周 勇 綜述，楊 潔，李恒進(jìn)△ 審校

(1．解放軍總醫(yī)院皮膚科，北京100853;2．河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院皮膚科，河北唐山063000)

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)研究的不斷進(jìn)步以及腫瘤相關(guān)疾病的發(fā)病率逐年增高，幾種遺傳性癌癥綜合征近年越來越引起人們的關(guān)注。遺傳性癌癥綜合征與基因突變所致早熟終止密碼子(premature termination codon，PTC)有關(guān)。PTC與正常翻譯的終止密碼子結(jié)構(gòu)相同，正常的終止密碼子可以終止整個翻譯過程，但PTC有時會有氨基酸替代其位置，形成自然的PTC的通讀(readthrough)，合成長度與正常蛋白質(zhì)相同的肽鏈，有可能發(fā)揮其正常的生理作用［1-3］。近年來，PTC在腫瘤的發(fā)病機(jī)理和相關(guān)治療方面的研究取得了進(jìn)展，但關(guān)于腫瘤相關(guān)綜合征的治療目前還處于摸索和探討階段，本文綜述PTC通讀在遺傳性癌癥綜合征治療方面的研究進(jìn)展，以期為腫瘤綜合征的治療提供新的思路和方法。

1 PTC及通讀的定義及機(jī)理

1．1 PTC的定義和致病機(jī)理

基因突變根據(jù)其對基因的影響可分無義突變(nonsense mutation)、錯義突變(missense mutation)和同義突變(same sense mutation)。同義突變是指堿基置換后，雖然每個密碼子變成了另一個密碼子，但改變前、后密碼子所編碼的氨基酸不變，故實際上不會發(fā)生突變效應(yīng)。錯義突變是指編碼某種氨基酸的密碼子經(jīng)堿基替換以后，變成編碼另一種氨基酸的密碼子，從而使多肽鏈的氨基酸種類和序列發(fā)生改變，使多肽鏈喪失原有功能。無義突變是指由于某個堿基的改變，使表示某種氨基酸的密碼子突變?yōu)樵缡旖K止密碼子(PTC)，從而使肽鏈合成提前終止而形成不完整的、無功能的肽鏈，基因無法表達(dá)發(fā)揮作用，導(dǎo)致合成的截斷蛋白無功能性或主要顯示其負(fù)面作用，喪失了正常的功能［4］。另外，移碼突變(frameshift)和剪接點突變(splice-site)也可形成PTC，它們與無義突變一起統(tǒng)稱為截斷(Truncating)突變［5］。

1．2 通讀的定義和機(jī)制

1．2．1 通讀的定義和機(jī)制 人類突變基因的早熟終止密碼子與正常翻譯的終止密碼子結(jié)構(gòu)相同，正常的終止密碼子可以終止整個翻譯過程，然而有時會有氨基酸替代早熟終止密碼子的位置，形成自然的早熟終止密碼子的通讀(readthrough)。兩種釋放因子參與翻譯的終止過程，即第Ⅰ和第Ⅱ類釋放因子。原核生物中第Ⅰ類釋放因子有兩種:RF1和RF2，分別識別UAG/UAA和UGA/UAA;第Ⅱ類釋放因子相應(yīng)的成為RF3。核糖體的A位點中的第Ⅰ類釋放因子可以識別三種早熟終止密碼子，但其效率由兩方面的競爭而決定:第Ⅰ類釋放因子辨認(rèn)早熟終止密碼子和鄰近的同源tRNA的解碼(3個堿基中有2個相同)，當(dāng)另外一個氨基酸替代了早熟終止密碼子，形成了正常長度的蛋白時，我們把這種自然發(fā)生的解碼作用稱為早熟終止密碼子的通讀［6-10］。

1．2．2 影響通讀的因素 PTC通讀作用是通過鄰近同源氨基酸替代PTC而發(fā)揮作用的，受到多種因素的影響，包括PTC本身的核苷酸序列、PTC上下游的核苷酸序列和藥物的使用情況等等。

人類突變基因的 PTC分別是 UAA、UAG和UGA，與正常翻譯的終止密碼子結(jié)構(gòu)相同。三種早熟終止密碼子本身的序列對通讀效率的影響最大，UGA最高，UAG 次之，而 UAA 最低［11］，通讀后，不同的PTC被替換的氨基酸也不相同，UAG和UAA被替換為谷氨酰胺，而UGA通讀后形被替換為色氨酸(TGG)［11］。

