顧 璽 綜述 張文海 審校

miRNA在乳腺癌化療耐藥中的作用

顧 璽 綜述 張文海 審校

總結(jié)近期國內(nèi)外有關(guān)miRNA在乳腺癌化療耐藥中作用的研究進展。應(yīng)用Pubmed和CNKI期刊全文數(shù)據(jù)庫檢索系統(tǒng)以“miRNA、乳腺癌和化療耐藥”為關(guān)鍵詞，檢索2000年1月至2012年10月有關(guān)在乳腺癌化療耐藥中作用的文獻。從乳腺癌化療耐藥入手，闡述乳腺癌化療耐藥的特點、機制，并著重對miRNA在乳腺癌化療耐藥中的作用進行分析。miRNA通過多種途徑參與乳腺癌的化療耐藥。本文具體綜述了一些以不同機制參與腫瘤耐藥的miRNA，及其具體參與耐藥的途徑。探討了血清miRNA作為腫瘤標記物的潛在臨床利用性。結(jié)論：深入研究血清miRNA在乳腺癌耐藥中的作用和機制，必將為乳腺癌的靶向治療掀起一個新的篇章。

乳腺癌 化療耐藥 miRNA

目前乳腺癌的主要治療手段是以手術(shù)、化療、內(nèi)分泌治療以及靶向治療聯(lián)合的綜合治療。據(jù)統(tǒng)計，約有70%的乳腺癌患者對化療耐藥或很快出現(xiàn)化療耐藥［1］。無論是初始的耐藥還是獲得性的耐藥都會大大降低乳腺癌患者的無病生存時間（disease-free survival，DFS）和總生存時間（overall rurvival，OS）。本文將對乳腺癌化療耐藥的機理和miRNAs在耐藥中起到的作用加以闡述。

1 乳腺癌化療的耐藥

1.1 乳腺癌化療耐藥的概述

耐藥是導(dǎo)致腫瘤化學(xué)藥物治療失敗的主要原因。根據(jù)腫瘤細胞的耐藥特點，耐藥可分為原藥耐藥（primary drug resistance，PDR）和多藥耐藥（multiple drug resistance，MDR）兩大類，PDR是指對一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生抗藥性后，對非同類型藥物仍敏感；MDR是指癌細胞對一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥性的同時對其他非同類藥物也產(chǎn)生抗藥性，是造成腫瘤化療失敗的主要原因。MDR可進一步分為先天性多藥耐藥（intrinsic MDR）和獲得性多藥耐藥（acquired MDR），先天性多藥耐藥是指在化療開始時就存在的耐藥性，而獲得性多藥耐藥是指在化療過程中由一種化療藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生的耐藥。乳腺癌對多種化療藥物有效，但很快出現(xiàn)耐藥［2］。針對乳腺癌耐藥的特點，目前乳腺癌耐藥的研究主要集中在獲得性多藥耐藥方面。

1.2 乳腺癌化療耐藥的機制

化療藥物的耐藥機制目前尚不十分清楚。目前有兩個關(guān)于耐藥的主要假說，基因性耐藥和表觀基因性耐藥，這兩種假說被認為是解釋所有癌癥耐藥的基礎(chǔ)理論?；蛲ǔＪ侵窪NA序列的可遺傳改變，基因性耐藥是指由DNA序列發(fā)生了與耐藥相關(guān)的可遺傳突變。表觀基因是指在未改變DNA序列的基礎(chǔ)上通過DNA甲基化或者組蛋白修飾改變其基因表達使其表觀基因組獲得耐藥性。

目前，關(guān)于乳腺癌基因性耐藥的研究證據(jù)較少，但大量的實驗證明乳腺癌細胞基因表觀性耐藥的存在。一些基因的異常表達使乳腺癌細胞內(nèi)的抗腫瘤藥物濃度下降從而影響藥物的有效性，例如多藥耐藥基因（multidrug-resistance 1，MDR1）、乳腺癌耐藥蛋白（breast cancer resistance protein，BCRP）基因［3］。與乳腺癌細胞凋亡相關(guān)的基因的異常表達，可以使癌細胞抵抗藥物介導(dǎo)的凋亡，產(chǎn)生耐藥，如Bcl-2基因、p53基因［4］。此外，DNA甲基化和組蛋白修飾也是表觀基因改變的重要方式，很多研究證明DNA甲基化和組蛋白修飾參與了乳腺癌細胞的耐藥，這進一步證明表觀基因改變對乳腺癌耐藥的重要性［5-6］。有學(xué)者認為，對乳腺癌表觀基因性耐藥的研究可能成為是解決乳腺癌細胞對化療藥物耐藥的重要方法［7］。

