路利芹，崔海燕，張立春，劉 權(quán)，秦 波*

1中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所中國(guó)科學(xué)院西北特色植物資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/甘肅省天然藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蘭州 730000;2內(nèi)蒙古通遼市氣象局，通遼 028000

瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)為瑞香科狼毒屬多年生草本植物，廣泛分布于中國(guó)東北、華北、西南及西北等地區(qū)的草地及高山向陽(yáng)處。近年來(lái)，瑞香狼毒在我國(guó)局部草原地區(qū)大面積蔓延，逐漸取代原有物種，形成優(yōu)勢(shì)種群，影響草地植物生態(tài)平衡。瑞香狼毒全株有毒，早春時(shí)節(jié)，牲畜搶青誤食造成中毒致死，危害草地畜牧業(yè)生產(chǎn)［1］。瑞香狼毒根入藥，能散結(jié)、逐水、止痛、殺蟲，主治水氣腫脹、淋巴結(jié)核、骨結(jié)核［2］。迄今為止，國(guó)內(nèi)外對(duì)瑞香狼毒根的化學(xué)成分及其生物活性進(jìn)行了大量研究，從中分離得到了二萜類、木脂素類、揮發(fā)油類、香豆素類和黃酮類化合物［3］，但對(duì)其地上部分化學(xué)成分的研究鮮有報(bào)道。為充分開發(fā)利用瑞香狼毒地上部位豐富的植物資源，我們對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到了11 種化合物，結(jié)合理化性質(zhì)和波譜分析，分別鑒定為:1-亞油酸-棕櫚酸-甘油酯(1)亞麻酸(2)，亞油酸(3)，β-谷甾醇(4)，亞麻酸乙酯(5)，西瑞香素(6)，異新狼毒素A(7)，丙二酸單乙酯(8)，傘形花內(nèi)酯(9)，新狼毒素B(10)和龍膽酸(11)。其中，化合物1、8 和11 為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀SW-CJ-2G 購(gòu)自瑞士Buchi 公司，柱層析用硅膠(200～300 目)由青島海洋化工廠生產(chǎn)，凝膠Sephadex LH-20 為Pharmacia Fine Chemical 公司生產(chǎn)，薄層色譜用硅膠板GF254(0.20～0.25 mm)為青島海洋化工廠出品。1H 和13C NMR 譜在氘代溶劑中用Varian Mercury-400BB 超導(dǎo)核磁共振儀測(cè)定，以TMS 為內(nèi)標(biāo)，單位為δ ppm。所用化學(xué)試劑均為分析純。

瑞香狼毒地上部分實(shí)驗(yàn)樣品2011 年9 月采自甘肅天祝，由甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)的徐長(zhǎng)林教授鑒定。

2 提取和分離

瑞香狼毒地上部分樣品14 kg，陰干，粉碎，采用滲濾法以95%乙醇提取，提取液經(jīng)減壓濃縮后得棕黑色浸膏約1068 g。將此浸膏懸浮于蒸餾水，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液減壓濃縮得到上述四個(gè)部分萃取物和水相提取物。取石油醚萃取物285 g，硅膠拌樣后上硅膠柱，以石油醚∶丙酮(1∶0～0∶1)梯度洗脫，其中石油醚∶丙酮30∶1 洗脫部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，得到化合物1(28 mg)、2(8 mg)和3(4 mg)，石油醚∶丙酮10∶1 洗脫部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，得到化合物4(1020 mg);氯仿萃取物240 g，硅膠拌樣后上硅膠柱，以氯仿∶甲醇(1∶0～0∶1)梯度洗脫，其中氯仿∶甲醇50∶1 洗脫部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析和Sephadex LH-20 純化，得到化合物5(12 mg)和6(30 mg)，氯仿∶甲醇20∶1洗脫部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析和Sephadex LH-20 純化，得到化合物7(17 mg)和8(4 mg);乙酸乙酯萃取物40 g，硅膠拌樣后上硅膠，以氯仿∶甲醇(1∶0～0∶1)梯度洗脫，再經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析和Sephadex LH-20 純化，得到化合物9(12 mg)、10(520 mg)和11(38 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 黃色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.31 (4H，m，H-9'，H-10'，H-12'，H-13')，4.30 (2H，dd，J=4.3 Hz，11.9 Hz，H-1)，4.17 (2H，dd，J=6.2 Hz，11.9 Hz，H-3)，2.73 (1H，m，H-2)，2.33 (4H，m，H-2'，2'')，0.84 (6H，m，H-18'，16'');13C NMR (CD3Cl，100 MHz)δ:62.2 (t，C-1，3)，69.1 (d，C-2)，173.2 (s，C-1')，174.5 (s，C-1'')，130.2 (d，C-9')，130.1 (d，C-10')，128.1 (d，C-12')，127.9 (d，C-13)，33.9～22.5 (t，CH2)，14.01 (q，C-18'，16'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道一致，故鑒定其為1-亞油酸-棕櫚酸-甘油酯。

