金 亮，田丹青，李小白，李 梅

（1.浙江省蕭山棉麻研究所浙江省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究開發(fā)中心，浙江杭州 311202；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學院園藝研究所，浙江杭州 310021；3.浙江大學農(nóng)生環(huán)分析測試中心，浙江杭州 310058）

金桂與丹桂花茶抗氧化活性的比較

金 亮1，田丹青1，李小白2，李 梅3

（1.浙江省蕭山棉麻研究所浙江省農(nóng)業(yè)科學院花卉研究開發(fā)中心，浙江杭州 311202；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學院園藝研究所，浙江杭州 310021；3.浙江大學農(nóng)生環(huán)分析測試中心，浙江杭州 310058）

選用金桂、丹桂花茶為研究對象，并以西湖龍井、祁門紅茶為參照，比較研究其抗氧化活性。結(jié)果表明，不同茶的DPPH·、ABTS·+清除活性以及鐵還原氧化能力（FRAP）、總酚含量一般都存在極顯著差異（P＜0.01）。丹桂花茶具有極顯著高于金桂花茶的抗氧化活性和總酚含量。除ABTS·+清除活性外，丹桂花茶具有超過祁門紅茶的DPPH·清除活性和總酚含量，而其FRAP值也與祁門紅茶相當。

桂花；金桂；丹桂；抗氧化活性

桂花（Osmanthus fragrans）屬木犀科木犀屬植物，原產(chǎn)于我國西南部，是著名的觀賞及芳香植物，在長江中下游地區(qū)普遍栽培。我國擁有悠久的食用桂花的傳統(tǒng)，桂花可用于制酒、制茶、制作糕點、飲料等［1］。桂花品種繁多，根據(jù)花色主要可分為金桂（Osmanthus fragrans var.thunbergii）、銀桂（O.fragrans var.latifolius）和丹桂（O. fragrans var.aurantiacus）3種［2］。金桂花色橙黃，丹桂花色橙紅，是主要的桂花茶制作原料。近年來，以花為茶受到廣泛歡迎，而評價和篩選具有強抗氧化活性的天然資源已成為生物學、醫(yī)學和食品科學研究的熱點［3］。本研究采用體外抗氧化模型試驗（即DPPH·、ABTS·+清除活性及鐵還原氧化能力測定），選取金桂、丹桂花茶為材料，并以綠茶西湖龍井、祁門紅茶為參照，探討其抗氧化活性和總酚含量，為進一步開發(fā)、研究不同桂花的保健價值提供一定的技術依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

收集金桂、丹桂制成的桂花茶各500 g，烘干備用，同時收集西湖龍井、祁門紅茶茶葉。

試劑有2，2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基（DPPH）、2，2'-聯(lián)氨-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺鹽（ABTS）、過硫酸鉀、奎諾二甲基丙烯酸酯（Trolox）、福林酚、2，4，6-三吡啶三吖嗪（TPTZ）、三氯化鐵，購自Sigma-Aldrich公司；碳酸鈉、沒食子酸購自阿拉丁試劑公司。其他化學試劑均為分析純及以上級。

1.2 茶湯制備

將各樣品研磨成粉，40目（0.42 mm）篩過濾。取各樣品1.00 g置于玻璃瓶中，加入250 m L煮沸的超純水，持續(xù)震蕩浸泡1 h后，冷卻過濾待用。

1.3 抗氧化活性測定

采用DPPH、ABTS和FRAP（ferric reducing antioxidant power）3種方法測定抗氧化活性。

DPPH法參照Wojdylo等［4］的DPPH·清除活性方法，略作修改來測定茶湯的抗氧化活性。取甲醇稀釋的DPPH溶液（吸光率為0.700±0.002）4.0 m L，加入0.1 m L適當稀釋的茶湯，充分混合，室溫下反應6 h，測517 nm處的吸光值（D517）。以Trolox為標樣繪制標準曲線。測量結(jié)果以每100 g樣品清除DPPH·能力相當于Trolox（Trolox equivalent antioxidant capacity，TEAC）的毫摩爾數(shù)（mmol TEAC·100 g-1）表示。

ABTS法茶湯的總抗氧化能力參照ABTS法［5］測定，略作修改。試驗前按體積比2∶1將7 mmol· L-1ABTS母液與2.45 mmol·L-1過硫酸鉀溶液混合，室溫下避光靜置過夜，反應得到ABTS·+溶液。將上述溶液用適量80%乙醇稀釋至D734= 0.700±0.002。取稀釋后的ABTS·+溶液4.0 m L，加入0.1 m L適當稀釋的茶湯混合，室溫下反應6 min，立刻測D734值。以Trolox為標樣繪制標準曲線。結(jié)果以每100 g樣品清除ABTS·+自由基能力相當于Trolox的毫摩爾數(shù)（mmol TEAC· 100 g-1）表示。