1.3 乳腺癌化療耐藥研究的熱點問題

近年來的研究發(fā)現(xiàn)了MicroRNAs在表觀基因?qū)W中的重要作用，這個發(fā)現(xiàn)使學(xué)者們將MicroRNAs與乳腺癌耐藥聯(lián)系在一起。有人證明MicroRNAs的異常表達可能與乳腺癌的耐藥有關(guān)［8］。隨著這方面的實驗證據(jù)的不斷增多，使得miRNAs可能成為一個干預(yù)腫瘤耐藥的新方法［9-10］。關(guān)于miRNAs調(diào)控腫瘤耐藥的進一步研究將會成為乳腺癌耐藥研究的新熱點。

2 miRNA的構(gòu)成和作用

MicroRNAs（miRNAs）是一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼RNA，其大小長約16～29個核苷酸，在細胞內(nèi)對基因的表達起到重要的調(diào)節(jié)作用。成熟的miRNAs通過堿基互補配對的方式識別靶mRNA，并根據(jù)互補程度的不同指導(dǎo)沉默復(fù)合體降解靶mRNA或者阻止靶mRNA的翻譯。

近年來超過1 200個哺乳動物的miRNAs已經(jīng)被證明可以潛在調(diào)控大約三分之一的蛋白編碼基因，這些基因與發(fā)育、細胞分化、代謝途徑、細胞增殖和凋亡密切相關(guān)［11］。而這些生理過程的異常表達又是癌細胞的主要表現(xiàn)，所以有人猜想miRNA的異常表達可能在癌癥的形成過程中起重要作用，并通過實驗加以證明。學(xué)者們發(fā)現(xiàn)很多miRNA的異常表達都可能調(diào)控癌基因或抑癌基因的表達，并在腫瘤的發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移以及對不同化療藥物的耐藥中起重要作用［12］，例如miR-21和miR-373等能夠促進乳腺癌轉(zhuǎn)移，而miR-205、miR-340和miR-1258等能夠抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移［13-17］。

3 miRNA參與乳腺癌化療耐藥的途徑

目前有幾種解釋miRNA參與腫瘤化療耐藥機制的途徑，而近來這些機制在乳腺癌耐藥中被證明與miRNAs密切相關(guān)［18］。

3.1 miRNA參與藥物轉(zhuǎn)運和代謝

化療藥物轉(zhuǎn)運和代謝的蛋白在癌細胞對藥物的吸收、清除中起重要作用，提高清除化療藥物的轉(zhuǎn)運蛋白的表達可以加速藥物的代謝，導(dǎo)致癌細胞的廣泛耐藥。miRNA可能通過調(diào)控ATP結(jié)合盒蛋白家族（ATP-binding cassette，ABC）的P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）和乳腺癌耐藥蛋白（breast cancer resistance protein，BRCP/ABCG2）的表達促使癌細胞產(chǎn)生耐藥性。Chen等［19］通過對新輔助化療（表阿霉素和多西他賽）有效和無效患者腫瘤標本的miRNA-200c的檢測以及細胞株的驗證，發(fā)現(xiàn)上調(diào)的miRNA-200c可以降低MDR1基因和P-糖蛋白的表達，增加阿霉素治療的敏感性。也研究結(jié)果證明，miR-328、miR-519c和miR-520h可以通過對BCRP表達的調(diào)控使乳腺癌細胞發(fā)生耐藥［20］。近來Zhu等［21］證明miR-128可以通過調(diào)控ABC家族的另一成員ABCC5使乳腺癌細胞產(chǎn)生對阿霉素等藥物的耐藥。這些研究表明miRNA可以通過藥物轉(zhuǎn)運和代謝的途徑調(diào)控腫瘤耐藥。

