袁梅美 惠起源

延安大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西延安716000

華蟾素抗惡性腫瘤的研究進(jìn)展

袁梅美 惠起源

延安大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西延安716000

華蟾素為我國自行研制和開發(fā)的二類新藥，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、鎮(zhèn)痛等藥理作用，可提高中晚期癌癥患者的生活質(zhì)量，延長生存期，在臨床治療中應(yīng)用廣泛。華蟾素對惡性腫瘤的臨床療效已得到初步認(rèn)可，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，進(jìn)一步深入研究其藥理作用機(jī)制，充分發(fā)揮其獨(dú)特療效，更好地指導(dǎo)臨床用藥，仍是今后進(jìn)一步研究的方向。隨著華蟾素在臨床抗腫瘤中的廣泛應(yīng)用，現(xiàn)就華蟾素抗惡性腫瘤的機(jī)制、毒副作用及臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展做一綜述。

華蟾素；抗惡性腫瘤機(jī)制；毒副作用；臨床應(yīng)用

在中晚期癌癥的治療中，患者對化療藥物耐受性差，不良反應(yīng)大，治療效果也不令人滿意，而中藥的毒副作用小，人們已開始重視傳統(tǒng)中藥在腫瘤治療中的作用。臨床研究證實(shí)，以中藥為主的治療方案，能有效延長腫瘤患者的生存期及提高患者的生活質(zhì)量。目前，腫瘤的治療模式正向著提高患者生活質(zhì)量的方向轉(zhuǎn)變。華蟾素（cinobufagin）為蟾蜍科動物中華大蟾蜍（Bufobufo gargarizans cantor）或黑眶蟾蜍（Bufomelanostietus Schneider）等的全皮提取制劑，具有清熱解毒、利水消腫、軟堅散結(jié)等作用[1]。自古以來，我國就有著豐富的蟾蜍治療腫瘤的經(jīng)驗(yàn)，《神農(nóng)本草經(jīng)》中曾記載，“蟾蜍味辛寒，主邪氣，破癌堅血、癰腫、陰瘡，服之不患熱病”，為臨床運(yùn)用華蟾素治療腫瘤提供了理論依據(jù)。隨著對華蟾素不斷地深入研究，已證實(shí)華蟾素具有提高患者免疫功能、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)血管收縮、止痛等功能[2]。

1 抗惡性腫瘤機(jī)制

1.1 增強(qiáng)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)作用

華蟾素抗腫瘤作用的主要機(jī)制之一，是增強(qiáng)腫瘤患者的機(jī)體免疫力。研究已證實(shí)，華蟾素能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，提高患者免疫功能。李揚(yáng)[3]在臨床上治療晚期癌癥患者時，在常規(guī)抗癌藥物治療的基礎(chǔ)上加用華蟾素注射液，發(fā)現(xiàn)患者疼痛緩解率、NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞群活性均明顯提高。華蟾素既能促進(jìn)患者的體液免疫功能，又能促其進(jìn)細(xì)胞免疫功能，提高患者的機(jī)體免疫力及生存質(zhì)量，延長生存期。

1.2 抑制腫瘤細(xì)胞增殖

1.2.1 抑制腫瘤細(xì)胞DNA和RNA的合成DNA是細(xì)胞染色體的主要成分，貯存著物種的所有遺傳信息，對細(xì)胞的生命周期、性狀及個性等起著決定性作用。腫瘤細(xì)胞中的DNA含量可反映其惡性增殖能力，惡性腫瘤細(xì)胞中的DNA比正常細(xì)胞中的DNA含量明顯增多。華蟾素能調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的核苷酸代謝，干擾DNA和RNA的生物合成，阻礙細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，抑制腫瘤細(xì)胞增殖。劉莉等[4]研究發(fā)現(xiàn)，華蟾素注射液能使裸鼠人肝癌細(xì)胞的DNA含量明顯下降。