化合物2 無(wú)色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.36 (6H，m，H-9，10，12，13，15，16)，2.79(4H，br s，H-11，14)，2.35 (2H，t，J=7.2 Hz，H-2)，1.95～2.07 (4H，m，H-8，17)，1.53～1.65 (2H，m，H-3)，1.25～1.45 (8H，m)，0.95 (3H，t，J=7.2 Hz，H-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］報(bào)道一致，故鑒定其為亞麻酸。

化合物3 無(wú)色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.36 (4H，m，J=1.2 Hz，H，10，12，13)，2.77 (2H，m，J=6.4 Hz，H-11)，2.35 (2H，t，J=7.2 Hz，H-2)，2.04 (4H，m，J=7.2 Hz，H-8，14)，0.89 (3H，m，J=3.6 Hz，H-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報(bào)道一致，故鑒定其為亞油酸。

化合物4 無(wú)色針狀結(jié)晶，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.35 (1H，br d，J=4.8 Hz，H-6)，3.58(1H，m，H-3)，1.01 (3H，s，H-29)，0.91 (3H，d，J=8.0 Hz，H-21)，0.85 (3H，m，H-29)，0.84 (3H，m，H-26)，0.74(3H，m，H-27)，0.68(3H，s，H-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報(bào)道一致，與標(biāo)準(zhǔn)品β-谷甾醇薄層對(duì)照Rf值一致，故鑒定為β-谷甾醇。

化合物5 淡黃色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:4.12 (2H，dd，J=7.2 Hz，-OCH2-)，0.88 (3H，t，J=7.2 Hz，-CH3)，其他數(shù)據(jù)與亞麻酸一致，C 譜上δ=60.1 的峰也證明了有酯基的存在，故鑒定為亞麻酸乙酯。

化合物6 無(wú)色結(jié)晶，1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:7.89 (1H，s，H-4)，7.22 (1H，s，H-5)，6.87(1H，s，H-8)，6.39 (1H，d，J=9.6 Hz，H-3')，8.05(1H，d，J=9.2 Hz，H-4)，7.72 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5')，7.12 (1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6)，7.20(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，3.82 (3H，s，-OCH3);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:159.9 (C-2)，159.6(C-2')，156.9 (C-7')，154.9 (C-9')，150.4(C-7)，147.4 (C-9)，145.6 (C-3')，144.0 (C-6')，135.7(C-3)，130.9(C-4)，129.8 (C-5')，114.4(C-10)，113.9 (C-10')，113.4 (C-4')，110.1 (C-5)，109.3(C-6)，104.0 (C-8)，102.7 (C-8')，56.0 (-OCH3)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報(bào)道一致，故鑒定為西瑞香素。

