溫海燕

（菏澤學(xué)院制藥工程系，山東菏澤 274015）

奶牛布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的一種人畜共患傳染病，主要侵害奶牛的生殖系統(tǒng)，引起流產(chǎn)和睪丸炎，大多數(shù)母牛只流產(chǎn)一次，如牛群不更新，流產(chǎn)過1～2次的母牛可以正常生產(chǎn)，疫情似乎平息，一旦引進(jìn)新牛群，可再次引起流產(chǎn)[1-2]。奶牛布魯氏菌病不僅影響奶牛的生產(chǎn)性能，而且可以引起人類的多種慢性疾病，嚴(yán)重危害人類的身體健康，因此奶牛布魯氏菌病的檢疫和監(jiān)測至關(guān)重要。

本試驗(yàn)從菏澤地區(qū)6個奶牛場采集血清進(jìn)行奶牛布魯菌病的監(jiān)測，有利于了解菏澤地區(qū)奶牛布魯氏菌病的發(fā)生現(xiàn)狀和判斷其發(fā)展趨勢，有助于奶牛布魯氏菌病防控工作的順利開展。

1 材料與方法

1.1 樣品

奶牛血清665份，采自菏澤地區(qū)6個奶牛場，6個奶牛場近3年均未注射過布魯菌疫苗。

1.2 試劑

布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原、布魯氏菌病試管凝集試驗(yàn)抗原、布魯氏菌病試管凝集試驗(yàn)陰陽性血清均購自青島易邦生物工程有限公司，牛布魯氏桿菌病抗體ELISA試劑盒購自北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司。

1.3 樣品檢測

將采集的665份奶牛血清分別進(jìn)行虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)和ELISA試劑盒檢測?；⒓t平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)的操作及結(jié)果判定按照“動物布魯氏菌病診斷技術(shù)（GB/T18646—2002）”進(jìn)行，ELISA按照牛布魯氏桿菌病抗體ELISA試劑盒說明書進(jìn)行，抗原抗體反應(yīng)，顯色后在酶標(biāo)儀405nm測吸光值。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為：P%值=（SNC）× 100/（PC－NC），PC為陽性對照平均吸光度值，NC為陰性對照平均吸光度值，S為樣品吸光度值。P%值>30%為抗體陽性；P%值<30%為抗體陰性；并且需要同時符合陰性對照值NC<0.2；陽性對照值0.80< PC<2.50的條件。

2 結(jié)果與分析

665份奶牛血清經(jīng)虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)和ELISA試劑盒檢測，6個奶牛場普遍存在布病，其感染率高低不同。3種方法用于奶牛布病的檢測，其血清陽性率不同，虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測陽性率最高，為7.4%；ELISA檢測陽性率次之，為5.6%；試管凝集試驗(yàn)檢測陽性率最低，為4.4%?；⒓t平板凝集試驗(yàn)檢測陽性的樣品，經(jīng)試管凝集試驗(yàn)和ELISA檢測大多數(shù)為陽性，少部分為陰性，而經(jīng)虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)檢測為陰性的樣品，ELISA檢測大部分為陰性，小部分為陽性，具體檢測結(jié)果見表1。

表 1 奶牛血清檢測結(jié)果

3 討論

3.1 檢測的6個奶牛場普遍存在布病，經(jīng)調(diào)查分析引起奶牛布病普遍存在的原因主要有三點(diǎn)：第一，奶牛交易量增加，檢疫把關(guān)不嚴(yán)，將隱性帶菌牛引入；第二，虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)用于布病的檢測，一定程度上造成隱性帶菌牛的漏檢，這也是試驗(yàn)中出現(xiàn)“虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)檢測為陰性的樣品，ELISA檢測小部分為陽性”的原因；第三，對陽性牛的撲殺速度趕不上奶牛的感染速度，奶牛布病的傳播速度很快[3]。

3.2 奶牛布病的防控工作任務(wù)艱巨，在今后的工作中，重點(diǎn)從以下三方面做起：第一，加強(qiáng)宣傳教育，提高人們對奶牛布病危害性的認(rèn)識，引起人們對奶牛布病防控工作的重視；第二，鑒于虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)存在假陽性和敏感性不好[4-5]，ELISA敏感性強(qiáng)的特點(diǎn)，在奶牛布病的檢疫和監(jiān)測過程中，最好將虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)和ELISA三種方法有機(jī)結(jié)合起來，防止奶牛布病陽性牛的誤診和漏檢；第三，繼續(xù)做好可疑布病奶牛的隔離、消毒工作，陽性牛的淘汰、無害化處理工作。

[1]陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].5版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006：135-141.

[2]蔡一非.奶牛布氏桿菌的分離鑒定、血清學(xué)檢測方法比較與流行病學(xué)調(diào)查[D].烏魯木齊：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[3]龔德林，歐海敏，曾衍虎，等.奶牛布病流行病學(xué)調(diào)查與防控建議[J].畜禽業(yè)，2012（8）：66-67.

[4]鮑偉華，孫澤祥，朱善德，等.奶牛布氏桿菌病3種檢測方法比較[J].中國獸醫(yī)雜志，2009，45（4）：68-69.

[5]樊三忠，劉金彪，陳冬毅，等.虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)檢測奶牛布魯菌病的比較[J].中國動物檢疫，2009，26（9）：52-53.