1.2.2 誘導(dǎo)腫瘤組織的細(xì)胞凋亡誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡為抗腫瘤藥物最多見的殺滅腫瘤細(xì)胞的形式?，F(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究表明，華蟾素可誘導(dǎo)多種腫瘤組織的細(xì)胞凋亡[5-7]。華蟾素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的機(jī)制，可能是通過激活細(xì)胞膜上的電壓依賴型鈣離子通道實(shí)現(xiàn)的。華蟾素可使細(xì)胞發(fā)生去極化，激活細(xì)胞膜上的電壓依賴型Ca2+通道，使膜外的Ca2+流向膜內(nèi)，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高，進(jìn)一步激活Ca2+依賴性離子通道，最終Ca2+作為第二信使，啟動腫瘤細(xì)胞的凋亡程序，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。馬麗娜等[8]研究發(fā)現(xiàn)，華蟾素作用于乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞后，細(xì)胞的形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化，細(xì)胞表面粗糙度增加，從形態(tài)學(xué)上說明華蟾素對MDA-MB-231細(xì)胞的促凋亡作用；同時，用流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞膜電位發(fā)生了去極化，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加，Ca2+作為細(xì)胞內(nèi)的第二信使，介導(dǎo)了MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡。

另外，細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的異常，可導(dǎo)致惡性腫瘤快速增殖、無限生長。而華蟾素還可能通過選擇性抑制細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的關(guān)鍵酶，如經(jīng)典MAPK通路中的蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase，PTK）、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPKs）等的表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。在臨床治療中，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是抗腫瘤治療的機(jī)制之一，由于華蟾素可從多方面誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，使其已成為腫瘤藥研究的熱點(diǎn)。

1.2.3 影響細(xì)胞中癌基因的表達(dá)癌基因和抑癌基因與細(xì)胞生長、分裂、分化密切相關(guān)，在腫瘤形成過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。細(xì)胞凋亡受原癌基因和抑癌基因調(diào)控的影響，如p53、c-myc、bax、bcl-2等與細(xì)胞凋亡的發(fā)生密切有關(guān)。其中p53、bax為抑癌基因，c-mye、bcl-2為原癌基因。趙志遠(yuǎn)[9]研究不同濃度華蟾素對U251細(xì)胞生長能力的影響，發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度升高，華蟾素可以逐漸抑制bcl-2蛋白表達(dá)，促進(jìn)bax蛋白表，使細(xì)胞凋亡率升高，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。

1.2.4 干擾細(xì)胞周期腫瘤是多基因變化導(dǎo)致細(xì)胞周期紊亂，細(xì)胞失控性生長所致的一類疾病，也可以說，腫瘤是一類細(xì)胞周期疾病。華蟾素可能通過細(xì)胞周期阻滯機(jī)制，發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用。蘇勁等[10]研究發(fā)現(xiàn)，華蟾素對膀胱癌細(xì)胞具有顯著的增殖抑制作用，且與華蟾素的濃度和作用時間呈正相關(guān)性，主要表現(xiàn)在使細(xì)胞周期停滯在S和G2期，說明細(xì)胞周期阻滯可能是華蟾素發(fā)揮抗腫瘤的重要機(jī)制之一。

1.2.5 抗腫瘤組織新生血管的生成腫瘤新生血管的生成與腫瘤組織的增殖、轉(zhuǎn)移緊密相關(guān)，腫瘤的直徑達(dá)到或超過1～2mm時，經(jīng)微環(huán)境滲透提供的營養(yǎng)物質(zhì)已不能保證腫瘤的生長，腫瘤細(xì)胞便合成和分泌各類血管生成因子和血管生成抑制因子，在這兩種因子的調(diào)控下，新生毛細(xì)血管網(wǎng)便會形成，為腫瘤提供營養(yǎng)，使腫瘤組織能夠繼續(xù)生長、發(fā)展。由于新生毛細(xì)血管的基底膜及內(nèi)皮組織的不完整性，為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)和侵襲轉(zhuǎn)移提供了便利條件，使腫瘤細(xì)胞更易進(jìn)入體內(nèi)循環(huán)和向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。華蟾素能可通過抑制或破壞新生血管的生成，達(dá)到抗腫瘤的作用。王南瑤等[11]研究發(fā)現(xiàn)，華蟾素能明顯抑制雞胚尿囊膜新生血管的生成，可能與VEGF、EGFR表達(dá)的下調(diào)有關(guān)。

1.2.6 逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥性（multidrug resistance，MDR）是指腫瘤細(xì)胞可耐受化學(xué)結(jié)構(gòu)不同、作用靶點(diǎn)不同的多種抗腫瘤藥物。腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性的產(chǎn)生，是致使惡性腫瘤化療失敗的主要原因之一。MDR已經(jīng)成為國內(nèi)外臨床治療中一個常見的難題，亟待解決。王玲等[12]研究發(fā)現(xiàn)，華蟾素可部分逆轉(zhuǎn)耐阿霉素人乳腺癌細(xì)胞MCF-7/ADM的MDR，其機(jī)制可能與抑制P-糖蛋白的功能及表達(dá)有關(guān)，以提高乳癌細(xì)胞內(nèi)阿霉素的濃度和對阿霉素的敏感性。