PTC的通讀效率與上下游的堿基有密切關(guān)系，由于正常終止密碼子的3’端的堿基為“U”時(UAAU)終止最有效，3’端的堿基為“C”時(UGAC)效率最差，所以PTC的下游堿基為“C”時，通讀的效率最高，下游堿基對通讀效率的影響由高到低依次為C＞U＞A＞G［12-15］。上下游核苷酸的改變會影響mRNA的二維結(jié)構(gòu)、所編碼的氨基酸和密碼子的使用頻率，其影響PTC的通讀效率的機(jī)制十分復(fù)雜，至今尚未完全清楚。

一些藥物可以增強(qiáng)PTC的通讀作用，誘導(dǎo)PTC通讀的藥物主要有:(1)氨基糖甙類抗生素。主要包括慶大霉素、鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素和G418等。Francois的研究表明，氨基糖甙類抗生素與核糖體A位點的寡核苷酸相互結(jié)合，使正常翻譯過程的忠實性降低，核糖體會忽略早熟終止密碼子，繼續(xù)進(jìn)行翻譯，形成PTC的通讀［16］。另外氨基糖甙類抗生素的通讀作用還通過mRNA降解(nonsensemediated mRNA decay NMD)發(fā)揮作用，減少了突變mRNA的降解，間接地增強(qiáng)了通讀作用。(2)非氨基糖甙類抗生素藥物。目前受到廣泛關(guān)注的藥物是PTC124(商品名 Ataluren)。該藥是通過高通量篩選技術(shù)篩選出的化合物，能誘導(dǎo)核糖體進(jìn)行無義突變的通讀，發(fā)揮治療作用。PTC124與氨基糖甙類抗生素結(jié)構(gòu)不同，沒有抗細(xì)菌作用，口服即可達(dá)到治療需要的血藥濃度，幾乎沒有任何毒副作用。在囊性纖維化(CF)的小鼠模型中，Ataluren修復(fù)了24%～29%的野生型蛋白功能［17］，在杜興氏肌肉營養(yǎng)不良癥的細(xì)胞系和小鼠模型中，Ataluren均顯示出較氨基糖甙類抗生素(慶大霉素)為高的抑制PTC效率的作用［18］，目前正在對此藥物進(jìn)行臨床試驗的疾病包括囊性纖維化(CF)、杜興氏肌肉營養(yǎng)不良癥(DMD)和血友病。

另外幾種藥物只是在細(xì)胞系或動物模型中進(jìn)行了試驗，包括負(fù)霉素(Negamycin)和泰樂菌素(Tylosin)。Negamycin的通讀效率強(qiáng)于慶大霉素，并且在從患者分離出的細(xì)胞培養(yǎng)中有效地與mRNA降解進(jìn)行競爭，增加了mRNA的水平，增強(qiáng)了PTC的通讀作用［19］，顯示出其潛在的替代氨基糖甙類抗生素的應(yīng)用價值。泰樂菌素(Tylosin)是一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，與核糖體大亞基的E位點結(jié)合，在直腸癌的APC基因無義突變的小鼠動物模型中，顯示出抑制PTC的作用，增強(qiáng)了PTC的通讀作用，可以緩解腫瘤基因相關(guān)癥狀［20］。

2 由早熟截斷蛋白引起的癌癥綜合征

遺傳性癌癥綜合征是指患這些家族遺傳性綜合征的患者，有發(fā)生癌癥的傾向，它增加患癌癥的概率，使其早年發(fā)?。?1］。雖然遺傳性癌癥綜合征呈常染色體顯性遺傳，但在大體水平上只有兩個等位抑癌基因同時失活時，才在單個細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生腫瘤［22］。大多數(shù)伴癌癥綜合征的突變和許多遺傳性疾病都會產(chǎn)生PTC，大約10%～30%因PTC的產(chǎn)生而發(fā)?。?3-24］。常見的幾種遺傳性癌癥綜合征主要有以下幾種。

2．1 Cowden Syndrome(CS)