3.2 miRNA參與細胞毒性作用

阿霉素、紫杉醇、順鉑等化療藥物的作用機制是抑制DNA、RNA的復(fù)制合成，阻礙癌細胞進行有絲分裂。細胞對這些毒性藥物造成的損傷會作出分裂停止、DNA修復(fù)、凋亡等反應(yīng)，癌細胞耐藥與這些過程的改變密切相關(guān)［22］。PTEN（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten）是一個抑癌基因，PTEN基因可以PTEN蛋白的合成，使細胞停止分裂并凋亡。Liang等［23］通過對紫杉醇、米托蒽醌和VP-16耐藥的MCF-7細胞系及動物實驗證明miR-19可能通過抑制PTEN的表達參與調(diào)控乳腺癌細胞對上述藥物的耐藥。BRCA1（breast cancer susceptibilility gene 1）在DNA的損傷修復(fù)中其重要作用。Moskwa等［24］的研究證明miR-182可以下調(diào)BRCA1的表達從而減少的DNA修復(fù)，增加癌細胞對Olaparib的敏感性。Bcl-2基因具有抑制凋亡的作用。Kastl等［25］的研究發(fā)現(xiàn)在乳腺癌多西他賽耐藥的細胞株中miRNA-34a下調(diào)，并通過上調(diào)Bcl-2基因表達的途徑抑制癌細胞凋亡產(chǎn)生耐藥。所以，miRNA可以參與調(diào)控修復(fù)和凋亡蛋白的表達使癌細胞出現(xiàn)耐藥性。

3.3miRNA參與EMT

癌細胞發(fā)生上皮-間葉轉(zhuǎn)換（EMT）被認為與耐藥有關(guān)，發(fā)生EMT的腫瘤細胞表現(xiàn)出更強的耐藥性［26］。miRNA可以調(diào)控誘導(dǎo)腫瘤細胞發(fā)生EMT的蛋白的表達，并使其產(chǎn)生耐藥。E鈣粘蛋白向N鈣粘蛋白轉(zhuǎn)換是腫瘤細胞發(fā)生EMT的重要標志，Cochrane等［27］發(fā)現(xiàn)miRNA-200c的下調(diào)可以通過其靶基因ZEB1抑制E鈣粘蛋白的表達，促進乳腺癌細胞EMT發(fā)生，使腫瘤細胞對順鉑和紫杉醇發(fā)生耐藥。TGF-β、β連環(huán)蛋白也是腫瘤細胞發(fā)生EMT過程中的重要成員，Rao等［28］的研究顯示miRNA221/222的上調(diào)可以通過對TGF-β和β連環(huán)蛋白的調(diào)控實現(xiàn)癌細胞對氟維司群的耐藥。從這些研究可以看出，EMT也是miRNA參與耐藥調(diào)控的途徑之一。

3.4 miRNA參與DNA甲基化和組蛋白修飾

DNA甲基化和組蛋白修飾在基因表達和藥物耐藥中有極其的重要作用。DNA甲基化是在不改變DNA一級結(jié)構(gòu)的情況下，改變其表達活性的基因外調(diào)節(jié)途徑。參與DNA甲基化的酶主要有DNMT1，DNMT3a和DNMT3b。Pogribny等［29］的研究發(fā)現(xiàn)，miR-29、miR-194調(diào)節(jié)DNMT3a的表達，miR-132、miR-194調(diào)控甲基化結(jié)合蛋白MeCP2基因表達，增加細胞系對cisplatin的耐藥性。組蛋白去乙?；敢种苿┛梢詫?dǎo)致抗凋亡乳腺癌細胞系的侵襲轉(zhuǎn)移能力降低，而很多miRNA其中差異表達［30］。這些發(fā)現(xiàn)說明miRNA可以通過DNA甲基化和組蛋白修飾兩種方式參與腫瘤耐藥。

3.5 miRNA參與治療靶點的改變

某些藥物針對癌細胞的特異性靶點起作用，殺滅腫瘤細胞，如他莫昔芬、氟維司群對ER陽性的乳腺癌細胞。Zhao等［31］的研究顯示ER-α36是let-7的靶基因，let-7的敲除的他莫昔芬耐藥細胞株可以表現(xiàn)出對他莫昔芬治療敏感，這說明let-7可以通過改變他莫昔芬的治療靶點（ER）促進耐藥。另外還有研究證明MicroRNA-101、MicroRNA-221/222可能是通過調(diào)控ER來促進乳腺癌細胞對內(nèi)分泌治療藥物的耐藥［32］。所以，miRNA可以通過改變這些治療靶點的表達使腫瘤出現(xiàn)耐藥。

