郝麗紅

大同市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試所，山西大同 037008

提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準(zhǔn)確性的對策

郝麗紅

大同市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試所，山西大同 037008

本文針對工作中應(yīng)用液相色譜法來檢測食品中食品添加劑時經(jīng)常出現(xiàn)的情況，從三個方面：準(zhǔn)備工作、樣品的分析過程以及實驗后處理，分析了可能發(fā)生的情況，并總結(jié)出相應(yīng)的對策，對提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準(zhǔn)確性有一定的指導(dǎo)作用。

液相色譜法；食品添加劑；準(zhǔn)確性；對策

為了改善食品的品質(zhì)、口感以及防腐和在加工工藝中的需要，食品生產(chǎn)廠家常常會在食品中添加一種或者幾種食品添加劑。目前，食品添加劑的種類很多，主要有23種：抗結(jié)、酸度調(diào)節(jié)、消泡、漂白、增味、抗氧化、膨松、護色、著色、膠基糖果咀嚼和吹泡、乳化、面粉增白和提高焙烤制品質(zhì)量、酶制催化、被膜劑、防腐、水分保持、營養(yǎng)強化、穩(wěn)定和凝固、增甜、增稠、食品加工助劑、食品香料、其他。

近年來，一些商家為了更大限度地延長保質(zhì)期或者使食品的口感更佳，往往會在食品中添加超量的食品添加劑，甚至法律規(guī)定食品中禁止添加的添加劑，這給廣大人民群眾的生命健康造成很大的威脅。目前，檢測食品中添加劑的方法主要是用高效液相色譜［2］。但利用高效液相色譜儀來檢測食品中的添加劑時時常出現(xiàn)一些問題。因此，如何提高液相色譜法對食品添加劑檢測的準(zhǔn)確性意義十分重大。

1 準(zhǔn)備工作

1.1 流動相的過濾與脫氣

一般樣品溶液和流動相中都會存在一些直徑在0.45μm以上的顆粒。而色譜柱中的填充物很細(xì)，色譜柱的內(nèi)腔很小，這樣造成樣品和溶劑中的細(xì)小顆粒容易堵塞色譜柱以及毛細(xì)管。所以，所有的溶劑在使用之前必須經(jīng)過過濾，去除溶劑中的雜質(zhì)顆粒。

流動相必須預(yù)先經(jīng)過脫氣處理，否則，在系統(tǒng)內(nèi)容易逸出氣泡，影響泵的正常工作。同時也會對HPLC檢測器的基線穩(wěn)定性和靈敏度產(chǎn)生影響，甚至無法檢測。對低沸點溶劑采用煮沸法或者抽氣法時需要注意溶劑揮發(fā)可能造成組成的變化問題。目前最常見的脫氣做法是利用超聲脫氣。超聲脫氣的優(yōu)點是不會對溶劑的組成造成影響。一般超聲脫氣處理流動相只需20min～30min之間。應(yīng)該避免溶劑瓶和超聲槽壁以及超聲槽底部相接觸，以免超聲處理時溶劑瓶破裂。再者，容器內(nèi)的液面不要比水面高出太多。

1.2 檢查HPLC的柱壓與排氣泡

檢查HPLC的柱壓是否是正常的狀態(tài)。柱壓過高或者過低都會對檢測的結(jié)果造成一定的影響。通常情況下，HPLC常常會出現(xiàn)柱壓過高的問題。解決這個問題一般采用以下的步驟：第一步，拆下保護柱，觀察柱壓。如果柱壓下降，則是保護柱出現(xiàn)問題，如果柱壓仍然過高，則進行下一步檢查；第二步，從HPLC上取下色譜柱，觀察柱壓。如果柱壓仍然過高，則是管路出現(xiàn)阻塞，需要進行清洗，如果柱壓下降，則進行下一步檢查；第三步，反接色譜柱的進出口，接著用十倍于柱子體積的流動相清洗色譜柱，觀察柱壓。如果柱壓沒有下降，則進行下一步檢查；第四步，更換色譜柱的入口篩板，觀察柱壓。如果柱壓下降，則是因為樣品或者溶劑中含有雜質(zhì)顆粒，堵塞了入口篩板，如果柱壓仍然很高，則需要聯(lián)系廠商。通常情況下，避免柱壓過高的做法是在HPLC的進樣器和保護柱之間安裝在線過濾器。

另外，輸液管路中氣泡的及時排出也是提高檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟之一。如果管道中有氣泡存在，則分析的時候柱壓會出現(xiàn)不穩(wěn)定，譜圖上表現(xiàn)為基線不穩(wěn)，甚至出現(xiàn)假峰的現(xiàn)象。對樣品的定性與定量造成非常大的影響。

