王 建 沃妮娜 邱 江
(1.常州市武進區(qū)動物疫病預防控制中心,江蘇常州 213021;
2.常州出入境檢驗檢疫局,江蘇常州 213002;
3.揚州市邗江區(qū)公道鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)推廣服務中心,江蘇揚州 225000)
大腸桿菌的藥敏試驗
王 建1沃妮娜2邱 江3*
(1.常州市武進區(qū)動物疫病預防控制中心,江蘇常州 213021;
2.常州出入境檢驗檢疫局,江蘇常州 213002;
3.揚州市邗江區(qū)公道鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)推廣服務中心,江蘇揚州 225000)
2012年10月11日,常州市武進區(qū)某養(yǎng)豬戶帶病死豬來獸醫(yī)站就診,據(jù)畜主介紹,家里飼養(yǎng)的3月齡左右的豬有27頭,體重30~45 kg,20 d前曾給該豬群免疫過豬瘟疫苗,10月9日突然發(fā)病。病豬精神沉郁,食欲廢絕,體溫38.5℃~39.5℃,眼瞼水腫下垂,下頜以及頸部水腫,眼結(jié)膜充血,步態(tài)不穩(wěn),不久出現(xiàn)共濟失調(diào),盲目行走或轉(zhuǎn)圈,叫聲嘶啞,心跳疾速,呼吸快而淺,后期倒地不起。到目前為止,發(fā)病豬已有4頭,剛死亡2頭,且為豬群中體格較大者。在就診之前,畜主已經(jīng)給發(fā)病豬使用過土霉素、血蟲靈等藥物,但均未見效。養(yǎng)豬戶帶1頭剛病死的仔豬求診。筆者等對病原進行分離、鑒定,并對分離出的細菌進行藥物敏感試驗,篩選敏感的抗菌素,指導臨床用藥。
生化發(fā)酵管;藥敏紙片(購自杭州天和微生物試劑有限公司);恒溫生化培養(yǎng)箱(南京儀器廠生產(chǎn));高壓滅菌鍋(上海三申儀器有限公司生產(chǎn));普通光學顯微鏡(Leica公司生產(chǎn));牛肉浸膏、蛋白胨、瓊脂粉、氯化鈉、麥康凱培養(yǎng)基粉(購自上?;瘜W試劑廠);5%無菌兔抗凝鮮血、接種環(huán)、接種針、酒精燈、剪刀、鑷子等。
從麥康凱培養(yǎng)基上挑取分離培養(yǎng)的純菌落,在普通瓊脂表面劃線,所劃線緊靠一起,并不斷調(diào)整劃線方向,使普通瓊脂培養(yǎng)基表面細菌分布均勻,且連成一片,再將鑷子在酒精燈火焰上灼燒,冷卻后,夾取藥敏紙片,緊密貼附于培養(yǎng)基的表面,37 ℃培養(yǎng)箱中倒扣培養(yǎng),18 h后觀察培養(yǎng)基上細菌生長情況,并用直尺測量抑菌圈直徑。
筆者等對菌株進行了分離。將分離的細菌劃布普通瓊脂培養(yǎng)板,分別用含呋喃妥因(呋)、菌必治(菌)、羅紅霉素(羅)、林可霉素(林)、四環(huán)素(四)、利福平(利)、妥布霉素(妥)、環(huán)丙沙星(環(huán))、先鋒噻肟(肟)、鏈霉素(鏈)和復方新諾明(復)的藥敏紙片進行藥敏試驗,試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計見附表。
附表 藥敏試驗結(jié)果統(tǒng)計
根據(jù)細菌分離培養(yǎng)、鏡檢結(jié)果、在麥康凱鑒別培養(yǎng)基上的生長狀況并結(jié)合生化試驗結(jié)果可判定,筆者等從患水腫病的病死豬體內(nèi)實質(zhì)器官中成功分離出致病性大腸桿菌;且對該株大腸桿菌進行的藥敏試驗結(jié)果表明,菌必治和先鋒噻肟能有效抑制細菌生長,可作為該病例的預防和治療性藥物。
大腸桿菌容易形成抗藥性,而且大腸桿菌可通過菌毛將其抗藥性質(zhì)粒傳遞給其他大腸桿菌,所以,大腸桿菌的抗藥性形成較快,環(huán)境中大腸桿菌耐藥性菌株越來越多,因此,在用抗菌藥物對大腸桿菌造成的疾病的治療過程中,往往先進行藥敏試驗,篩選高度敏感的抗菌藥物來指導臨床用藥,從而提高臨床治療效果。從藥敏試驗結(jié)果可以看出,經(jīng)典的抗革蘭氏陰性菌藥物如鏈霉素等,對本株大腸桿菌的生長抑制效果很差,但菌必治和先鋒噻肟對其生長抑制效果很好,此2種藥物可作為該養(yǎng)殖場防治大腸桿菌病的首選藥物。
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