宋力 張?zhí)m平 苑仁靜 張克立

1 信陽(yáng)師范學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院 （河南信陽(yáng) 464000）

2 湖北省武漢鐵路局衛(wèi)生監(jiān)督所 （湖北武漢 430011）

3 武漢大學(xué)化學(xué)與分子科學(xué)學(xué)院 （湖北武漢 430072）

技術(shù)進(jìn)步

微波法提取辣椒中抗氧化物質(zhì)的工藝研究

宋力1張?zhí)m平1苑仁靜2張克立3

1 信陽(yáng)師范學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院 （河南信陽(yáng) 464000）

2 湖北省武漢鐵路局衛(wèi)生監(jiān)督所 （湖北武漢 430011）

3 武漢大學(xué)化學(xué)與分子科學(xué)學(xué)院 （湖北武漢 430072）

采用微波法探討了干辣椒中提取物的抗氧化效果，通過(guò)測(cè)定吸光度表征提取物對(duì)羥自由基（·OH）的清除率并通過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明：乙醇體積分?jǐn)?shù)為95%、提取時(shí)間為1 min、微波功率為60 W時(shí)·OH的清除率最高。

辣椒 抗氧化物質(zhì) 微波法 正交試驗(yàn)法

0 引言

抗氧化物質(zhì)對(duì)人體健康非常有益，天然抗氧化劑在醫(yī)藥學(xué)、保健與功能食品、美容護(hù)膚等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用[1-5]，而人工合成的抗氧化劑對(duì)人體具有或多或少的毒副作用，因此篩選具有強(qiáng)抗氧化活性的天然資源已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和食品科學(xué)研究的新趨勢(shì)。我國(guó)地大物博，農(nóng)產(chǎn)品資源非常豐富，開(kāi)發(fā)利用各種農(nóng)產(chǎn)品提取生產(chǎn)高效抗氧化劑具有十分重要的意義。

辣椒含有豐富的抗氧化物質(zhì)，其有效成分主要包括維生素E、維生素C和β-胡蘿卜素[6]。本實(shí)驗(yàn)以干辣椒為原料，在微波輔助作用下對(duì)抗氧化物質(zhì)的提取工藝進(jìn)行了研究，通過(guò)單因素正交試驗(yàn)法對(duì)提取劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)、微波功率和微波處理時(shí)間等因素進(jìn)行了優(yōu)化，以期為辣椒的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)的理論數(shù)據(jù)參考和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

1.1 材料與主要試劑

原料：干辣椒（市售）。

試劑：無(wú)水乙醇、95%乙醇，開(kāi)封市芳晶化學(xué)試劑有限公司；FeSO4·7H2O，天津市凱通化學(xué)試劑有限公司；30%H2O2，天津市永大化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心；水楊酸，上?；瘜W(xué)試劑采購(gòu)供應(yīng)五聯(lián)化工廠；石油醚，天津博迪化工股份有限公司。以上試劑均為分析純。

1.2 主要儀器與設(shè)備

DHG-9076A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；KM快速研磨機(jī)、8411電動(dòng)震篩機(jī)，湘潭湘儀儀器有限公司；FA 2004電子分析天平，上海越平科學(xué)儀器有限公司；UV-754紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋，金壇市杰瑞爾電器有限公司；名秀光波G8023C7L-K3微波爐，佛山市順德區(qū)格蘭仕微波爐電器有限公司；SHZ-D(III)循環(huán)水式真空泵，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司。

2 辣椒提取物總抗氧化能力的測(cè)定

準(zhǔn)確稱取辣椒粉1 g，加入20 mL石油醚脫脂后加入20 mL乙醇，在一定微波功率下處理一定時(shí)間，減壓抽濾，取濾液。重復(fù)上述操作，合并兩次濾液，加入一定量相應(yīng)試劑進(jìn)行Fenton反應(yīng)，測(cè)定吸光度并按照一定公式計(jì)算清除自由基的能力[7]。

取3支試管，編號(hào)分別為1、2、3，其中1號(hào)為實(shí)驗(yàn)組、2號(hào)為對(duì)照組、3號(hào)為空白組。1號(hào)試管中依次加入1 mL 9 mmol/L水楊酸、1 mL提取液、1 mL 5 mmol/L Fe2+、1 mL蒸餾水、1 mL 30%H2O2。2號(hào)試管將1號(hào)試管中1 mL 30%H2O2替換為1 mL蒸餾水，3號(hào)試管將1號(hào)試管中提取液替換為1 mL蒸餾水，其他均與1號(hào)試管相同。在37℃下恒溫反應(yīng)30min，反應(yīng)結(jié)束后3支試管中各加入10 mL蒸餾水稀釋?zhuān)浞只靹蚝笤?10 nm處測(cè)定各試管中混合液的吸光度值，分別計(jì)為A1、A2、A3，根據(jù)公式（1）計(jì)算對(duì)羥自由基（·OH）的清除率，清除率越大，表示該樣品的抗氧化活性越強(qiáng)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1 單因素實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)中，很多因素都會(huì)影響辣椒中抗氧化物質(zhì)的提取效率。對(duì)所有參數(shù)均進(jìn)行具體研究既費(fèi)時(shí)又無(wú)必要，本課題僅討論影響提取效率的3個(gè)主要因素：微波功率、輻射時(shí)間、溶劑濃度。改變3個(gè)因素中的一個(gè)，其余2個(gè)因素不變，可以得到不同因素對(duì)提取率的影響[8-9]。

