楊丕發(fā)，郭元菊

（1.云南省永平鎮(zhèn)林業(yè)工作站，云南 景谷666404；2.云南省景谷縣林業(yè)局，云南 景谷666400）

1 引言

思茅松果螟（Dioryctria sp.）隸屬鱗翅目（Lepidoptera）螟蛾科（Pyralidae）斑螟亞科（Phycitinae）梢斑螟屬（Dioryctria Zeller），主要分布于普洱市各縣，寄主植物為思茅松，球果受害嚴(yán)重，影響思茅松球果的正常發(fā)育及天然更新［1，2］。1996年在云南省普洱市首次發(fā)現(xiàn)，此蟲經(jīng)形態(tài)鑒定與微紅梢斑螟不是一個(gè)種。目前在思茅松球果上僅發(fā)現(xiàn)該種害蟲危害，在國(guó)內(nèi)外一些地區(qū)，對(duì)危害針葉樹枝梢的螟蛾科害蟲的生物學(xué)特性、發(fā)生與環(huán)境的關(guān)系及防治措施進(jìn)行過一些研究，對(duì)于思茅松球果螟危害與思茅松球果揮發(fā)性物質(zhì)關(guān)系研究尚未有文獻(xiàn)報(bào)道。因此，對(duì)該蟲的危害與思茅松球果揮發(fā)性物質(zhì)的研究，不僅具有一定的學(xué)術(shù)價(jià)值，而且在林業(yè)生產(chǎn)上也有極其重要的實(shí)踐意義。

2 研究地區(qū)概況

景谷縣位于云南省西南部、普洱市中部偏西，地處東經(jīng)100°02′～101°07′、北緯22°49′～23°52′之間，總面積7550hm2。擁有得天獨(dú)厚的森林、熱區(qū)、能源、礦藏等自然資源優(yōu)勢(shì)。森林資源是景谷縣最大的優(yōu)勢(shì)資源，全縣林業(yè)用地5.83×105hm2，占總面積的77.5%，人均擁有林業(yè)用地2hm2，是全省人均的3倍，是全國(guó)人均的10倍；森林覆蓋率達(dá)74.7%，為全國(guó)森林覆蓋率的5倍多；活立木總蓄積量達(dá)5.51×107m2，人均擁有193m2，是全省人均的5倍，全國(guó)人均的23倍；林木年生長(zhǎng)量達(dá)2.10×106m2，其中：思茅松占88.7%；年木材消耗量為8.96×105m2，林木年凈生長(zhǎng)量1.21×106m2。地勢(shì)由北向南傾斜，漸向東西兩翼擴(kuò)展，最高海拔2920m，最低海拔600m；屬于熱帶山原季風(fēng)氣候，年降水量為1354mm、蒸發(fā)量1916.4mm、平均雨日164.1d、平均氣溫20.1℃，≧10°的積溫為7360.9℃；年平均日照時(shí)數(shù)2065h。

在云南省普洱市，思茅松球果螟是一種具有嚴(yán)重危害性的種實(shí)害蟲，以幼蟲蛀食思茅松球果，造成球果畸形、干枯、甚至死亡，致使被害球果不能發(fā)育成熟，嚴(yán)重制約了思茅松的造林和天然更新。據(jù)調(diào)查，云南省主要的思茅松分布區(qū)，如普洱市、景谷縣、景東縣等地的思茅松均受到思茅松球果螟的為害，思茅松球果螟分布區(qū)與寄主思茅松在普洱市的分布區(qū)基本一致。思茅松球果螟危害后的球果呈半黃綠色或全部枯黃，在受害部位具明顯的蛀孔和蟲糞。據(jù)調(diào)查，球果被害率為22.22%～44.44%，種子被害率為20.87%～40.58%。在思茅松種子中無發(fā)芽能力的空癟種子率為4%～4.29%，導(dǎo)致無發(fā)芽能力種子實(shí)際達(dá)到34.95%。

3 研究方法

3.1 材料

昆蟲與寄主之間存在著一定的化學(xué)聯(lián)系，嗅覺誘導(dǎo)對(duì)昆蟲尋找寄主植物是極其重要的，植物的揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)昆蟲有著誘引或驅(qū)避作用，昆蟲可對(duì)植物的嗅覺刺激產(chǎn)生趨向行為［3，7］。

2010年7月，在普洱市景谷縣思茅松研究基地及滇中、滇西北地區(qū)采集思茅松（Pinus kesiya var.langbianensis）、云南松（Pinus yunnanensis）、華山松（Pinus armandi）、黃 杉 （Pseudotsuga sinensis）、云 南 油 杉（Keteleeria evelyniana）、云杉（Picea likiangensis）和冷杉（Abies georgei）球果，每樣株采集5個(gè)作為揮發(fā)性物質(zhì)的測(cè)定樣品，帶回室內(nèi)處理。