4 血清中miRNA的特點和應(yīng)用

既往對miRNAs的研究主要集中在細胞內(nèi)的活動。第一個對血清miRNA的研究始自2008年，Lawrie等［33］發(fā)現(xiàn)血清中含有miR-21，且其高表達與彌散性B細胞淋巴瘤患者的存活率呈負相關(guān)。血液中的循環(huán)miRNA可以免受血液核酸酶的破壞，這是血清miRNA的一個重要特點。血清中的miRNA主要存在于微小囊泡（microvesicles，MV，＞1 μm）和胞外小泡（exosome）中，正是由于MV和exosome的保護，使血清miRNA避免核酸酶的破壞。Zomer等［34］的研究證明血液中的microvesicles和exosome可以作為miRNA的穩(wěn)定載體，通過將某種細胞產(chǎn)生的miRNA轉(zhuǎn)運至另一種細胞內(nèi)，調(diào)控其靶mRNA的表達，實現(xiàn)體內(nèi)的細胞間通訊。

目前很多研究證明患有疾病的的患者血清內(nèi)的miRNA表達譜與正常人不同，包括腫瘤、糖尿病、肝炎、妊娠等。Zhu等［35］在乳腺癌患者血清中檢測出miR-155，并發(fā)現(xiàn)PR陽性的乳腺癌患者血清中的miR-155明顯高于PR陰性的患者。Schrauder等［36］通過基因芯片比對正常女性與早期乳腺癌患者的血液miRNA，發(fā)現(xiàn)miR-202，miR-718可能成為早期乳腺癌的潛在標記物。這些研究提示我們血清miRNA是細胞間通訊的重要媒介，在腫瘤細胞的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用。而血清miRNA與乳腺癌化療耐藥的研究可能成為乳腺癌耐藥領(lǐng)域的新熱點。

5 化療耐藥研究展望

現(xiàn)有的研究證明miRNA與乳腺癌的化療耐藥密切相關(guān)，但其作用和機制尚不清楚，對其作用和機制的進一步研究可能成為逆轉(zhuǎn)化療耐藥的關(guān)鍵，這將成為乳腺癌化療耐藥研究的熱點。

血清miRNA的發(fā)現(xiàn)和穩(wěn)定檢測開辟了一條關(guān)于miRNA研究的新途徑，血清miRNA在惡性腫瘤和其他疾病診斷中的作用已經(jīng)證實了它的價值，但血清miRNA與乳腺癌化療耐藥關(guān)系的研究鮮見報道，深入研究血清miRNA在乳腺癌耐藥中的作用和機制，必將為乳腺癌的靶向治療掀起一個新的篇章。

1 Osako T,Horii R,Matsuura M,et al.Common and discriminative clinicopathological features between breast cancers with pathological complete response or progressive disease in response to neoadjuvant chemotherapy[J].Cancer Res Clin Oncol,2010,136(2)：233-241.

2 Li X,Lewis MT,Huang J,et al.Intrinsic resistance of tumorigenic breast cancer cells to chemotherapy[J].Natl Cancer Inst,2008,100 (9)：672-679.

3 Natarajan K,Xie Y,Baer MR,et al.Role of breast cancer resistance protein(BCRP/ABCG2)in cancer drug resistance[J].Biochem Pharmacol,2012,83(8)：1084-1103.

4 Crawford A,Nahta R.Targeting Bcl-2 in Herceptin-Resistant Breast Cancer Cell Lines[J].Curr Pharmacogenomics Person Med, 2011,9(3)：184-190.

5 Trimarchi MP,Mouangsavanh M,Huang TH.Cancer epigenetics：a perspective on the role of DNA methylation in acquired endocrine resistance[J].Chin J Cancer,2011,30(11)：749-756.

