景彩霞，龐秋霞

（1.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室；2.生物化學(xué)和分子生物學(xué)教研室，陜西 延安716000）

梅毒是由蒼白螺旋體即梅毒螺旋體（treponema pallidum，TP）引起的一種慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病。近年來，梅毒已成為一種全球性疾病，嚴(yán)重危害著人類的健康和生命。此病病程長，人體感染后幾乎侵犯全身各組織與器官，臨床表現(xiàn)復(fù)雜，加上抗生素藥物的廣泛使用，使部分患者表現(xiàn)為隱性感染。據(jù)WHO估計(jì)全球每年約1200萬新發(fā)病例，主要集中在南亞、東南亞等地，在我國也增長迅速，已成為報(bào)告病例數(shù)最多的性病，其中以潛伏期梅毒占多數(shù)。

梅毒螺旋體進(jìn)入人體后產(chǎn)生兩種抗體：非特異性抗類脂質(zhì)抗體和特異性抗螺旋體抗體。梅毒血清學(xué)試驗(yàn)對梅毒診斷具有非常重要意義，本研究于2012-01-01～2012-12-30采集西安市中心醫(yī)院4000例血清標(biāo)本用梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（TP-ELISA）和梅毒螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)（TPPA）兩種方法檢測梅毒抗體并對結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，為臨床診斷梅毒提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料

血清標(biāo)本來源于西安市中心醫(yī)院門診、皮膚科、內(nèi)分泌科、感染科的4000例檢查者，年齡分布于0～76歲之間，其中男性2113例，女性1887例。

1.2 試劑與儀器

梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)試劑盒（上?？迫A生物工程股份有限公司），梅毒螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)試劑盒（日本富士株式會社）。RT-3900型全自動洗板機(jī)（深圳雷杜有限公司），RT-2100C型酶標(biāo)儀（深圳雷杜有限公司）。

1.3 檢測方法

4000例血清標(biāo)本分別用梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（以樣本OD≥2.1陰性對照平均OD為陽性）、梅毒螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)（以出現(xiàn)凝集顆粒為陽性）進(jìn)行檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩種方法陽性率比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 TP-ELISA法，TPPA法檢測梅毒抗體的陽性結(jié)果

通過對4000例住院及門診血清標(biāo)本分別進(jìn)行TP-ELISA法、TPPA法檢測。TP-ELISA法檢出梅毒抗體陽性144例，感染率為3.60%（144/4000）；TPPA法檢出梅毒抗體陽性138例，感染率為3.45%（138/4000）。兩種方法陽性率經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.132，P＞0.05）。

2.2 兩種方法檢測梅毒抗體的陽性符合率

TP-ELISA法檢出144例梅毒陽性標(biāo)本，TPPA法檢出138例，兩種方法均是陽性者共133例，均是陰性者3851例。TP-ELISA陽性TPPA陰性結(jié)果11例，TP-ELISA陰性TPPA陽性結(jié)果5例，兩種方法檢測梅毒抗體的陽性符合率為92.36%（133/144），陰性符合率為99.87%（3851/3856）。

