45±16.75），12、24 h仍呈高表達(dá)[（2916.80±6.79），（2237.80±7.42）]。NS398干預(yù)后各時(shí)點(diǎn)COX-2 mRNA表達(dá)較膿毒癥組顯著降低，但是仍然高于假手術(shù)組。見(jiàn)圖1。

M：Marker；1：假手術(shù)組；2：膿毒癥3 h；3：膿毒癥6 h；4：膿毒癥12 h；5：膿毒癥24 h；6：NS398 3 h；7：NS398 6 h；8：NS398 12 h；9：NS398 24 h；10：β-actin

圖1 COX-2在不同組、不同時(shí)間變化結(jié)果

2.2 大體及病理檢查結(jié)果

2.2.1 假手術(shù)組 肉眼觀察，肝臟無(wú)明顯改變。肝臟紅潤(rùn)，無(wú)血性腹水及壞死灶。

2.2.2 膿毒癥組 各時(shí)間點(diǎn)大鼠剖檢均可見(jiàn)不同程度的血性腹水，腸管擴(kuò)張，并可見(jiàn)散布于盲腸、大網(wǎng)膜、腸系膜等處出血、壞死灶和皂化斑。肝臟大小無(wú)明顯改變，顏色呈暗紅色，表面可見(jiàn)散在的點(diǎn)狀淤血。電鏡下3 h組可見(jiàn)肝細(xì)胞核基本正常，Diss間隙增寬，溶酶體增多，線粒體擴(kuò)張（圖2）。6 h組可見(jiàn)肝細(xì)胞核固縮、畸形，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少，線粒體嵴斷裂、髓鞘樣改變，并有肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)（圖3）。12 h組和24 h組可見(jiàn)細(xì)胞變形，血竇擴(kuò)張，肝細(xì)胞核固縮、染色質(zhì)呈塊狀、核膜不清，線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯減少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、脫顆粒，膽小管閉塞、絨毛消失（圖4、5）。

2.2.3 NS398干預(yù)組 除3 h組外，其余各組可見(jiàn)少量血性腹水，腸管輕度擴(kuò)張，盲腸處可見(jiàn)出血壞死，無(wú)灶化斑。肝臟色澤稍暗，未見(jiàn)出血點(diǎn)。電鏡下3 h組與膿毒癥3h組變化基本相同（圖6）。6 h組Diss間隙增寬，核染色質(zhì)邊集，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少，線粒體擴(kuò)張，未見(jiàn)細(xì)胞浸潤(rùn)（圖7）。12 h和24 h組可見(jiàn)溶酶體增多，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體僅見(jiàn)個(gè)別擴(kuò)張，個(gè)別核膜不完整、染色質(zhì)邊集（圖8、9）。

2.3 實(shí)驗(yàn)大鼠在同一時(shí)間段ALT、AST變化

結(jié)果顯示，CLP造模后膿毒癥組ALT、AST含量顯著增高，到24 h含量最高，各時(shí)段與假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。而NS398干預(yù)組ALT、AST含量也增高，在3、12、24 h，與假手術(shù)組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；相同時(shí)段比較，ALT、AST與膿毒癥組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。這與COX-2 mRNA變化基本相同。見(jiàn)表1。

2.4 在同一時(shí)間段大鼠NF-κB變化

肝細(xì)胞中NF-κB在假手術(shù)組呈低表達(dá)；CLP造模后3 h表達(dá)增強(qiáng)，到12 h達(dá)到高峰，24 h仍呈高表達(dá)。NS-398干預(yù)后相同時(shí)點(diǎn)NF-κB表達(dá)較膿毒癥組顯著降低，但是仍然高于假手術(shù)組（P < 0.05）。這與COX-2 mRNA變化基本一致，Pearson相關(guān)分析，COX-2 mRNA與NF-κB呈正相關(guān)（r = 0.685，P = 0.042）。見(jiàn)表2。