3.2 儀器

美國(guó)Agilent Technologices公司的HP5890氣相色譜儀、HP6890GC／5973MS氣相色譜～質(zhì)譜聯(lián)用儀、廣口瓶、移液管、容量瓶等。

3.3 收集、分析方法

取以上7種樹種球果各5個(gè)，放入裝有5g XAD2（高分子微球吸附劑）且已編號(hào)的250mL廣口瓶?jī)?nèi)，每放入一球果就盡快用特制的密封塑料膜封好口，以保證揮發(fā)性物質(zhì)被吸附劑充分吸收，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。40min后，取出球果，并在每個(gè)廣口瓶中加入10mL分析純二氯甲烷（CH2Cl2），再用新的密封塑料膜封口。12h后，用玻璃管抽出洗脫液體，放入有相應(yīng)編號(hào)的小玻璃瓶?jī)?nèi)，密封低溫下帶回實(shí)驗(yàn)室，利用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)其進(jìn)行定量及定性分析。

（1）氣象色譜條件。30QC2／AC5石英毛細(xì)管柱（30m×0.32mm）：柱溫80～280℃，程序升溫3℃／min；進(jìn)樣溫度250℃；氫火焰檢測(cè)器溫度250℃；進(jìn)樣量3μL；分流比50:1載氣為高純氮?dú)狻?/p>

（2）質(zhì)譜條件。GC條件：HP－5MS石英毛細(xì)管柱（30mm×0.25mm×0.25μm）；柱溫80～240℃，程序升溫3℃／min；進(jìn)樣口溫度250℃；柱前壓100kPa；進(jìn)樣量0.1μL；分流比15:1；載氣為高純 He氣；MS條件：電離方式EI；電子能量70eV；傳輸線溫度240℃；離子源溫度250℃；質(zhì)量范圍35～350amu；采用wiley＞n.l譜庫(kù)檢索定性，并參考文獻(xiàn)加以確認(rèn)。

4 球果揮發(fā)性物質(zhì)的測(cè)定及分析

4.1 球果揮發(fā)性物質(zhì)的測(cè)定

4.1.1 思茅松球果所含揮發(fā)物質(zhì)的測(cè)定

思茅松球果所含揮發(fā)物質(zhì)共有10種，都是單萜類物質(zhì)。其中以α－蒎烯、β－蒎烯、月桂烯、檸檬烯、β－水芹烯、β－石竹烯和異長(zhǎng)葉烯為優(yōu)勢(shì)組分，這6種揮發(fā)性物質(zhì)的含量占其球果所含總揮發(fā)性物質(zhì)含量的71.28%。見表1。

表1 思茅松球果揮發(fā)物成分

4.1.2 華山松球果所含揮發(fā)物質(zhì)的測(cè)定

華山松球果所含的主要揮發(fā)物質(zhì)有7種，都為單萜類物質(zhì)，以α－蒎烯、β－蒎烯、檸檬烯、月桂烯為主，這4種揮發(fā)物質(zhì)的含量占其球果總揮發(fā)物質(zhì)含量的53.60%，見表2。

表2 華山松球果的主要揮發(fā)物成分

4.1.3 云南松球果所含揮發(fā)物質(zhì)的測(cè)定

云南松球果所含揮發(fā)物質(zhì)有7種，都為單萜類物質(zhì)，以β－蒎烯、月桂烯、β－水芹烯、檸檬烯為主，這4種揮發(fā)物質(zhì)的含量占其球果總揮發(fā)物質(zhì)含量的60.00%，見表3。

表3 云南松球果主要揮發(fā)物成分

4.1.4 油杉球果所含揮發(fā)物質(zhì)的測(cè)定

油杉球果所含揮發(fā)物質(zhì)有11種，其中單萜類物質(zhì)10種，占其揮發(fā)物總含量的91.19%，醇類物質(zhì)1種，占其含量的0.64%。以α－蒎烯、β－蒎烯為優(yōu)勢(shì)組分，這2種揮發(fā)物質(zhì)的含量占其球果總揮發(fā)物質(zhì)含量的81.28%，見表4。

表4 油杉球果揮發(fā)物成分

4.1.5 冷杉球果所含揮發(fā)物質(zhì)的測(cè)定

冷杉球果所含揮發(fā)物質(zhì)有7種，都為單萜類物質(zhì)，以α－蒎烯、β－蒎烯、月桂烯、檸檬烯、β－水芹烯、香檜烯為優(yōu)勢(shì)組分，這5種揮發(fā)物質(zhì)的含量占其球果總揮發(fā)物質(zhì)含量的92.76%，見表5。