CS又名多發(fā)性錯構(gòu)瘤綜合征，是內(nèi)臟惡性腫瘤在皮膚及黏膜上的一種癥狀表現(xiàn)，以多發(fā)性錯構(gòu)瘤為其主要表現(xiàn)，是罕見的常染色體顯性遺傳癌癥綜合征，與乳腺、甲狀腺和子宮內(nèi)膜的癌癥的發(fā)病密切相關(guān)［25］，85%的病例中存在PTEN基因(與細(xì)胞骨架蛋白同源的第10號染色體缺失的磷酸酶基因，gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten，PTEN)突變［26］。PTEN 是一種腫瘤抑制基因，目前已發(fā)現(xiàn)70多種突變，大多數(shù)突變屬于截斷突變，產(chǎn)生PTC，使PTEN蛋白功能不正?；驘o功能，造成異常細(xì)胞的增殖分裂而不能正常凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的異常生長。

2．2 Peutz-Jeghers Syndrome(PJS)

PJS又稱家族性黏膜皮膚色素沉著胃腸道息肉病，簡稱黑斑息肉綜合征，是常染色體顯性遺傳癌癥綜合征，主要特征有黏膜、皮膚特定部位色素斑和胃腸道多發(fā)性息肉，與乳腺癌發(fā)病相關(guān)，可使其發(fā)病風(fēng)險增加30%～50%［25］，另外還可增加胃癌、結(jié)腸癌和胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險［27］，其發(fā)病與腫瘤抑制基因STK11/LKB1基因突變密切相關(guān)，此基因編碼絲氨酸/蘇氨酸酶11，是AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)和AMPK相關(guān)酶的主要調(diào)控因子，突變產(chǎn)生PTC，造成STK11/LKB1基因的表達(dá)缺失，可導(dǎo)致AMPK蛋白的表達(dá)異常，可能與腫瘤發(fā)病相關(guān)［28］。

2．3 Familial adenomatous polyposis(FAP)

FAP又名家族性腺瘤性腸息肉病，是常染色體顯性遺傳癌癥綜合征，表現(xiàn)為全結(jié)腸與直腸均可有多發(fā)性腺瘤，占結(jié)腸直腸癌(CRC)新發(fā)病例的比例不到1%，其發(fā)展成為CRC的概率為100%。FAP發(fā)病與APC(腺瘤性結(jié)腸息肉病)基因的突變有關(guān)，APC基因是腫瘤抑制基因，發(fā)揮類似于“守門員”的作用，可以將腫瘤細(xì)胞清除，目前報道的APC基因突變中，大約30%的突變屬于無義突變［29］。突變可產(chǎn)生PTC，使APC失活，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生。

2．4 Hereditary diffuse gastric cancer(HDGC)

HDGC又名遺傳性彌散性胃癌，是常染色體顯性遺傳癌癥易染綜合征，與編碼 E-鈣粘蛋白的CDH1基因的突變有關(guān)［30］，CHD1基因能下調(diào)E-鈣粘蛋白的表達(dá)。突變產(chǎn)生PTC，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞內(nèi)E-鈣粘蛋白的增多，E-鈣粘蛋白的表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。雜合子的CDH1突變基因的攜帶者50歲前多發(fā)生癌癥，并在80歲前發(fā)展為彌漫性消化道腫瘤，其中女性在75歲前，小葉性乳癌的發(fā)病風(fēng)險上升52%。此類患者通常在其30歲～40歲時，當(dāng)相應(yīng)器官中僅存的正常的CDH1基因發(fā)生異常失活時而發(fā)病，目前沒有任何有效治療手段［31］。

2．5 Li-Fraumeni Syndrome(LFS)

LFS又名李弗勞明綜合征，是常染色體遺傳癌癥易染綜合征，臨床上主要表現(xiàn)為家族性肉瘤和45歲前發(fā)生癌癥，主要包括腦部腫瘤、腎上腺皮質(zhì)癌和乳腺癌。TP53基因(腫瘤抑制蛋白也稱為p53蛋白或p53腫瘤蛋白)種系突變在此類患者家族中的發(fā)生率大概為80%，并且是目前發(fā)現(xiàn)的與此綜合征相關(guān)的唯一基因［32］。P53基因是一種抑癌基因，表達(dá)產(chǎn)物為基因調(diào)節(jié)蛋白(P53蛋白)，人類癌癥中約有一半是由于P53基因發(fā)生突變失活所致。當(dāng)其DNA受到損傷時P53蛋白表達(dá)急劇增加，可抑制細(xì)胞周期進(jìn)一步運轉(zhuǎn)。目前發(fā)現(xiàn)p53基因突變中有多種截斷突變，產(chǎn)生PTC，使P53蛋白失活，異常細(xì)胞增殖分裂不能得到控制，導(dǎo)致發(fā)生癌變。

