李冰 郭珊 楊曉紅

隨著分子生物學(xué)和分子流行病學(xué)的迅速發(fā)展，病毒感染與腫瘤的關(guān)系受到廣泛重視。經(jīng)過國內(nèi)外學(xué)者近20年的研究［1，2］，已經(jīng)證明HPV感染是宮頸癌的直接病因。宮頸癌亦成為目前唯一一種病因明確的可以早期預(yù)防和治愈的惡性腫瘤。宮頸癌系指發(fā)生在宮頸陰道部或移行帶的鱗狀上皮細(xì)胞及宮頸管內(nèi)膜的柱狀上皮細(xì)胞交界處的惡性腫瘤。宮頸癌是臨床常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位，且發(fā)病率逐年增加。近年的研究顯示:幾乎100%宮頸鱗狀細(xì)胞癌和70%宮頸腺癌檢出人乳頭瘤病毒［3］，故高危型HPV生殖道持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生發(fā)展的致病因素。本文通過我院1216例宮頸患者術(shù)后HPV感染情況分析，為患者定期隨診復(fù)檢提供臨床依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2000年1月至2011年12月，經(jīng)我院婦瘤科治療后來我院門診第一次復(fù)診的宮頸癌患者。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采用專用的HPV采樣刷采集宮頸分泌物標(biāo)本。采樣前48 h內(nèi)不要做陰道沖洗，不要陰道用藥，以專用細(xì)胞保存液保存標(biāo)本。采樣的標(biāo)本4℃冰箱保存，2周內(nèi)檢測。

1.2.2 HPV分型檢測 用凱普導(dǎo)流雜交技術(shù)及其配套試劑(潮州凱普生物化學(xué)有限公司提供)對21種HPV基因型進(jìn)行分型檢測。基本原理是將病毒基因的DNA進(jìn)行基因擴(kuò)增，然后利用核酸分子快速導(dǎo)流雜交技術(shù)法，使目的分子導(dǎo)流穿過固定有DNA探針的低密度基因芯片薄膜上，而發(fā)生快速雜交。

1.3 檢測步驟 ①HPV DNA分離提取。②HPV PCR擴(kuò)增。③核酸分子快速導(dǎo)流雜交。④顯色HPV分型。操作和結(jié)果判讀按試劑盒要求進(jìn)行。

2 結(jié)果

通過對1216例檢測對象的HPV分型基因檢測，HPV陽性612例，占受檢人數(shù)的50.3%，(612/1216);HPV陰性604例，占受檢人數(shù)的49.6(604/1216)。HPV陽性患者612例中，單一亞型HPV感染的例數(shù)為385例，比率為31.7%(385/1216)，主要為高危亞型 HPV16，其次為 HPV18、HPV52、HPV31、HPV33等亞型。多重HPV亞型感染227例，比率為18.7%(227/1216)。

結(jié)果見表1

表11216例宮頸癌患者術(shù)后HPV感染檢出率(例，%)

3 討論

HPV是一種小分子雙鏈DNA病毒，對人皮膚、黏膜有高度親嗜性，根據(jù)其基因序列的多態(tài)性，目前已發(fā)現(xiàn)HPV有200余種臨床亞型，已證明其中30種HPV型可以從感染的生殖道組織細(xì)胞中分離出來，20余種已證實與子宮頸腫瘤相關(guān)。尤其HPV16型和HPV18型是子宮頸癌中最常見型別。其次是HPV58、HPV52和HPV56型［4］。高危型 HPV持續(xù)感染是發(fā)生宮頸癌必要因素，這一觀點(diǎn)已成共識，年輕人感染HPV多為一過性，自然消退時間約7～12月，大多數(shù)在2年內(nèi)消失，而年齡高的人群易持續(xù)感染［5］。檢測患者宮頸分泌物HPV，不但可以進(jìn)行宮頸癌篩查，而且還可作為宮頸癌術(shù)后判斷治療效果和預(yù)后的隨訪指標(biāo)。本文研究表明，宮頸癌患者術(shù)后HPV感染率為50.3%，說明在治療后感染率明顯下降，HPV轉(zhuǎn)陰與宮頸癌轉(zhuǎn)歸有關(guān)。這提示在今后的工作中，加強(qiáng)隨訪復(fù)診工作，進(jìn)一步觀察宮頸癌患者治療后持續(xù)性HPV感染與遠(yuǎn)期療效的關(guān)系，十分重要。

有研究報道，宮頸癌患者治療后HPV感染率仍高于普通正常人群，這樣為判斷治療效果，預(yù)后的分子學(xué)指標(biāo)奠定了基礎(chǔ)，對預(yù)測殘留或復(fù)發(fā)有重要價值。對于治療后仍持續(xù)感染HPV的患者應(yīng)密切隨訪，及時隨診復(fù)檢，以提高宮頸癌患者復(fù)發(fā)早期診斷，以免延誤病情。有研究顯示，HPV對預(yù)測疾病殘留和復(fù)發(fā)的敏感性分別為81%和100%，陰性預(yù)測值為96%和100%。且HPV檢測較單純細(xì)胞學(xué)檢查對術(shù)后復(fù)發(fā)或殘留具有更多的敏感性。HPV的分型檢測在隨訪中有助于判斷高危亞型的持續(xù)感染，還是新亞型的新型感染，是多型混合感染，還是單獨(dú)亞型病毒感染。在HPV感染隨訪中，除重視某一些高危亞型的持續(xù)感染外，術(shù)后HPV16型持續(xù)陽性時，還應(yīng)警惕宮頸癌復(fù)發(fā)及CN(宮頸上皮內(nèi)瘤變)的復(fù)發(fā)及發(fā)展。另外，若宮頸癌患者術(shù)后HPV檢測是陰性，可適當(dāng)延長隨訪復(fù)診間隔，以節(jié)省醫(yī)療資源，降低患者醫(yī)療費(fèi)用。

［1］ Lombard I，Vincent-Salomon A，Validire P，et al．Human Papillomavirus genotrpe as a major determinant of the course of cervical Jclim oncol，1998 16(8):2613-2619．

［2］ Mclachlin CM，Human Papillomavirus in cervical neop lasia:role，risk factors and implications Clin Lab Med，2000，20(2):257-270．

［3］ 于科雁，薛永春．人乳頭瘤病毒與宮頸癌的關(guān)系．口岸衛(wèi)生控制，2003，8(1):40-45．

［4］ 張學(xué)春．人乳頭瘤病毒與子宮頸癌的研究進(jìn)展．國外醫(yī)學(xué)婦產(chǎn)科分冊，2006，33(2):113-116．

［5］ 章文華主編．子宮頸病變的診斷要點(diǎn)．人民衛(wèi)生出版社，2006，12．