6 De Luca A,Moroni N,Serafino A,et al.Treatment of doxorubicin-resistant MCF7/Dx cells with nitric oxide causes histone glutathionylation and reversal of drug resistance[J].Biochem J,2011,440 (2)：175-183.

7 Raha P,Thomas S,Munster PN.Epigenetic modulation：a novel therapeutic target for overcoming hormonal therapy resistance[J]. Epigenomics,2011,3(4)：451-470.

8 Salter KH,Acharya CR,Walters KS,et al.An integrated approach to the prediction of chemotherapeutic response in patients with breast cancer[J].PLoS One,2008,3(4)：1908.

9 Iorio MV,Casalini P,Tagliabue E,et al.MicroRNA profiling as a tool to understand prognosis,therapy response and resistance in breast cancer[J].Eur J Cancer,2008,44(18)：2753-2759.

10 Shen YL,Jiang YG,Greenlee AR,et al.MicroRNA expression profiles and miR-10a target in anti-benzo[a]pyrene-7,8-diol-9, 10-epoxide-transformed human 16HBE cells[J].Biomed Environ Sci,2009,22(1)：14-21.

11 Alonso CR.A complex'mRNA degradation code'controls gene expression during animal development[J].Trends Genet,2012,28(2)：78-88.

12 Zhang X,Wang H,Zhang S,et al.MiR-134 functions as a regulator of cell proliferation,apoptosis,and migration involving lung septation[J].In Vitro Cell Dev Biol Anim,2012,73(1)：31-37.

13 Yan LX,Wu QN,Zhang Y,et al.Knockdown of miR-21 in human breast cancer cell lines inhibits proliferation,in vitro migration and in vivo tumor growth[J].Breast Cancer Res,2011,13(1)：R2.

14 Yan GR,Xu SH,Tan ZL,et al.Global identification of miR-373-regulated genes in breast cancer by quantitative proteomics[J].Proteomics,2011,11(5)：912-920.

15 Wu H,Zhu S,Mo YY.Suppression of cell growth and invasion by miR-205 in breast cancer[J].Cell Res,2009,19(4)：439-448.

16 Wu ZS,Wu Q,Wang CQ,et al.miR-340 inhibition of breast cancer cell migration and invasion through targeting of oncoprotein c-Met[J].Cancer,2011,117(13)：2842-2852.

17 Zhang L,Sullivan PS,Goodman JC,et al.MicroRNA-1258 suppresses breast cancer brain metastasis by targeting heparanase[J]. Cancer Res,2011,71(3)：645-654.

18 Kim JW,Mori S,Nevins JR.Myc-induced microRNAs integrate Myc-mediated cell proliferation and cell fate[J].Cancer Res,2010, 70(12)：4820-4828.

19 Chen J,Tian W,Cai H,et al.Down-regulation of microRNA-200c is associated with drug resistance in human breast cancer [J].Med Oncol,2012,29(4)：2527-2534.

20 Li X,Pan YZ,Seigel GM,et al.Breast cancer resistance protein BCRP/ABCG2 regulatory microRNAs(hsa-miR-328,-519c and-520h)and their differential expression in stem-like ABCG2+ cancer cells[J].Biochem Pharmacol,2011,81(6)：783-792.

21 Zhu Y,Yu F,Jiao Y,et al.Reduced miR-128 in breast tumor-initiating cells induces chemotherapeutic resistance via Bmi-1 and ABCC5[J].Clin Cancer Res,2011,17(22)：7105-7115.

22 Ajabnoor GM,Crook T,Coley HM.Paclitaxel resistance is associated with switch from apoptotic to autophagic cell death in MCF-7 breast cancer cells[J].Cell Death Dis,2012,26(3)：e260.

23 Liang Z,Li Y,Huang K,et al.Regulation of miR-19 to breast cancer chemoresistance through targeting PTEN[J].Pharm Res,2011, 28(12)：3091-3100.

24 Moskwa P,Buffa FM,Pan Y,et al.miR-182-mediated downregulation of BRCA1 impacts DNA repair and sensitivity to PARP inhibitors[J].Mol Cell,2011,41(2)：210-220.

25 Kastl L,Brown I,Schofield AC.miRNA-34a is associated with docetaxel resistance in human breast cancer cells[J].Breast Cancer Res Treat,2012,131(2)：445-454.