2．6 Familial breast-ovarian cancer(BROVCA)

BROVCA又名家族性乳腺癌-卵巢癌綜合征，是50歲前發(fā)病的患者中發(fā)現(xiàn)的BRCA突變，分為BRCA1和BRCA2兩種，BRCA1和BRCA2基因分別位于17號和13號染色體，在DNA損傷修復(fù)中發(fā)揮重要作用，在靜止期細(xì)胞內(nèi)檢測不到基因的轉(zhuǎn)錄，BRCA1是是調(diào)控G/M期關(guān)鍵點的調(diào)控因子，對于細(xì)胞DNA損傷時誘導(dǎo)G/M期阻止其重要作用，野生型BRCA1還可以誘導(dǎo)凋亡并抑制雌激素依賴性轉(zhuǎn)錄通路。BRCA2基因除了參與DNA損傷修復(fù)外，還對于細(xì)胞的生長調(diào)節(jié)起著重要作用。報道中70%的BRCA1和90%BRCA2為截斷突變，包括小的插入和缺失突變、無義替換突變和剪切點突變［25］，截斷突變產(chǎn)生 PTC，相應(yīng)的 BRCA1 和BRCA2蛋白不能合成，損傷的DNA不能修復(fù)，異常增生細(xì)胞不能被誘導(dǎo)凋亡，導(dǎo)致癌癥的發(fā)生，其中患乳癌的風(fēng)險為50%～80%，卵巢癌為15%～25%［33］。

3 遺傳性癌癥綜合征的治療中通讀作用的應(yīng)用

癌的生成涉及多種基因和基因以外的變化，單獨一種基因的突變不足以致癌，多種基因變化的積累才能引起控制細(xì)胞生長和分化的機(jī)制紊亂，使細(xì)胞的增生失控而癌變。在這些基因的變化中最常發(fā)生異常變化的兩類基因是癌基因(oncogenes)及抑癌基因(cancer suppressor genes，也稱腫瘤抑制基因，tumor suppressor genes)。抑癌基因的產(chǎn)物抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞分化、抑制細(xì)胞遷移，因此起負(fù)調(diào)控作用，通常認(rèn)為抑癌基因的突變是隱性的。腫瘤的發(fā)生與腫瘤抑制基因中出現(xiàn)PTC有關(guān)，PTC導(dǎo)致抑癌蛋白表達(dá)缺失或功能不全，異常細(xì)胞不能凋亡而發(fā)生異常增生。事實上，抑癌基因中發(fā)生無義突變的頻率較致癌基因為高，而致癌基因中的大多數(shù)突變?yōu)殄e義突變［34］，由此看來，遺傳性癌癥患者更適合使用誘導(dǎo)PTC通讀的藥物，從而使抑癌終止基因中被PTC影響的缺失的蛋白恢復(fù)表達(dá)，并發(fā)揮其對腫瘤細(xì)胞的負(fù)調(diào)控作用，抑制腫瘤細(xì)胞的分化、增殖和轉(zhuǎn)移;另一方面早期使用PTC通讀藥物，可以增加腫瘤抑制基因產(chǎn)物的表達(dá)，加速突變細(xì)胞的凋亡，一定程度上可以抑制癌癥的發(fā)生。

氨基酸的改變會影響蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)、翻譯后修飾和與其它分子的相互作用［35-38］，抑制型tRNA會發(fā)揮作用，抑制無義突變，促進(jìn)同源氨基酸替代PTC，然而目前的體內(nèi)實驗不能很好地顯示出抑制型tRNA的作用，需要進(jìn)一步研究抑制型tRNA與通讀作用的關(guān)系。事實上，與治療遺傳病需要很多蛋白彌補(bǔ)結(jié)構(gòu)缺陷不同，癌癥中只需要很少的全長功能性蛋白便會起到治療作用。另外，無義介導(dǎo)的mRNA降解(NMD)在疾病的發(fā)生中也起到重要作用，可以降解腫瘤抑制基因中的無義突變產(chǎn)生的mRNA。NMD抑制劑可以增加供通讀作用發(fā)生的mRNA的水平，聯(lián)合使用NMD抑制劑和通讀藥物可以增加通讀的效率，一定程度上也可以抑制癌癥的發(fā)生。

