黃樂升 陳惠玲 李 莉 李煥庭 李結(jié)秋

（廣州市第一人民醫(yī)院，廣東 廣州 510180）

TRFIA法定量檢測HBsAb的臨床價(jià)值分析

黃樂升 陳惠玲 李 莉 李煥庭 李結(jié)秋

（廣州市第一人民醫(yī)院，廣東 廣州 510180）

目的探討分析時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）法定量檢測HBsAb的臨床價(jià)值。方法選取我院2007年3月至2009年3月99例乙肝兩對(duì)半的臨床標(biāo)本，分為觀察組（TRFIA法）和對(duì)照組（ELASA法），對(duì)比兩組檢測結(jié)果，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果兩組檢測結(jié)果對(duì)比無明顯差異（P＞0.05），無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；兩組檢測結(jié)果的模式對(duì)比，少見及罕見的模式一致相符率明顯低于其他常見模式（P＜0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）法定量檢測HBsAb的敏感性比酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA）法要高，能進(jìn)行HBV血清標(biāo)志的特異性檢測，準(zhǔn)確率高，具有重要的臨床診斷價(jià)值。

TRFIA；定量檢測；HBsAb

乙型肝炎的病毒血清學(xué)標(biāo)志物（HBV-M）是檢測并測定乙型肝炎傳染性、病毒感染及治療效果的診斷指標(biāo)。由于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)目前仍未廣泛應(yīng)用于臨床上檢測乙型肝炎病毒中的脫氧核糖核酸（HBV-DNA），因此，通常臨床上采取半自動(dòng)免疫分析儀對(duì)血清HBV-M進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)時(shí)間分辨免疫分析法（TRFlA）用于HBV-M的半定量分析[其中乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）進(jìn)行定量檢測分析[1]，可取代傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測的缺點(diǎn)，抗-HBs的含量測定更為精確，更好地輔助臨床診療，本文通過探討分析時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）法定量檢測HBsAb的臨床價(jià)值，總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2007年3月至2009年3月99例乙肝兩對(duì)半的臨床標(biāo)本，男59例，女40例，年齡1～77歲，平均年齡45.5歲，分為觀察組和對(duì)照組，觀察組使用TRFIA法對(duì)HBsAb進(jìn)行定量檢測，對(duì)照組使用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA）對(duì)HBsAb進(jìn)行定量檢測，觀察對(duì)比兩組檢測結(jié)果，記錄相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.2 檢測方法

1.2.1 觀察組

所有患者空腹進(jìn)行靜脈血采集，一般為3 mL，使用ANYTEST2000時(shí)間分辨儀、Egate2310洗板機(jī)、2510變頻震蕩器、上海新波生物技術(shù)公司的試劑，進(jìn)行時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）法定量檢測HBsAb。

1.2.2 對(duì)照組

所有患者空腹進(jìn)行靜脈血采集，一般為3 mL，使用MK3酶標(biāo)分析儀、MK2洗板機(jī)、北京萬泰生物技術(shù)有限公司的試劑，進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA）檢測HBsAb。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本組數(shù)據(jù)經(jīng)卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

兩組檢測結(jié)果（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）的一致相符率分別為90.6、81.0、84.6、90.7、89.0，兩組數(shù)據(jù)對(duì)比無明顯差異（χ2=0.13～1.62，P＞0.05），無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；兩組檢測結(jié)果的模式對(duì)比，少見及罕見的模式一致相符率明顯低于其他常見模式（χ2=6.73，P＜0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1、表2。