1.3 鎮(zhèn)痛作用

華蟾素已廣泛用于多種癌性疼痛的臨床輔助治療，其鎮(zhèn)痛作用主要是通過外周阿片受體介導(dǎo)。鄧?yán)钊氐萚13]采用小鼠熱板法、小鼠醋酸扭體法觀察華蟾素注射液的鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果腹腔注射華蟾素可顯著提高正常小鼠對熱刺激的痛閾，減少醋酸扭體法小鼠扭體的次數(shù)；腹腔注射（IP）0.04mg納洛酮能明顯地拮抗華蟾素的鎮(zhèn)痛作用，使小鼠痛閾顯著降低，說明華蟾素注射液的鎮(zhèn)痛作用可能是通過阿片受體介導(dǎo)的。在中樞和外周均有阿片受體分布，且均能夠介導(dǎo)鎮(zhèn)痛作用。鞏仔鵬等[14]研究發(fā)現(xiàn)外周阿片受體阻滯劑——納洛酮的四價鹽衍生物（naloxonemethiodide，NAL-M）能夠完全阻斷華蟾素注射液對小鼠疼痛反應(yīng)潛伏期的延長，取消其鎮(zhèn)痛作用，說明華蟾素主要是通過外周阿片受體達(dá)到鎮(zhèn)痛作用的，而與中樞阿片受體關(guān)系不大。臨床研究發(fā)現(xiàn)[15]，華蟾素在緩解癌性疼痛方面有較好的療效，且沒有發(fā)現(xiàn)阿片類藥物引起的呼吸抑制、成癮、耐受等中樞副作用，意味著華蟾素具有良好的開發(fā)前景。

2 臨床應(yīng)用

華蟾素作為一種新型的抗腫瘤藥物，已被廣泛應(yīng)用于抗腫瘤的臨床治療，無論在抗腫瘤細(xì)胞增殖還是在緩解癌性疼痛等輔助治療中，均具有明顯的療效，尤其對肝癌、肺癌、食管癌和胃癌的治療。

2.1 治療原發(fā)性肝癌

原發(fā)性肝癌是國內(nèi)外最常見的惡性腫瘤之一，惡性程度高，發(fā)展迅速，普遍對化療藥物耐藥，化療效果差，中位生存期短。隨著對中醫(yī)藥治療肝癌的不斷研究和開發(fā)，發(fā)現(xiàn)華蟾素對中晚期原發(fā)性肝癌有較好的療效，具有協(xié)同抗腫瘤和減輕放、化療不良反應(yīng)的作用，提高患者的生活質(zhì)量，延長生存期。劉小紅等[16]對中晚期原發(fā)性肝癌患者應(yīng)用Seldinger技術(shù)插管入肝動脈，先用5-FU 1000mg，順鉑50～60 mg，經(jīng)肝動脈灌注化療，然后把表阿霉素40～50 mg與40%超液化碘油乳化后從導(dǎo)管緩慢注入栓塞，每隔3～4周重復(fù)1次，進(jìn)行2～3次。TACE治療同時靜脈點(diǎn)滴華蟾素注射液20～30mL+5%葡萄糖500 mL，每周5次，連續(xù)4周為1個療程，連用2～3個療程；與單純做TACE組比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，華蟾素灌注組患者的免疫功能有所提高，且總中位生存期延長。

2.2 治療肺癌

當(dāng)今社會，肺癌在惡性腫瘤中的發(fā)病率和病死率居第一位，其中超過80%為非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）[17]。NSCLC在早期不易被發(fā)現(xiàn)，確診時常已進(jìn)入中晚期，一般存活時間不超過1年，5年存活率僅約10%[18]，曾被稱為人類的頭號“殺手”。丁永娟[19]研究發(fā)現(xiàn)將華蟾素與NI治療方案（長春瑞濱+異環(huán)磷酰胺）聯(lián)合應(yīng)用于中晚期NSCLC患者，其總有效率為61.54%，明顯高于常規(guī)NI治療組的38.46%（P＜0.05）；其Kamofsky評分改善程度也明顯優(yōu)于對照組，表明華蟾素能提高NI方案對中晚期NSCLC的化療效果，值得臨床推廣。

