謝 榮 熊衛(wèi)萍 洛 桑 張君麗

?

西藏野生靈芝高效日光溫室馴化栽培*

謝 榮 熊衛(wèi)萍 洛 桑 張君麗

（西藏農(nóng)牧科學(xué)院蔬菜研究所，西藏 拉薩 850032）

對分離自西藏米林縣、波密縣的野生靈芝菌株，采用脫袋全埋式覆土栽培方法，自動間歇噴霧增濕、蕾期加強(qiáng)通風(fēng)等技術(shù)措施，在西藏拉薩國家農(nóng)業(yè)科技示范園區(qū)高效日光溫室馴化栽培成功。

西藏；野生靈芝；溫室；馴化栽培

靈芝（）屬于多孔菌科靈芝屬，是一種名貴的藥用真菌。靈芝中含有多種活性成分，如多糖、甾類、三萜類、核苷等。靈芝有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、改善血液循環(huán)、扶正固本等功效。

西藏地區(qū)野生靈芝資源豐富，分布廣泛。保育促培，有序采挖，對于保護(hù)西藏野生靈芝種群及生物遺傳多樣性有重要意義。而通過利用現(xiàn)代園藝設(shè)施進(jìn)行野生靈芝的馴化栽培，則是實現(xiàn)資源化開發(fā)利用的重要途徑?，F(xiàn)將我們的馴化栽培試驗探索初步結(jié)果報道如下。

1 菌株來源

以組織分離法分離米林縣南伊鄉(xiāng)、波密縣札木鎮(zhèn)野生靈芝。

2 菌種制作

2.1 母種 PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL）：將馬鈴薯切片加水煮沸30 min，8層紗布過濾后定容至1 000 mL，在濾液中加入瓊脂、葡萄糖，分裝到180×180（mm）試管中，121 ℃滅菌0.5 h后擺斜面。

母種分離：選取野外采摘的幼嫩靈芝子實體，用無菌水清洗表面，再用75%酒精棉球進(jìn)行表面消毒，用手術(shù)刀將靈芝菌蓋從中間切開，將菌蓋內(nèi)部菌肉分割成0.5 cm2的小塊，用滅菌的鑷子將菌塊接種到PDA斜面培養(yǎng)基上。接種后置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3～5天后可見菌塊周圍長出白色菌絲并開始在培養(yǎng)基上蔓延生長。去除雜菌污染的試管，10～15天后可長滿試管斜面，即為母種M0代。

篩選出菌絲潔白濃密且均勻的試管斜面，轉(zhuǎn)管用于母種M1代培養(yǎng)或作菌種保藏。

2.2 原種 麥粒培養(yǎng)基：麥粒浸泡過夜，煮沸至麥粒裂開不白心，拌入闊葉木鋸末，以石灰、石膏調(diào)pH值至8.0，含水量60%～65%，裝瓶（250 mL），封0.5 cm厚闊葉木鋸末，壓實，加蓋，于126 ℃下滅菌2 h。

將生長正常的母種M1代試管斜面，在超凈工作臺上用滅菌的接種鏟將斜面分成若干1 cm2的小塊，均勻接種到麥粒培養(yǎng)基上，擰緊瓶蓋。1支180×180（mm）試管母種接5～6瓶原種。接種后放入25 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，查看萌發(fā)情況，去除雜菌污染的麥粒瓶，20～30天菌絲長滿至瓶底。

2.3 栽培種 木屑棉籽殼培養(yǎng)基（青岡木屑49%，棉籽殼49%，石灰1%，石膏1%），按照料水比1︰1～1.5混勻，機(jī)械攪拌培養(yǎng)料，調(diào)pH至8.0，含水量60%～65%，以手握緊培養(yǎng)料指縫不連續(xù)滴水為宜。裝袋（170 mm×330 mm），采用無棉蓋體封口，于126 ℃下滅菌2～3 h。

在超凈工作臺內(nèi)用滅菌的接種鏟刮去原種麥粒表面老化的菌皮，攪動松散麥粒，盡量均勻接種于袋料培養(yǎng)基袋肩位置，切勿在封口位置留下麥粒，以防接種點污染。接種后保持在18～23 ℃下培養(yǎng)，查看萌發(fā)情況，50～60天菌絲發(fā)滿至袋底。去除雜菌污染的菌包。