3 討論

梅毒的傳播途徑較多，主要通過性接觸傳播，亦可經(jīng)過胎盤，輸血傳播［1］，極少數(shù)患者通過其他傳播途徑，如哺乳、接觸梅毒患者的日常生活用品而傳染。近年來我國發(fā)病呈明顯上升趨勢，梅毒檢查、篩查也日漸增多［2］。人類對梅毒無先天免疫力，梅毒螺旋體感染2周后即可產(chǎn)生IgM抗體，部分病人在經(jīng)過積極治療后IgM可轉(zhuǎn)陰。IgG型梅毒螺旋體抗體出現(xiàn)在感染四周左右，即使通過治療IgG抗體仍可通過記憶細(xì)胞的作用繼續(xù)產(chǎn)生，甚至終生在血清中存在。TP-ELISA法利用重組梅毒螺旋體TP47、TP17抗原包被微孔板和辣根過氧化物酶標(biāo)記的TP47、TP17雙抗原夾心法檢測血清中TP特異性IgM、IgG抗體，利用酶放大效應(yīng)，具有較高的特異性和靈敏度。TPPA法是用超聲裂解的梅毒螺旋體為抗原，以人工合成的惰性明膠顆粒為載體，與人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生肉眼可觀察的凝集反應(yīng)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：TP-ELISA法陽性144例，感染率為3.60%。TPPA法陽性138例，感染率為3.45%。兩種方法檢測梅毒抗體的陽性符合率為92.36%。陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明二者均可以用于梅毒的檢測。本次TP-ELISA陽性率較TPPA的高，可能與如下因素有關(guān)：①有的病人體內(nèi)易產(chǎn)生白蛋白抗體或異常蛋白質(zhì)［3］，這些物質(zhì)可干擾檢測結(jié)果，出現(xiàn)假陽性；②某些疾病中由于感染或免疫紊亂等會使機(jī)體產(chǎn)生與梅毒相交叉的抗體反應(yīng)，造成生物性假陽性；③標(biāo)本處理不當(dāng)，抽血后標(biāo)本凝集不完全即離心分離，纖維蛋白未完全析出，粘附在板孔堵塞洗板機(jī)針頭，造成洗板時清洗不徹底，造成假陽性結(jié)果；④標(biāo)本溶血，Hb具有類過氧化物酶的活性，溶血后反應(yīng)孔非特異性吸附Hb，洗滌時不易洗去，使本底吸光度值升高而造成假陽性。本實(shí)驗(yàn)中TPPA法陽性率高于楊惠元報(bào)道的0.91%［4］，這可能與標(biāo)本量大小和地區(qū)差異有關(guān)。

雖然TPPA法已被美國疾病預(yù)防控制中心定為確診方法，是當(dāng)前國內(nèi)外公認(rèn)的梅毒血清確證試驗(yàn)［5，6］，但由于試劑昂貴，需將標(biāo)本作系列稀釋后肉眼判斷結(jié)果，操作繁瑣，檢測時間長，較難實(shí)現(xiàn)自動化，不利于大批量標(biāo)本檢測。TP-ELISA法操作簡單，價格較低，對梅毒各期的檢出率都較高，可實(shí)現(xiàn)操作的自動化，適用對大量樣本的篩查試驗(yàn)。吳勁松［7］研究顯示TPPA對一、二、三期梅毒的檢查率高達(dá)到了100%。唐滿玲等在幾種梅毒血清學(xué)檢測方法中也證實(shí)TPPA法的特異性［8］。因此在臨床檢驗(yàn)中，可通過TP-ELISA作為梅毒的篩查試驗(yàn)，對于TP-ELISA法陽性者再進(jìn)一步作TPPA法確診，結(jié)合患者的病史和臨床表現(xiàn)綜合分析，避免對梅毒的誤診和漏診。

［1］李珍瑤，龍華泉，陳銀仲.3種臨床常用梅毒檢測方法的比較［J］.中國醫(yī)科大學(xué)，2011，19（1）：140.

［2］韓曉峰，劉蔚，李素君，等.ELISA法篩查梅毒抗體假陽性結(jié)果分析及應(yīng)對措施［J］.吉林醫(yī)學(xué)，2013，34（8）：1491.

［3］彭明喜.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測梅毒抗體假陽性的結(jié)果分析［J］.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2006，18（2）：127-128.

［4］楊惠元.四種梅毒檢測方法的臨床評價［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22（7）：1716.

［5］夏映鳳.臨床常見梅毒血清學(xué)檢測方法的合理選擇［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，24（8）：3042-3043.

［6］王長海，呂長坤.梅毒螺旋體感染篩選方法的臨床研究［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（6）：609-610.

［7］吳勁松.RPR與TPPA檢測對梅毒診斷及療效的價值分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（2）：416-417.

［8］唐滿玲，顧敏，將最明，等.幾種梅毒血清學(xué)檢測方法的評價及臨床應(yīng)用［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（9）：1105-1107.