表2 各組NF-κB變化比較（U/L，x±s）

注：與假手術(shù)組比較，*P < 0.05；與膿毒癥組比較，△P < 0.05；ALT：谷丙轉(zhuǎn)氨酶；AST：谷草轉(zhuǎn)氨酶

3 討論

膿毒癥時(shí)機(jī)體各個(gè)重要器官都有可能受到炎癥波及，而肝臟是炎性反應(yīng)最為劇烈和最容易受到損傷的器官之一，內(nèi)毒素（LPS）通過(guò)直接或間接作用造成肝損傷，其中細(xì)胞因子、氧自由基等發(fā)揮重要作用[10]。肝損傷的就是各種致病因素作用于肝組織，肝細(xì)胞在一定程度上出現(xiàn)變性、壞死和功能性變化。作為重要炎癥介質(zhì)，前列腺素在肝損傷中的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮重要作用。COX是合成各種前列腺素（prostaglandins，PGs）的關(guān)鍵限速酶，在肝損傷時(shí)，激素、細(xì)胞因子、內(nèi)毒素和促癌劑等誘導(dǎo)COX-2的表達(dá)，氧化應(yīng)激與脂質(zhì)過(guò)氧化的代謝產(chǎn)物也可誘導(dǎo)COX-2表達(dá)參與肝損傷[11]。但是COX-2在肝損傷后高表達(dá)，究竟是對(duì)肝組織的保護(hù)性因素還是損傷性因素，其作用機(jī)制如何，目前尚不完全清楚，而且一直存在爭(zhēng)議。一些實(shí)驗(yàn)研究認(rèn)為，抑制COX-2表達(dá)，不僅可以降低血中炎癥細(xì)胞和其他有害因子水平，減輕膿毒癥癥狀，從而抵御內(nèi)毒素介導(dǎo)的感染和死亡，降低病情嚴(yán)重程度。其中的機(jī)制可能與COX-2抑制劑能阻礙NF-κB的激活有關(guān)。

NF-κB由p50和p65兩個(gè)亞基組成，只有p65在蛋白的C末端含有轉(zhuǎn)錄激活區(qū)域能直接作用于轉(zhuǎn)錄區(qū)域而激活轉(zhuǎn)錄過(guò)程，因此，可通過(guò)測(cè)定NF-κB亞單位p65反映NF-κB的活性[12]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)COX-2的基因中含有2個(gè)NF-κB位點(diǎn)序列：5-GGG ACT TTC C2-3′，分別位于-445/-427和-223/-214處，該位點(diǎn)序列發(fā)生定向突變后，幾乎完全封閉TNF-α對(duì)COX-2啟動(dòng)子連接的報(bào)告基因活性的誘導(dǎo)作用[13]。而且有研究表明COX-2抑制劑發(fā)揮抗炎和抗增殖作用主要與抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB或AP-1相關(guān)[14]。二者的相互關(guān)系如何，相互之間的作用機(jī)制如何，所以在前人研究的基礎(chǔ)上，筆者假設(shè)通過(guò)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，可以抑制COX-2 mRNA來(lái)減弱NF-κB的表達(dá)。

本研究采用經(jīng)典的CLP，制造與臨床感染相似的膿毒癥動(dòng)物模型。結(jié)果表明膿毒癥之后肝組織炎性反應(yīng)劇烈，肝臟功能迅速變化，轉(zhuǎn)氨酶快速升高，而且病理變化顯著，肝細(xì)胞出現(xiàn)變性壞死，這提示已造成一定程度的肝損傷。本研究中筆者觀察發(fā)現(xiàn)，在沒(méi)有明顯膿毒癥的假手術(shù)組NF-κB表達(dá)較低（0.60±0.54），而在膿毒癥B組，3 h后NF-κB表達(dá)顯著增高，12 h時(shí)達(dá)到高峰（12.20±0.32），24 h仍然高表達(dá)。與此同時(shí)，膿毒癥后早期肝組織COX-2 mRNA表達(dá)即增高，24 h時(shí)仍呈高表達(dá)，這個(gè)變化與NF-κB變化相一致。這說(shuō)明NF-κB參與膿毒癥肝損傷過(guò)程，而NF-κB的活化促進(jìn)了COX-2 mRNA的表達(dá)，而且COX-2 mRNA的表達(dá)增高可能是造成機(jī)體損傷的一種有害機(jī)制。當(dāng)使用COX-2特異性抑制劑NS-398干預(yù)后，COX-2 mRNA表達(dá)明顯降低，肝功能及肝細(xì)胞病理?yè)p傷明顯好轉(zhuǎn)，同時(shí)段NF-κB較膿毒癥組降低（P < 0.05）。Pearson相關(guān)分析，COX-2 mRNA與NF-κB呈正相關(guān)（r=0.685，P=0.042）。Strong等[15]的研究結(jié)果也表明：NS398通過(guò)抑制PGE2和COX-2 mRNA表達(dá)，從而明顯降低致炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)物水平，提高宿主存活率。這些變化使我們有理由相信，選擇性COX-2抑制劑在抑制COX-2 mRNA表達(dá)的同時(shí)，通過(guò)負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，減弱NF-κB的表達(dá)，從而改善肝損傷，有效保護(hù)肝細(xì)胞。

通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究表明，COX-2在膿毒癥后引起的肝損傷中占有重要地位，NS-398通過(guò)負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，特異性抑制COX-2來(lái)抑制肝細(xì)胞中NF-κB的表達(dá)，從而減輕肝細(xì)胞損傷。

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（收稿日期：2013-11-11 本文編輯：衛(wèi) 軻）

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（收稿日期：2013-11-11 本文編輯：衛(wèi) 軻）

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（收稿日期：2013-11-11 本文編輯：衛(wèi) 軻）