3 討 論

3.1 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA）法檢測HBsAb的臨床分析

傳統(tǒng)的HBsAb檢測多采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELASA）法，操作簡便，適用于大批量的檢測及成本低廉，但敏感性與特異性相對(duì)較差，并且有文獻(xiàn)報(bào)道[2]，ELASA法檢測結(jié)果中約9.09%的人群有漏檢率出現(xiàn)，即HbsAg陽性的人群卻被檢測為陰性反應(yīng)，這跟ELASA法檢測的敏感度較低有密切的關(guān)系，因?yàn)镋LASA法檢測為定性的檢測，僅能提供陰性、陽性反應(yīng)的結(jié)果，而無法進(jìn)行定量的檢測，其精確率有一定的局限性，尤其對(duì)于接種疫苗或治療后的患者的追蹤觀察比較困難。另外，乙型肝炎的病毒在人體內(nèi)是以非靜息的狀態(tài)存在的，并且不同廠家生產(chǎn)的試劑之間存在一定的差異，因此，使用ELASA法檢測乙型肝炎的標(biāo)志物時(shí)，HBV的模式會(huì)相應(yīng)地產(chǎn)生變化，以HBcAb和HBeAb的變化最為顯著，往往容易發(fā)生漏檢或誤檢。龔君順研究中[3]表明，標(biāo)本中為10～100 IU/L時(shí)的HBsAb水平，對(duì)HBV的免疫能力最差，HBsAb水平＞100 IU/L才具備抵御HBV侵襲的能力，使用ELASA法檢測10～100 IU/L時(shí)的HBsAb多數(shù)呈現(xiàn)為陰性反應(yīng)，無法準(zhǔn)確評(píng)估其免疫的能力。

3.2 時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）法檢測HBsAb的臨床分析

時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）法是采用3價(jià)的稀土離子，或其結(jié)合物作為標(biāo)志物，用作同位素、熒光物質(zhì)、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)及酶的取代，對(duì)抗體、抗原等指標(biāo)進(jìn)行標(biāo)記[4]。本文中采用TRFIA檢測出的HBsAg呈現(xiàn)陽性反應(yīng)的共64例，ELASA法檢測出55例，兩種方法的靈敏度明顯存在差異。有文獻(xiàn)報(bào)道[5]TRFIA法能有效克服“溝狀效應(yīng)”，標(biāo)本中為10～100 IU/L時(shí)的HBsAb水平也能定量檢測出陽性反應(yīng)，即便是對(duì)于HBsAg陽性的標(biāo)本，經(jīng)4倍稀釋，并且cut-off值在2.0以下的標(biāo)本也能準(zhǔn)確檢測其呈陽性反應(yīng)，而ELASA法卻往往檢測為陰性。TRFIA法的定量檢測能夠?yàn)闄z測者提供科學(xué)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行長期的預(yù)防及治療的跟蹤線索，能準(zhǔn)確地評(píng)估受檢者的免疫能力及指導(dǎo)高危人群中的免疫預(yù)防，具有重要的臨床使用價(jià)值。TRFIA法最大的缺陷是檢測時(shí)間較長，一般需要耗時(shí)3.5 h，若日后能縮短其檢測時(shí)間，就能更好地節(jié)約成本，廣泛應(yīng)用于臨床。

Clinical Value Analysis of Quantitative Detection of HBsAb TRFIA

HUNAG Le-sheng, CHEN Hui-ling, LI Li, LI Huan-ting, LI Jie-qiu
(The First People's Hospital of Guangzhou, Guangzhou 510180, China)

ObjectiveTo investigate the analysis of TRFIA Quantitative detection of HBsAb clinical value.MethodsSelect the hospital from March 2007 to March 2009 99 cases, it divided into two groups(TRFIA method)and the control group (ELASA method), compared two groups of test results, statistical analysis.ResultsTest results comparing the two groups no significant difference(P＞0.05), not statistically significant; two sets of test results of model comparison, the same pattern of rare and unusual line was significantly lower than other common mode(P＜0.05), statistically significance.ConclusionTRFIA Quantitative detection of HBsAb sensitive than ELASA method must be high, capable of specific detection of HBV serum markers, with high accuracy, has important diagnostic value.

TRFIA; Quantitative detection; HBsAb

R446.6

B

1671-8194（2014）17-0024-02