3.1.1 微波功率對(duì)提取率的影響

乙醇體積分?jǐn)?shù)為95%，提取時(shí)間設(shè)為1 min,改變微波功率分別為20、40、60、80 W，測(cè)定吸光度并計(jì)算·OH清除率，微波功率與·OH清除率的關(guān)系如圖1所示。當(dāng)微波功率從20 W增加到60 W時(shí)，提取液的抗氧化能力隨著微波功率的增加而增加，微波功率為60 W時(shí)，提取液的抗氧化能力達(dá)到最大，而后隨著微波功率的增加呈下降的趨勢(shì)。這是因?yàn)殡S著微波功率的增大，溫度上升，辣椒中的抗氧化成分多被氧化,導(dǎo)致提取率降低。

圖1 微波功率對(duì)清除率的影響

3.1.2 輻射時(shí)間對(duì)提取率的影響

微波功率為60 W，乙醇體積分?jǐn)?shù)為95%，改變提取時(shí)間分別為1、2、3 min，測(cè)定吸光度并計(jì)算·OH清除率，提取時(shí)間與·OH清除率的關(guān)系見(jiàn)圖2。不同提取時(shí)間對(duì)辣椒抗氧化能力的影響是不同的。當(dāng)提取時(shí)間從1 min增加到2 min時(shí)，提取液的抗氧化能力隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，時(shí)間為2 min時(shí)，提取液的抗氧化能力最大，而后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)。原因是隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，提取溶劑的揮發(fā)量增加，同時(shí)抗氧化劑被氧化的時(shí)間變長(zhǎng)，導(dǎo)致其提取率降低。

3.1.3 不同體積分?jǐn)?shù)的提取液對(duì)清除率的影響

微波功率為60 W，提取時(shí)間為2 min，改變?nèi)軇┮掖嫉捏w積分?jǐn)?shù)分別為85%、90%、95%、100%，測(cè)定吸光度并計(jì)算·OH清除率，乙醇體積分?jǐn)?shù)與·OH清除率的關(guān)系見(jiàn)圖3。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)由85%增加到95%時(shí)，提取液的總抗氧化能力逐漸增大，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為95%時(shí)，提取液的總抗氧化能力達(dá)到最大，而后呈下降趨勢(shì)。這是由于辣椒中的抗氧化劑在溶劑乙醇中的溶解度是有限的，達(dá)到一定濃度后形成過(guò)飽和溶液，使·OH清除率下降。

圖3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)清除率的影響

3.2 提取條件的優(yōu)化

采用L9(33)正交設(shè)計(jì)表，對(duì)微波功率、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)3個(gè)因素3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)選，以提取物抗氧化效果為考核指標(biāo)。表4為因素水平表,正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。

表4 正交試驗(yàn)的因素水平表

表5 L9（33）正交試驗(yàn)結(jié)果

由表5可知，各因素對(duì)實(shí)驗(yàn)影響的主次排序?yàn)椋篊、B、A，即各個(gè)因素對(duì)提取率的影響大小為：乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間、微波功率。綜合極差、均值和經(jīng)濟(jì)成本，確定微波法提取辣椒中抗氧化物質(zhì)的最佳工藝參數(shù)組合為A2B1C2，即功率為60 W、提取時(shí)間為1 min、乙醇體積分?jǐn)?shù)為95%。

4 結(jié)論

（1）微波法提取辣椒中抗氧化物質(zhì)的最佳工藝條件為：功率為60 W、提取時(shí)間為1 min、乙醇體積分?jǐn)?shù)為95%，所得抗氧化物質(zhì)對(duì)·OH的清除率為93.5%。

（2）微波法提取辣椒中抗氧化物的工藝與傳統(tǒng)方法相比，具有提取效率高、時(shí)間短、操作簡(jiǎn)單、節(jié)約原料和能源等優(yōu)點(diǎn)。使用微波法提取辣椒中的抗氧化物質(zhì)，對(duì)于天然抗氧化劑的加工具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義，可延長(zhǎng)辣椒生產(chǎn)的產(chǎn)業(yè)鏈，增加產(chǎn)品的附加值，為辣椒加工企業(yè)對(duì)辣椒進(jìn)行合理的深加工提供技術(shù)參考和理論、實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

[1] 龐戰(zhàn)軍,周政,陳瑗.自由基醫(yī)學(xué)研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.

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Study on the Extraction Technology of Antioxidants in Chilies by Microwave Method

Song Li Zhang Lanping Yuan Renjing Zhang Keli

Discusses the anti-oxidation activity of the sold dry chilies extracts by microwave extraction.Characterizes the clearance rate of hydroxyl radicals by determining absorbance and optimizes the extraction process by orthogonal test method.The results show that the clearance rate is highest when the volume fraction of ethanol is 95%,the extraction time is 1 min and the microwave power is 60 W.

Chili;Antioxidant;Microwave method;Orthogonal test method

TS202.3

2014年1月

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（20071026）

宋力女1967年生副教授主要從事無(wú)機(jī)材料化學(xué)和天然產(chǎn)物的提取研究