鐘喜光 劉瑞連 蔣曉煌 蔣孟良 劉朝暉 鐘振平

玉竹為百合科植物玉竹Polygonatum odoratum(Mill.)Druce的干燥根莖。秋季采挖，除去須根，洗凈，曬至柔軟后，反復(fù)揉搓、晾曬至無硬心，曬干；或蒸透后，揉至半透明，曬干。具有養(yǎng)陰潤(rùn)燥，生津止渴的功能。用于肺胃陰傷，燥熱咳嗽，咽干口渴，內(nèi)熱消渴[1]。玉竹提取物及多糖具有降血糖[2-4]、抗衰老[5-6]、免疫調(diào)節(jié)[6]、強(qiáng)心等作用[7-8]。玉竹產(chǎn)地加工，傳統(tǒng)采用揉搓，但揉搓時(shí)間沒有具體描述，全憑經(jīng)驗(yàn)，以揉至玉竹條呈半透明、滲出糖質(zhì)為宜。為探討揉搓對(duì)玉竹多糖提取率的影響，本文以玉竹中多糖的提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選出玉竹的最佳揉搓時(shí)間。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器UV-2000型紫外分光光度計(jì)（日本島津）；DK-S22型電熱恒溫水浴鍋（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；AR5120型電子天平（OHAUS）；Tw1100型高速萬能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）；KDM型調(diào)溫電熱套（山東鄆城華魯電熱儀器有限公司）。

1.2 試劑葡萄糖對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，供含量測(cè)定用，批號(hào)110833-201106）；其它試劑均為分析純；水為純水。

1.3 藥物玉竹購(gòu)于湖南省邵東縣，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室劉塔斯教授鑒定為百合科植物玉竹Polygonatum odoratum (Mill.)Druce的根莖。

2 方法與結(jié)果

2.1 藥物炮制玉竹加工傳統(tǒng)要求揉搓至滲出糖質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)其揉搓時(shí)間進(jìn)行了比較研究。將玉竹洗凈，曬2天后除去須根，用兩塊砧板夾著來回揉搓2、4、6、10min，再切薄片，40℃烘干；另取曬2天除須根的玉竹條不揉搓，直接切薄片，干燥，備用。

2.2 多糖含量測(cè)定

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備精密稱取 105℃干燥至恒重的無水葡萄糖 60.2mg，置 100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL中含無水葡萄糖0.602mg)。

2.2.2 供試品溶液的制備取揉搓不同時(shí)間的玉竹片10g，精密稱定。置圓底燒瓶中，加水1000mL，加熱回流1h，用脫脂棉濾過，如上重復(fù)提取1次，兩次濾液合并，濃縮，移至1000mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，備用。

2.2.3 線性關(guān)系考察精密量取對(duì)照品溶液 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL，分別置 50mL量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取上述各溶液 2mL，置具塞試管中，分別加4%苯酚溶液1mL，混勻，迅速加入硫酸7.0mL，搖勻，于40℃水浴中保溫30min，取出，置冰水浴中 5min，取出，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外-可見分光光度法（《中國(guó)藥典》2010年版附錄VA），在490nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：y=9.084x－0.0071，r＝0.9997。

2.2.4 精密度試驗(yàn)精密吸取葡萄糖對(duì)照品溶液2.0mL同 2.2.3 線性關(guān)系考察方法測(cè)定吸光度，重復(fù)6次，計(jì)算6次吸光度的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差與RSD，結(jié)果RSD＝1.02 %，表明該方法精密度良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)分別精密吸取同一份供試品溶液，于0、0.5、1.0、1.5、2.0h分別測(cè)定其吸光度，結(jié)果RSD＝1.42%，表明供試品溶液在2h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn)對(duì)同一批玉竹，按供試品溶液制備方法平行制備6份，依2.2.8 測(cè)定法測(cè)定吸光度，計(jì)算含量，其RSD=2.05%，實(shí)驗(yàn)表明該方法重復(fù)性好。

2.2.7 回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量（8.6%）的同一批玉竹約 0.5g 6份，精密稱定，每份加入20.5mg/mL的葡萄糖對(duì)照品溶液2.0mL（與樣品中葡萄糖含量的比例約為1:1），按供試品溶液制備方法分別制備供試品溶液，再依 2.2.8 測(cè)定法測(cè)定吸光度，按回收率（%）＝測(cè)得總含量－樣品中含量/加入量×100 %計(jì)算，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該含量測(cè)定方法回收率高、準(zhǔn)確性高，符合測(cè)定要求。

2.2.8 測(cè)定法 精密量取供試品溶液2mL，加乙醇10mL，攪拌，離心，取沉淀加水溶解，置50mL量瓶中，并稀釋至刻度，精密量取2mL，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自“加4%苯酚溶液1mL”起，依法測(cè)定吸光度，用回歸方程計(jì)算出供試品溶液中無水葡萄糖的重量，再按干燥品計(jì)算樣品中葡萄糖的含量，測(cè)定結(jié)果見表2。

取本品粗粉約1g，精密稱定，按文獻(xiàn)方法提取、測(cè)定[1]，以其含量為100%，計(jì)算出不同揉搓時(shí)間多糖相對(duì)提取百分率，結(jié)果見表2。

表2 玉竹多糖提取率測(cè)定結(jié)果(n=3)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，玉竹未揉葡萄糖提取率最低，揉后提取率增加，且隨時(shí)間增加而增加，到 6min含量最高，再延長(zhǎng)揉搓時(shí)間，多糖提取率反而下降。

3 討論

該研究表明，玉竹多糖提取率在一定內(nèi)隨時(shí)間的延長(zhǎng)，多糖含量增加，這可能是在揉搓過程中，使糖汁從植物細(xì)胞中揉出，從而加快了糖的擴(kuò)散、溶出所致，但隨著揉搓時(shí)間延長(zhǎng)，多糖含量反而下降，這也許是在揉搓過程中糖汁過多滲出，粘附容器內(nèi)壁，導(dǎo)致?lián)p失所致。說明傳統(tǒng)產(chǎn)地加工揉搓的重要性，以及揉搓程度的控制都非常重要。故玉竹在產(chǎn)地加工揉搓時(shí)，應(yīng)掌握好揉搓程度，揉至玉竹柔軟、滲出糖汁、半透明、粘手為宜。不及則多糖提取率較低，則玉竹條曬干后有皺紋，不飽滿，玉竹片色澤不白，影響質(zhì)量；過度揉搓多糖損失太多，提取率反而降低，且顏色太深，玉竹條易粘灰，難曬干，加之在貯藏中易泛油，也影響藥材質(zhì)量。揉的時(shí)間長(zhǎng)短根據(jù)毛坯曬的程度、揉的方法以及搓的溫度而異[9-11]?！吨袊?guó)藥典》規(guī)定，玉竹含玉竹多糖以葡萄糖（C6H1206）計(jì)，不得少于 6.0%，本品含量為8.6%，故符合規(guī)定。

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