26 Marchini C,Montani M,Konstantinidou G,et al.Mesenchymal/ stromal gene expression signature relates to basal-like breast cancers,identifies bone metastasis and predicts resistance to therapies [J].PLoS One,2010,5(11)：e14131.

27 Cochrane DR,Spoelstra NS,Howe EN,et al.MicroRNA-200c mitigates invasiveness and restores sensitivity to microtubule-targeting chemotherapeutic agents[J].Mol Cancer Ther,2009,8(5)：1055-1066.

28 Rao X,Di Leva G,Li M,et al.MicroRNA-221/222 confers breast cancer fulvestrant resistance by regulating multiple signaling pathways[J].Oncogene,2011,30(9)：1082-1097.

29 Pogribny IP,Filkowski JN,Tryndyak VP,et al.Alterations of microRNAs and their targets are associated with acquired resistance of MCF-7 breast cancer cells to cisplatin[J].Int J Cancer,2010,127 (8)：1785-1794.

30 Rhodes LV,Nitschke AM,Segar HC,et al.The histone deacetylase inhibitor trichostatin A alters microRNA expression profiles in apoptosis-resistant breast cancer cells[J].Oncol Rep,2012,27(1)：10-16.

31 Zhao Y,Deng C,Lu W,et al.Let-7 microRNAs Induce Tamoxifen Sensitivity by Down-Regulation of Estrogen Receptor Alpha Signaling in Breast Cancer[J].MolMed,2011,17(11-12)：1233-1241.

32 Sachdeva M,Wu H,Ru P,et al.MicroRNA-101-mediated Akt activation and estrogen-independent growth[J].Oncogene,2011,30 (7)：822-831.

33 Lawrie CH,Gal S,Dunlop HM,et al.Detection of elevated levels of tumour-associated microRNAs in serum of patients with diffuse large B-cell lymphoma[J].Br J Haematol,2008,141(5)：672-675.

34 Zomer A,Vendrig T,Hopmans ES,et al.Exosomes：Fit to deliver small RNA[J].Commun Integr Biol,2010,3(5)：447-450.

35 Zhu W,Qin W,Atasoy U,et al.Circulating microRNAs in breast cancer and healthy subjects[J].BMC Res Notes,2009,19(2)：89.

36 Schrauder MG,Strick R,Schulz-Wendtland R,et al.Circulating Micro-RNAs as Potential Blood-Based Markers for Early Stage Breast Cancer Detection[J].PLoS One,2012,7(1)：e29770.

（2013-08-27收稿）

（2013-10-24修回）

（本文編輯：周曉穎）

Function of MiRNAin the chemotherapy resistance of breast cancer

Xi GU,Wenhai ZHANG
Correspondence to:Wenhai ZHANG;E-mail:zhangwh@sj-hospital.org

Department of Breast Surgery,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110004,China

This work was supported by the Scientific and Technological Planning project of Liaoning Province(No.2012225026)

This study aimed to review the research progress on the contribution of microRNA(miRNA)to the chemotherapy resistance of breast cancer.With“miRNA,”“breast cancer,”and“chemotherapy resistance”as key words,the literature was searched in Pubmed and CNKI databases between 01-2000 and 10-10-2012.We described the characteristics and mechanisms of breast cancer chemotherapy resistance and focused on the contribution of miRNAs in the chemotherapy resistance of breast cancer.MiRNA participate in chemotherapy resistance of breast cancer through different ways.This article summarizes different miRNAs that participate in chemotherapy resistance and identifies their specific pathways in drug resistance.The potential clinical utilization of the serum miRNA as a tumor marker is also discussed.Further research on the effect and mechanism of serum microRNA in chemotherapy resistance will bring a new chapter in the targeted therapy of breast cancer.

breast cancer,chemotherapy resistance,MiRNA

10.3969/j.issn.1000-8179.20131269

顧璽 講師，主治醫(yī)師。研究方向為乳腺惡性腫瘤的綜合治療及化療耐藥機制研究。

中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院乳腺外科（沈陽市110004）

*本文課題受遼寧省科學(xué)技術(shù)計劃項目（編號：2012225016）資助

張文海 zhangwh@sj-hospital.org

E-mail：gux1@sj-hospital.org