FRAP法［6］測定抗氧化活性。取50μL適當稀釋的茶湯，加入1.0 mL TPTZ工作液（由0.3 mol· L-1醋酸鹽緩沖液，10 mmol·L-1TPTZ溶液，20 mmol·L-1FeCl3溶液按體積比10∶1∶1組成），混勻后37℃下反應30 min，測定D593值。使用不同濃度的Trolox測定標準曲線。樣品抗氧化活性（FRAP值）以達到同樣吸光度所需的Trolox的毫摩爾數(shù)（mmol TEAC·100 g-1）表示。

1.4 總酚含量的測定

總酚含量采用福林酚比色（Folin-Ciocalteu）法測定［7］，略作修改。在5 m L離心管中加入各樣品茶湯0.1 mL，再加入0.5 mol·L-1福林酚試劑0.5 mL，充分震蕩混合后加入1.0 mL飽和碳酸鈉溶液（75 g· L-1），室溫下避光靜置2 h，測D760值。標準曲線采用沒食子酸（5～100μg·mL-1）為標樣繪制。測量結(jié)果以每100 g茶葉的沒食子酸當量（gallic acid equivalent，GAE）計算（g GAE·100 g-1）。

1.5 數(shù)據(jù)分析

使用DPS進行方差分析。對于有顯著差異的各處理平均值用最小顯著檢測差異顯著性。本文所有試驗均重復3次。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗氧化活性

由圖1可看出，4種茶的DPPH·的清除活性排序為西湖龍井＞丹桂＞金桂＞祁門紅茶。丹桂花茶的DPPH·清除活性極顯著低于西湖龍井，但極顯著高于祁門紅茶及金桂（P＜0.01）。金桂的DPPH·的清除活性與祁門紅茶差異不顯著。

圖1 不同種類茶葉抗氧化活性和總酚含量比較

4種茶對ABTS·的清除活性具有極顯著性差異。ABTS·+的清除活性排序為西湖龍井＞祁門紅茶＞丹桂＞金桂?？梢?，金桂和丹桂的ABTS·+的清除活性顯著低于測試的綠茶和紅茶，但丹桂的清除活性仍極顯著高于金桂。

不同茶的FRAP值排序為西湖龍井＞丹桂＞祁門紅茶＞金桂。丹桂的FRAP值略高于祁門紅茶，但差異不顯著，而丹桂的FRAP值仍極顯著高于金桂。

2.2 總酚含量

由圖1可知，不同茶的總酚含量具有顯著性差異?？傮w上，總酚含量由高到低依次為西湖龍井茶、丹桂、祁門紅茶、金桂。丹桂總酚含量極顯著高于祁門紅茶及金桂。

3 小結(jié)與討論

研究表明，茶葉中對身體健康最有益的物質(zhì)是具有很強抗氧化能力的茶多酚，可有效清除氧自由基和脂類自由基，預防脂質(zhì)過氧化，且具有抑制腫瘤發(fā)生、延緩衰老等功能［8］。對于綠茶和紅茶的抗氧化活性已有研究［9］。喝茶有助于健康已被人們所接受。而桂花、菊花等植物花朵干燥后制成使用類似茶的沖泡式飲品，具有方便、適口、香味、抗氧化等保健特點。

本文使用3種評價體系比較金桂、丹桂花茶抗氧化活性，3種方法的測定結(jié)果略有不同，其原因在于各抗氧化評價體系本身就存在一定的差異［10］。當有供氫能力的抗氧化劑存在時（如酚類），DPPH·溶液的顏色變淺，吸光度變小。在有供氫能力的抗氧化劑存在下，ABTS·+與之反應，變成沒有顏色的ABTS。FRAP值反映的是被測物將Fe3+還原成Fe2+的能力。金桂、丹桂的DPPH值和FRAP值相對高于其ABTS值，這可能是其含有的抗氧化劑具有較強的DPPH·清除活性及將Fe3+還原成Fe2+的能力，但相對的ABTS·+清除活性較弱。使用多種方法能更系統(tǒng)、準確的評價植物的抗氧化活性。

盡管與綠茶西湖龍井相比，金桂、丹桂的抗氧化活性、總酚含量低于前者，但丹桂花茶具有超過祁門紅茶的DPPH·清除活性和總酚含量，而其FRAP值也與祁門紅茶相當，且丹桂花茶的3種抗氧化活性指標均顯著高于金桂花茶，這表明丹桂比金桂更具營養(yǎng)價值，具有進一步開發(fā)和綜合利用的潛力。

［1］ 楊秀蓮，趙飛，王良桂.25個桂花品種花瓣營養(yǎng)成分分析［J］.福建林學院學報，2014，34（1）：5-10.

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（責任編輯：張瑞麟）

S 685.13

A

0528-9017（2014）11-1746-03

文獻著錄格式：金亮，田丹青，李小白，等.金桂與丹桂花茶抗氧化活性的比較［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學，2014（11）：1746-1748.

2014-06-24

杭州市科技重大創(chuàng)新項目（20131812A18）；浙江省農(nóng)業(yè)科學院科技創(chuàng)新能力提升工程

金 亮（1981-），男，安徽淮南人，助理研究員，博士，從事植物分子遺傳與食品化學研究工作。E-mail：zjulab @163.com。