表5 冷杉球果揮發(fā)物成分

4.1.6 黃杉球果所含揮發(fā)物質(zhì)的測(cè)定

黃杉球果所含的揮發(fā)性物質(zhì)共有16種，其中單萜類物質(zhì)11種，占其含量的15.3%；酚類1種，含量占0.93%；醇類物質(zhì)2種，含量占2.65%。以α－蒎烯、月桂烯、檸檬烯、柏木醇和異長(zhǎng)葉烯為優(yōu)勢(shì)組分，這5種揮發(fā)性物質(zhì)的含量占其球果所含總揮發(fā)性物質(zhì)含量的14.24%，見表6。

表6 黃杉球果揮發(fā)物成分

4.1.7 云杉球果所含揮發(fā)物質(zhì)的測(cè)定

云杉球果所含揮發(fā)物質(zhì)有8種，都為單萜類物質(zhì)，以α－蒎烯、β－蒎烯、月桂烯、檸檬烯為優(yōu)勢(shì)組分，這4種揮發(fā)物質(zhì)的含量占其球果總揮發(fā)物質(zhì)含量的89.86%，見表7。

表7 云杉球果揮發(fā)物成分

4.2 結(jié)果分析

通過以上測(cè)定，得出7種針葉樹球果所含揮發(fā)物成分及其相對(duì)含量并進(jìn)行比較分析，見表8。

表8 七種針葉樹球果所含揮發(fā)物成分及其相對(duì)含量的比較 %

由表8匯總測(cè)定分析可知，云南油杉、云南松、華山松、黃杉、冷杉、云杉和思茅松這7種球果揮發(fā)性物質(zhì)的成分與含量，它們所含成分大體相同，其中α－蒎烯和β～蒎烯在7種球果中的含量都較高，對(duì)害蟲的引誘均起主要作用。

思茅松球果中揮發(fā)性物質(zhì)主要以α－蒎烯、β－蒎烯、月桂烯、檸檬烯＋β－水芹烯、β－石竹烯和異長(zhǎng)葉烯為主。

在思茅松球果中含有的β－石竹烯，在其他6種球果揮發(fā)物成分中未檢測(cè)到或含量很低；β－蒎烯在思茅松球果中含量為33.20%，遠(yuǎn)高于其他6種球果中β－蒎烯的含量。這說明β－蒎烯在對(duì)思茅松球果螟的危害引誘作用在思茅松上明顯強(qiáng)于其他6種球果。

5 結(jié)語(yǔ)

思茅松球果中揮發(fā)性物質(zhì)主要以α－蒎烯、β－蒎烯、月桂烯、檸檬烯＋β－水芹烯、β－石竹烯和異長(zhǎng)葉烯為主。其中β－石竹烯，是引誘思茅松球果螟危害思茅松球果的主要物質(zhì)。可推斷出：思茅松球果螟在寄主選擇上與球果揮發(fā)性物質(zhì)的成分及含量的不同組合有一定的聯(lián)系，有待今后進(jìn)一步研究。

［1］ 王平遠(yuǎn)，宋士美.中國(guó)赤松梢斑螟種團(tuán)的種類訂正［J］.昆蟲學(xué)報(bào)，1985，28（3）：303～304.

［2］ 王平遠(yuǎn).針葉樹嫩梢球果種害蟲區(qū)系及其綜合治理途徑評(píng)述［M］.北京：天則出版社，1990.

［3］ Rappaport N G，Jekins J，Roques A.Cone and foliage volatile from Douglas－fir and European larch：Relationship to attack by cone and seed insects［C］／／Proceedings.4th International conferences，IUFRO Cone and seed Insects Working Party，USD－Forest Service：Southern Research Station，1997.

［4］ Rappaport N G，Jenkins M J，Roques A.Estimating effect of Megastigmus supermotrophus（Hymenoptera：Torymidae）on Dougles－fir seed production：new paradigm［J］.J Econ Etomol，1993（86）：845～849.

［5］ Pan Y Z，Roques A，Malosse C，et al.Identification of Cone Volatiles Susceptible to Influence Attack of some Yunnan Conifers by Specific Cone Insects［J］.Ecormg，2000（4）：127～129.

［6］ 嚴(yán)善春，胡隱月，孫江華，等.落葉松球果揮發(fā)性物質(zhì)與球果花蠅危害的關(guān)系［J］.林業(yè)科學(xué)，1999，35（3）：58～62.

［7］ 嚴(yán)善春，孫江華，遲德富，等.植物揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)落葉松球果花蠅的驅(qū)避效果［J］.生態(tài)學(xué)報(bào)，2003，23（2）：314～319.