PTC相關(guān)的癌癥方面的治療也值得期待，Keeling和Bedwell第一次報道了腫瘤抑制基因中出現(xiàn)的PTC抑制而產(chǎn)生的治療作用，他們在哺乳動物的翻譯系統(tǒng)中使用報告質(zhì)粒［14］，評估了由氨基糖甙類抗生素介導(dǎo)的P53基因中致病無義突變的通讀作用，F(xiàn)loquet等在含有PTC的H1299(肺癌)、HDQP1(乳腺癌)、LOVO和DLD-1(直腸結(jié)腸腺癌)的腫瘤細(xì)胞系中使用G418和慶大霉素兩種氨基糖甙類抗生素，發(fā)現(xiàn)氨基糖甙類抗生素降低了NMD的活性，穩(wěn)定了突變的mRNA，提高了PTC的通讀效率，產(chǎn)生了全長的具有功能的P53蛋白，恢復(fù)了其調(diào)控目的基因的作用，降低了含有P53無義突變的腫瘤細(xì)胞的生存能力，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡［39］。另外，直腸癌的APC基因中已知的無義突變占24%，它被認(rèn)為可能是抑癌基因，PTC的發(fā)生率高，它是用來檢測PTC抑制治療策略的理想的試驗?zāi)Ｐ?，Zilberberg等在一些含有 PTC的腫瘤細(xì)胞系(SW1417，HT-29，COLO205，HCT116)中使用氨基糖甙類和大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，抑制PTC，增強(qiáng)了通讀作用，使APC蛋白恢復(fù)生物活性，在同種異體移植試驗和APCMin+/-動物模型中，這些化合物可以明顯減輕由于APC基因中的無義突變所導(dǎo)致的腫瘤引起的臨床癥狀［20］。

然而遺傳性癌癥綜合征無義突變抑制療法還處于摸索階段，與突變種類、PTC位置、基因性質(zhì)、蛋白功能和細(xì)胞組織背景密切相關(guān)［40］，一方面，此種治療是針對沒有發(fā)病的突變攜帶者，屬于預(yù)防性治療;另一方面對于早期癌癥患者，可以通過恢復(fù)腫瘤抑制蛋白的表達(dá)而阻止癌癥進(jìn)展。Floquet等在對P53基因中PTC通讀作用的研究中顯示，氨基糖甙類抗生素可以顯著提高PTC的通讀效率，穩(wěn)定突變的mRNA，最終使全長蛋白的具有功能的P53蛋白合成增加，降低含有P53無義突變的腫瘤細(xì)胞的生存能力。另外，腫瘤治療效果受到多方面影響，無義突變抑制療法應(yīng)該與其他經(jīng)典治療(如化療)相結(jié)合，一方面減少藥物用量，另一方面減少繼發(fā)效應(yīng)，同時降低腫瘤細(xì)胞逃逸，目前尚未有此方面研究的報道［41］。

4 結(jié)語

隨著對腫瘤發(fā)病的機(jī)制研究的深入，不斷有新的理念和治療方法出現(xiàn)，抑癌基因中PTC的廣泛存在，使人們對腫瘤的發(fā)生和治療有了新的認(rèn)識。腫瘤患者的個性化治療是今后發(fā)展的方向，對于含有無義突變的腫瘤患者，可以根據(jù)其突變特點，使用增強(qiáng)PTC通讀作用的藥物，增強(qiáng)抑癌基因的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，期望可以增加癌癥的治療效果，這些效果已在體外試驗中得到了證實?？紤]到遺傳性癌癥綜合征中無義突變的潛在發(fā)生率，抑制無義突變的策略是一個全新的方向，遺傳性癌癥綜合征的預(yù)防性治療和早期癌癥患者的抑制無義突變治療，是個性化治療的重要部分，可以一定程度上預(yù)防腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展。今后的研究重點是進(jìn)一步明確遺傳性癌癥綜合征的分子、基因特征以及和臨床表型的關(guān)系，探討PTC通讀治療與其它抗腫瘤藥物聯(lián)合應(yīng)用的治療效果，有著廣闊的應(yīng)用價值，值得進(jìn)一步深入研究。