2.3 治療消化道惡性腫瘤

在胃癌、食管癌、大腸癌等消化道腫瘤的治療中，華蟾素也具有較好的臨床療效。黃景玉等[20]在臨床研究中發(fā)現(xiàn)華蟾素注射液配合希羅達(dá)治療晚期消化道惡性腫瘤能明顯緩解患者癥狀，改善其生活質(zhì)量，療效確切，在改善近期療效、生活質(zhì)量、緩解疼痛、白細(xì)胞下降方面較單用希羅達(dá)效果好，說明華蟾素與化療藥物聯(lián)合治晚期消化道腫瘤是臨床治療中的一種可選的方法。

2.4 治療其他惡性腫瘤

華蟾素對白血病、乳腺癌、皮膚癌等其他腫瘤的治療亦有一定的療效。在惡性腫瘤的治療中，華蟾素既能單獨(dú)應(yīng)用，也能與放化療聯(lián)合應(yīng)用，可增強(qiáng)療效和減輕放化療的毒副作用。此外，在癌性疼痛及其他腫瘤并發(fā)癥的治療上，華蟾素也有一定的治療效果。這為研究開發(fā)經(jīng)濟(jì)、有效的抗癌藥物提供了新的線索。

3 華蟾素毒副作用及防治

在華蟾素多年的臨床應(yīng)用中，最常見的不良反應(yīng)是靜脈炎，表現(xiàn)為注射部位紅腫、疼痛，用中心靜脈置管給藥可避免此反應(yīng)；其次是皮膚反應(yīng)，皮膚水皰樣損害是其主要表現(xiàn)形式，主要由Ⅰ型或Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)所致；少數(shù)患者還可出現(xiàn)乏力、納差、心律失常等不良反應(yīng)，在臨床中加強(qiáng)觀察和對癥處理即可。大量臨床研究表明，華蟾素不良反應(yīng)少，且對肝腎功能和血液系統(tǒng)均無明顯不良反應(yīng)，患者對其具有較好的耐受性。與常規(guī)化療藥物相比，華蟾素對機(jī)體的不良反應(yīng)少，毒副作用小，為新的抗癌藥物的研究、開發(fā)及臨床應(yīng)用提供了廣闊的前景。

4 總結(jié)與展望

華蟾素是一種具有抗腫瘤作用的傳統(tǒng)中藥，具有良好的提高患者免疫力、抑制腫瘤細(xì)胞生長并誘導(dǎo)其凋亡、提高患者生活質(zhì)量、延長生存期的作用，在臨床中得到了廣泛應(yīng)用，已被我國列為國家級中藥保護(hù)品種。大量臨床及實(shí)驗(yàn)研究證明，華蟾的抗癌活性高，毒副作用小，與放、化療聯(lián)合運(yùn)用，可增強(qiáng)療效，減少放化療劑量和不良反應(yīng)，改善腫瘤細(xì)胞的MDR。在抗癌治療中，應(yīng)用中西醫(yī)相結(jié)合的方法，可充分發(fā)揮我國中藥的獨(dú)特作用，更有效地治療腫瘤。進(jìn)一步深入研究華蟾素的藥物成分、藥理機(jī)制、聯(lián)合用藥的方法及劑量，可為中晚期癌癥患者提供一種經(jīng)濟(jì)、簡單、安全有效的新方案。

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Research progress on anti-tum or of cinobufagin

YUAN Meimei HUIQiyuan
Departmentof Gastroenterology,the Affiliated Hospital of Yan'an University,Shaanxi Province,Yan'an 716000,China

As a kind of second-class and self-developed new drug,cinobufagin can improve body immunity function, inhibit tumor cell proliferation,ease pain and so on.It can improve the quality ofmiddle-late phased cancer patients' life,prolong their survival time.It has been widely used in clinical treatment.Cinobufagin's clinical effect on malignant tumor has been already admitted provisionally.It remains the direction of research in the future,that usingmodern science and technology to further study its pharmacologicalmechanisms,fully play it's unique efficacy and guide clinicalmedication more reasonably.As cinobufagin has been widely used in clinical anti-tumor,this paper summarizes the research progress of cinobufagin's anti-tumor,mechanism,adverse reaction,and clinical application.

Cinobufagin;Anti-tumormechanism;Adverse reaction;Clinical application

R285.5

A

1673-7210（2014）01（b）-0044-03

2013-11-05本文編輯：張瑜杰）