李蘋

（黑龍江仁合堂藥業(yè)有限責(zé)任公司，黑龍江 牡丹江 157100）

更辰膠囊由人參、淫羊藿、肉蓯蓉、谷維素、鹿茸、維生素B1、維生素E、麝香等藥味經(jīng)提取加工而成，具有益氣溫陽補腎之功效。用于腎陽虛癥及腎陽虛引起的更年期綜合征，癥見腰膝酸軟、心悸失眠、憂郁健忘、夜尿頻多等。其中人參和維生素B1為本方中的主要成分，為控制制劑質(zhì)量，現(xiàn)對方中谷維素成分用高效液相色譜法進(jìn)行定量研究。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀：A g i l e n t 1200液相色譜儀；WV D檢測器；1200工作站；A g i l e n t C 18（416 mm×150 mm5 u m）色譜柱，電子天平（德國賽多利斯公司）；T P 300型超聲波機(jī)。

三氯甲烷、乙醇、乙腈均為色譜純，水為娃哈哈純化水；對照品：（谷維素批號：13087601，由上海君創(chuàng)生物科技提供），供試品更辰膠囊為 (黑龍江仁合堂藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號：20131101、20131102、20131103，規(guī)格每粒 0.2 g)

2 色譜條件

高效液相色譜柱為安捷倫-C 18（416 mm×150 mm 5 u m），流動相：水一乙腈（55:45）；檢測波長231 n m；流速1.0 mL·mi n-1；柱溫28℃。進(jìn)樣量10 u L。理論塔板數(shù)按谷維素峰計不低于3000。3 方法與結(jié)果

3.1 溶液的制備

3.1.1 供試品溶液的制備

取裝量差異項下的樣品，研細(xì)取約相當(dāng)于谷維素10 mg，置于100 mL量杯中,加入三氯甲烷10 mL，再超聲處理10 mi n，使谷維素完全溶解，冷卻后加入乙醇稀釋至刻度后搖勻、濾過，最后取續(xù)濾液即得。

3.1.2 陰性溶液的制備

按供試品溶液制備方法同法制備不含谷維素的陰性樣品溶液。

3.1.3 對照溶液的制備

精密稱取谷維素對照品10 mg，置于100 mL量瓶中,再加入三氯甲烷20 mL，然后超聲處理10 mi n，使其完全溶解,待冷卻后加入乙醇稀釋至刻度后搖勻，制成每1 mL含谷維素0.1 mg的溶液，即得。

3.2 檢測波長的選擇及空白試驗

取上述對照品溶液，用紫外可見分光光度計在波長190～500 n m處掃描，結(jié)果谷維素的最大吸收波長為231 n m。因此確定本品的含量測定的波長為231 n m。

3.3 穩(wěn)定性試驗

取同一批號樣品溶液在室溫放置，精密吸取供試品溶液10 u L，分別于 0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h測定，含量分別為 99.8%、99.4%、100.2%、99.2%、100.1%、99.9%，計算含量，R S D為0.41%，說明溶液穩(wěn)定性良好，能滿足測定要求。

3.4 線性關(guān)系

精密稱取谷維素對照品10.03 mg，置于100 mL量杯中,加入三氯甲烷20 mL后超聲處理10 mi n，使其完全溶解,待冷卻后加入乙醇，稀釋至刻度后搖勻，制成每1 mL含谷維0.1003 mg的溶液，分別精密吸取 1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、6 mL、8 mL,分別置于25mL量瓶中，再加入乙醇，稀釋至刻度后搖勻。然后在上述色譜條件下，分別進(jìn)樣2次，分別計錄色譜圖,積分面積201.777、407.042、611.698、816.586、1022.343，以濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰面積 (Y)為縱坐標(biāo),計算線性回歸方程Y=5116.02 X-3.2284；R=0.999結(jié)果可知，在4.0～32.0 u g范圍之內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

3.5 精密度

取對照品溶液，連續(xù)6次注入高效液相色譜儀中進(jìn)行測定，記 錄 峰 面 積 ， 分 別 為 510.894、511.085、510.178、510.662、510.307、510.625，R S D為0.1%，說明儀器精密度好。

3.6 回收率試驗

精密稱取0.1 g樣品3份,然后分別加入谷維素對照品4 mg、5 mg和6 mg,按樣品測定項下的測定方法進(jìn)行測定,每份進(jìn)樣3次,結(jié)果平均回收率99.93%，R S D=0.6%。

回收率=（實際測得量-已知樣品量）/加入量×100%。

3.7 樣品含量測定

精密稱定供試品約相當(dāng)于谷維素10mg，置于100 mL量杯中，加三氯甲烷10 mL，再超聲處理10mi n，使谷維素完全溶解,冷卻后加入乙醇，稀釋至刻度后搖勻、濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。按上述色譜條件操作，用外標(biāo)法計算含量。批次為20131101、20131102、20131103，含量為 9.98、9.82、9.87。

4 討論

第一，柱溫的選擇。柱溫雖然對組分的分離度影響不大，但是對樣品組分的保留時間值卻有著較大的影響，經(jīng)過反復(fù)試驗，當(dāng)柱溫在28℃時就可以加快分析的速度，又可以保持出峰時間的恒定，從而既可保證試驗結(jié)果的重復(fù)性，也能保證試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

第二，本試驗采用了H P L C測定法,通過試驗后選擇波長為231 n m，測定方法更為合理,測定結(jié)果更加準(zhǔn)確地反映出谷維素的含量。

［1］ 化學(xué)藥品及制劑第一冊 WS1-47（B）-89［Z］.

［2］ 中國藥典2010年版二部［Z］.