［1］ Lee HL，Dougherty JP．Pharmaceutical therapies to recode nonsense mutations in inherited diseases［J］．Pharmacol Ther，2012，136(2):227-266．

［2］ Stenson PD，Ball EV，Howells K，et al．The Human Gene Mutation Database:providing a comprehensive central mutation database for molecular diagnostics and personalized genomics［J］．Hum Genomics，2009，4(2):69-72．

［3］ Sloane PA，Rowe SM．Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator protein repair as a therapeutic strategy in cystic fibrosis［J］．Curr Opin Pulm Med，2010，16(6):591-597．

［4］ Isken O，Maquat LE．The multiple lives of NMD factors:balancing roles in gene and genome regulation［J］．Nat Rev Genet，2008，9(9):699-712．

［5］ Linde L，Kerem B．Introducing sense into nonsense in treatments of human genetic diseases［J］．Trends Genet，2008，24(11):552-563．

［6］ Petry S，Brodersen DE，Murphy FV 4th．Crystal structures of the ribosome in complex with release factors RF1 and RF2 bound to a cognate stop codon［J］．Cell，2005，123(7):1255-1266．

［7］ Rawat UB，Zavialov AV，Sengupta J．A cryo-electron microscopic study of ribosomebound termination factor RF2［J］．Nature，2003，21(6918):87-90．

［8］ Trobro S，Aqvist J．A model for how ribosomal release factors induce peptidyl-tRNA cleavage in termination of protein synthesis［J］．Mol Cell，2007，27(5):758-766．

［9］ Ito K，Uno M，Nakamura Y．A tripeptide‘a(chǎn)nticodon’deciphers stop codons in messenger RNA［J］．Nature，2000，403(6770):680-684．

［10］ Zavialov AV，Mora L，Buckingham RH．Release of peptide promoted by the GGQ motif of class 1 release factors regulates the GTPase activity of RF3［J］．Mol Cell，2002，10(4):789-798．

［11］ Nilsson M，Rydén-Aulin M．Glutamine is incorporated at the nonsense codons UAG and UAA in a suppressor-free Escherichia coli strain［J］．Biochim Biophys Acta，2003，1627(1):1-6．

［12］ Bidou L，Hatin I，Perez N，et al．Premature stop codons involved in musculardystrophies show a broad spectrum of readthrough efficiencies in response to gentamicin treatment［J］．Gene Ther，2004，11(7):619-627．

［13］ Howard MT，Shirts BH，Petros LM，et al．Sequence specificity of aminoglycosideinduced stop condon readthrough:potential implications for treatment of Duchenne muscular dystrophy［J］．Ann Neurol，2000，48(2):164-169．

［14］ Manuvakhova M，Keeling K，Bedwell DM．Aminoglycoside antibiotics mediate context-dependent suppression of termination codons in a mammalian translation system［J］．RNA，2000，6(7):1044-1055．

［15］ Floquet C，Hatin I，Rousset JP，et al．Statistical analysis of readthrough levels for nonsense mutations in mammalian cells reveals a major determinant of response to gentamicin［J］．PLOS Genet，2012，8(3):e1002608．

［16］ Francois B，Russell RJ，Murray JB，et al．Crystal structures of complexes between aminoglycosides and decoding A site oligonucleotides:role of the number of rings and positive charges in the specific binding leading to miscoding［J］．Nucleic Acids Res，2005，33(17):5677-5690．

［17］ Du M，Liu X，Welch EM，et al．PTC124 is an orally bioavailable compound that promotes suppression of the human CFTR-G542X nonsenseallele in a CF mouse model［J］．Proc Natl Acad Sci USA，2008，105(6):2064-2069．

［18］ Welch EM，Barton ER，Zhuo J，et al．PTC124 targets genetic disorders caused by nonsense mutations［J］．Nature，2007，447(7140):87-91．

［19］ Allamand V，Bidou L，Arakawa M，et al．Drug-induced readthrough of premature stop codons leads to the stabilization of laminin a2chain mRNA in CMD myotubes［J］．J Gene Med，2008，10(2):217-224．

［20］ Zilberberg A，Lahav L，Rosin-Arbesfeld R．Restoration of APC gene function in colorectal cancer cells by aminoglycoside-and macrolide-induced read-through of premature termination codons［J］．Gut，2010，59(4):496-507．