化合物7 淺黃色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:7.08 (4H，d，J=8.4 Hz，H-2'，2'''，6'，6''')，6.80 (4H，d，J=8.4 Hz，H-3'，3'''，5'，5''')，5.94 (2H，d，J=2.0 Hz，H-8，H-8'')，5.81 (2H，d，J=2.0 Hz，H-6，H-6'')，5.48(1H，s，H-2，H-2'')，3.33 (2H，s，H-3，3'');13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:197.0 (C-4，C-4'')，167.3(C-7，C-7'')，164.9 (C-5，C-5'')，163.9 (C-9，C-9'')，157.9 (C-4'，4''')，128.2 (2'，2'''，6'，6''')，128.0 (C-1'，1''')，116.0 (C-3'，3'''，5'，5''')，102.3 (C-10，C-10'')，96.4 (C-6，C-6'')，95.3 (C-8，C-8'')，81.3(C-2，C-2''')，497.3 (C-3，3'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］報(bào)道一致，故鑒定為異新狼毒素A。

化合物8 白色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:1.24 (3H，t，J=7.2 Hz，-CH3)，3.37(2H，s，H-2)，4.15 (2H，q，J=7.2 Hz，OCH2)，10.21 (1H，br s，-COOH);13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:14.3 (C-5)，41.7 (C-2)，61.5 (C-4)，167.4 (C-3)，168.1 (C-1)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］報(bào)道一致，故鑒定為丙二酸單乙酯。

化合物9 無(wú)色結(jié)晶，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:6.16(1H，d，J=9.2 Hz，H-3)，6.76(1H，d，J=8.4 Hz，H-8)，6.85 (1H，d，J=8.4 Hz，H-6)，7.52(1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，7.87 (1H，d，J=9.6 Hz，H-4)，9.5 (1H，br s，-OH);13C NMR(CD3COCD3，100 MHz)δ:160.2 (C-2)，149.7 (C-7)，145.1 (C-8a)，143.7 (C-4)，132.2 (C-8)，118.9 (C-5)，112.5 (C-6)，112.1 (C-3)，111.2 (C-4a)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］報(bào)道一致，故鑒定為傘形花內(nèi)酯。

化合物10 棕色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:3.16 (1H，br s，H-3)，3.36 (1H，dd，J=9.2，3.6 Hz，H-3'')，5.17 (1H，d，J=9.2 Hz，H-2)，5.41 (1H，d，J=4.8 Hz，H-2')，5.88 (2H，s，H-6'，H-8')，5.98 (1H，s，H-6)，6.10 (1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.77 (2H，J=8.8 Hz，H-13'，H-15')，6.89(2H，d，J=8.4 Hz，H-12'，16')，7.01 (2H，d，J=8.8 Hz，H-13，15)，7.24 (2H，d，J=7.6 Hz，H-12，16);13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:49.0 (C-3)，49.8 (C-3'')，80.8 (C-2)，82.8 (C-2'')，95.7 (C-8)，96.0 (C-8'')，96.8 (C-6)，97.1 (C-6'')，103.7(C-10)，104.8 (C-10'')，116.0 (C-3'，5')，116.4(C-3'''，5''')，128.1 (C-2'，6')，128.5 (C-1')，129.9(C-1''')，130.6 (C-2'''，6''')，158.3(C-4')，158.6(C-4''')，162.8 (C-9)，164.8 (C-5，9'')，165.3 (C-5'')，167.3 (C-7)，167.5 (C-7'')，196.0(C-4)，198.1 (C-4'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］報(bào)道一致，故鑒定為新狼毒素B。

化合物11 無(wú)色針晶，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:6.85(1H，d，J=8.8 Hz，H-3)，7.09(1H，dd，J=8.8 Hz，3.2 Hz，H-4)，7.36 (1H，d，J=3.2 Hz，H-6)，10.49 (2H，brs，2，5-OH);13C NMR(CD3COCD3，100 MHz)δ:112.8 (C-3)，115.5 (C-6)，118.7 (C-1)，124.9 (C-4)，150.2 (C-5)，156.3(C-2)，172.3 (-COOH)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］報(bào)道一致，故鑒定為龍膽酸。

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