3 栽培方法和技術(shù)措施

制袋時間為2012年12月下旬，400余袋菌包于4月上旬定植于高效日光溫室的棚槽內(nèi)，直接利用上茬藏藥材栽培壤土，每個栽培槽內(nèi)分4列，每列15余包，臥式嵌入壤土，沙土過篩拌石灰覆蓋菌皮，厚度2 cm左右，表面用霧水噴濕，用黑色地膜覆蓋保濕，每天揭蓋，5～7天土壤表面有菌絲生成；用黑色遮陽網(wǎng)覆蓋保濕15～20天。

間歇微噴霧系統(tǒng)。在高過栽培槽表面1 m，架設(shè)噴嘴向上的微噴霧系統(tǒng)，噴管間距1 m，根據(jù)溫室內(nèi)溫度日變化需要，白天高溫時段（32 ℃以上）短時（1 h）間斷噴霧，中溫時段（25 ℃）長時（1.5 h）間斷噴霧0.5～1 min，夜間放下棉被，不噴霧。

遮陽處理。2013年雨季自4月開始，6月上旬經(jīng)歷短時高溫，因夏季太陽高度角最高，在日光溫室頂至腰部上位外用高密度遮陽網(wǎng)遮陽；腰部上位至腰風(fēng)口上位內(nèi)用低密度遮陽網(wǎng)遮陽。

通風(fēng)。自5月初開始現(xiàn)蕾，因6月上旬經(jīng)歷短時高溫，有出現(xiàn)呈“葫蘆”狀的蕾。遇晴天，于上午10時以后開頂風(fēng)口，同時掀起腰風(fēng)口開至下午5時。

4 結(jié)果與討論

4.1 不同菌株和栽培方式的靈芝子實體產(chǎn)量西藏野生靈芝高效日光溫室脫袋全埋式覆土栽培，4月上旬至6月初覆土，極端低溫15 ℃，極端高溫28 ℃；6月至8月，極端高溫35 ℃，極端低溫25 ℃；因2013年雨季提早，持續(xù)期長，每天平均空氣相對濕度不低于50%。覆土孕蕾期4月中旬至5月初，約15天；現(xiàn)蕾展芝期5月至6月下旬，約40天；成熟轉(zhuǎn)色期，6月下旬至8月初，約35天，全生育期90天。制袋時間冬末春初，覆土?xí)r間春末夏初，采收時間夏末秋初，在拉薩適合推廣夏秋靈芝栽培。

此次馴化栽培試驗充分利用了西藏豐富的光熱資源和溫室效應(yīng)，滿足了靈芝這一高溫型菌類生長發(fā)育所需的溫度條件；選擇拉薩夏秋季雨量充沛的時段栽培，并采用微噴霧和自然通風(fēng)辦法，解決了拉薩因干燥缺氧，靈芝在室內(nèi)因通風(fēng)不良而易形成“鹿角芝”這個瓶頸問題。

由表1、2可以看出，在西藏拉薩經(jīng)高效日光溫室脫袋覆土栽培的野生靈芝生物學(xué)效率略高于在米林縣南依鄉(xiāng)的拱棚袋栽。在拉薩地區(qū)通過現(xiàn)代園藝設(shè)施環(huán)境調(diào)控，能實現(xiàn)非典型生態(tài)優(yōu)勢區(qū)域的特色食用菌的馴化栽培。

表1 不同野生靈芝菌株生物學(xué)效率

表2 野生靈芝不同栽培方式生物學(xué)效率

4.2 野生與馴化栽培的靈芝子實體活性物質(zhì)含量

從表3檢測（委托廣東省微生物研究所完成）結(jié)果看，西藏拉薩高效日光溫室馴化栽培的野生靈芝，比原生境同種野生靈芝在其生理活性物質(zhì)多糖和三萜含量均有不同程度的提高。通過栽培基質(zhì)改良、環(huán)境調(diào)控等措施實現(xiàn)產(chǎn)量突破、質(zhì)量保證，應(yīng)是下一步努力的目標(biāo)。

表3 野生與馴化栽培的靈芝子實體生理活性物質(zhì)含量

注：多糖檢測方法參照NY/T 1676-2008，三萜檢測方法參照DB44/T496-2008。

國家食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系拉薩試驗站（CARS-24）

謝榮，男，助理研究員，主要從事西藏野生食用菌資源研究與利用及栽培技術(shù)推廣工作，E-mail：xr-20082004@163.com。

S567.3

A

2095-0934（2014）01-055-02