［21］ Renata Bordeira-Carrico，Ana Paula Pego，Manuel Santos，et al．Cancer syndromes and therapy by stop-codon readthrough［J］．Trends Mol Med，2012，18(11):667-678．

［22］Berger AH，Knudson AG，Pandolfi PP．A continuum model for tumour suppression［J］．Nature，2011，476(7359):163-169．

［23］ Oliveira C，Sousa S，Pinheiro H，et al．Quantification of epigenetic and genetic 2nd hits in CDH1 during hereditary diffuse gastric cancer syndrome progression［J］．Gastroenterology，2009，136(7):2137-2148．

［24］ Schneikert J，Behrens J．The canonical Wnt signaling pathway and its APC partner in colon cancer development［J］．Gut，2007，56(3):417-425．

［25］ Van der Groep P，van der Wall E，van Diest PJ．Pathology of hereditary breast cancer［J］．Cell Oncol(Dordr)，2011，34(2):71-88．

［26］ Fearon ER．Molecular genetics of colorectal cancer［J］．Annu Rev Pathol，2011，6:479-507．

［27］ Beggs AD，Latchford AR，Vasen HF，et al．Peutz-Jeghers syndrome:a systematic review and recommendations for management［J］．Gut，2010，59(7):975-986．

［28］ Amos CI，Keitheri-Cheteri MB，Sabripour M，et al．Genotypephenotype correlations in Peutz-Jeghers syndrome［J］．J Med Genet，2004，41(5):327-333．

［29］ Noffsinger AE．Serrated polyps and colorectal cancer:new pathway to malignancy［J］．Annu Rev Pathol，2009，4:343-364．

［30］ Oliveira C，Senz J，Kaurah P，et al．Germline CDH1 deletions in hereditary diffuse gastric cancer families［J］．Hum Mol Genet，2009，18(9):1545-1555．

［31］ Fitzgerald RC，Hardwick R，Huntsman D，et al．Hereditary diffuse gastric cancer:updated consensus guidelines for clinical management and directions for future research［J］．J Med Genet，2010，47(7):436-444．

［32］ Ognjanovic S，Olivier M，Bergemann TL，et al．Sarcomas in TP53 germline mutation carriers:a review of the IARC TP53 database［J］．Cancer，2012，118(5):1387-1396．

［33］ Goldberg JI，Borgen PI．Breast cancer susceptibility testing:past，present and future［J］．Expert Rev Anticancer Ther，2006，6(8):1205-1214．

［34］ Mort M，Ivanov D，Cooper DN，et al．A meta-analysis of nonsense mutations causing human genetic disease［J］．Hum Mutat，2008，29(8):1037-1047．

［35］ Sim?es-Correia J，F(xiàn)igueiredo J，Oliveira C，et al．Endoplasmic reticulum quality control:a new mechanism of E-cadherin regulation and its implication in cancer［J］．Hum Mol Genet，2008，17(22):3566-3576．

［36］ Mateus AR，Sim?es-Correia J，F(xiàn)igueiredo J，et al．E-cadherin mutations and cell motility:a genotype-phenotype correlation［J］．Exp Cell Res，2009，315(8):1393-1402．

［37］ Figueiredo J，Sim?es-Correia J，S?derberg O，et al．ADP-ribosylation factor 6 mediates Ecadherin recovery by chemical chaperones［J］．PLOS ONE，2011，6(8):e23188．

［38］ Laurent-Puig，P．Béroud C，Soussi T．APC gene:database of germline and somatic mutations in human tumors and cell lines［J］．Nucleic Acids Res，26:269-270．

［39］ Floquet C，Rousset JP，Bidou L，et al．Rescue of non-sense mutated p53 tumorsuppressor gene by aminoglycosides［J］．Nucleic Acids Res，2011，39(8):3350-3362．

［40］ Bidou L，Allamand V，Rousset JP，et al．Sense from nonsense:therapies for premature stop codon diseases［J］．Trends in Molecular Medicine，2012，18(11):679-688．

［41］ Floquet，C．Rousset JP，Bidou L．Readthrough of premature termination codons in the adenomatous polyposis coli gene restores its biological activity in human cancer cells［J］．PLOS ONE，2011，6(8):e24125．