1.3 其它準(zhǔn)備工作

為了提高檢測的準(zhǔn)確性，試驗前還需做以下工作，如檢查室內(nèi)的溫度變化情況、電壓的波動情況、比例閥、單向閥、泵密封墊、保護柱、流動性過濾頭等。

1.4 色譜柱的清洗與平衡

上述準(zhǔn)備工作完成以后，必須對色譜柱進行清洗和平衡。清洗的步驟為：先用含有甲醇或者乙腈約80%的純水沖洗半個小時左右，接著用甲醇或者乙腈沖洗半個小時左右，然后用流動相平衡色譜柱到基線平穩(wěn)。

1.5 樣品處理

樣品處理必須按標(biāo)準(zhǔn)要求。否則，會出現(xiàn)以下兩種情況。一是不能徹底分離與待測組分結(jié)構(gòu)相近的組分而導(dǎo)致檢測的結(jié)果偏高；二是待測組分未能徹底分離而導(dǎo)致檢測的結(jié)果偏低。因此，處理樣品時應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)要求，比如試劑加入的量，樣品處理所需的時間和溫度等等。平行樣應(yīng)注意處理條件相同。

2 樣品的分析過程

2.1 定性

一般采用加標(biāo)同類樣品來定性的方法，即向不含待測組分的同類樣品中加入一定濃度的標(biāo)樣，通過與樣品的保留時間的比較來進行定性。如果兩者的保留時間差不多，則在待測樣品中加入含量與樣品待測組分基本相同的等體積標(biāo)液進行定性。若加標(biāo)樣品中待測組分的峰出現(xiàn)叉峰，則可以確定不是待測組分；若加標(biāo)樣品中待測組分的峰沒有出現(xiàn)叉峰，根據(jù)HPLC測出的待測組分含量、樣品和標(biāo)樣的混合計算出來的含量基本相同，則可以確定是待測組分，反之，非待測組分。

2.2 定量

在一定的條件下分別加入一系列相同體積的標(biāo)樣，測得相對應(yīng)的響應(yīng)值，繪制出響應(yīng)值與標(biāo)樣含量的校準(zhǔn)曲線，接著檢測待測樣品，從校準(zhǔn)曲線上找出待測組分響應(yīng)值對應(yīng)的組分含量。所以，在實際檢測工作中，若待測組分的濃度低于檢測低限，或者按照標(biāo)準(zhǔn)方法無法濃縮的，結(jié)果為未檢出；若可以濃縮，濃縮后再進行檢測；若可以增加樣品量，應(yīng)增加樣品量后再進行檢測；若待測組分的濃度高于校準(zhǔn)曲線的上限，則應(yīng)對待測樣品進行適當(dāng)稀釋后再進行檢測。

在進行山梨酸、糖精鈉、苯甲酸［4］的分析過程中，在苯甲酸前有時會有安賽蜜峰的出現(xiàn)，并在糖精鈉前有時會有脫氫乙酸峰的出現(xiàn)，而且這些峰非常接近，且不能完全分離，形成分叉峰或者饅頭峰，嚴(yán)重影響樣品的定性與定量。如果通過樣品標(biāo)簽的信息能確定添加劑，就可以直接定性。如果待測組分超標(biāo)，則要降低流動相的極性徹底分開雜質(zhì)峰后再進行定量。如果不能確定樣品中的添加劑，則要通過樣品加標(biāo)來定性，再定量。如果標(biāo)準(zhǔn)中聲明不允許添加的，但在待測峰的附近出現(xiàn)這些添加劑峰的，則要通過樣品加標(biāo)來定性，再定量，并注意待測峰應(yīng)與雜質(zhì)峰完全分離開，否則，要降低流動相的極性來使雜質(zhì)峰徹底分離開后才可定量。

3 實驗后處理

完成實驗后，必須徹底清洗HPLC的色譜柱。用含甲醇或乙腈約80%的純水來沖洗，沖洗到柱壓恢復(fù)至實驗前用含甲醇或乙腈約80%的純水沖洗時的柱壓。用甲醇或者乙腈來沖洗，沖洗到柱壓恢復(fù)至實驗前用甲醇或者乙腈沖洗時的柱壓。

一般半個月至一個月要清洗單向閥、泵密封墊、保護柱、流動性過濾頭等易堵塞的部件一次。清洗用純水要現(xiàn)做，現(xiàn)過濾，現(xiàn)用。在過濾好的清洗用純水中加入10%的甲醇或乙腈溶劑，可防止細(xì)菌滋生，延長純水的使用時間。

4 結(jié)論

綜上所述，在食品中食品添加劑檢測高標(biāo)準(zhǔn)的環(huán)境下，高效液相色譜儀的分析技術(shù)以其靈敏度、分辨率和定量精度高的優(yōu)點，在食品檢測領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用。為了迎合檢測的高標(biāo)準(zhǔn)，我們必須提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準(zhǔn)確性。本文研究表明，準(zhǔn)備工作、樣品的分析過程以及實驗后處理相應(yīng)對策的總結(jié)對提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準(zhǔn)確性有一定的指導(dǎo)作用。

[1]陳燕茹，夏菁.食品添加劑的檢測技術(shù)研究[J].中國科技博覽，2012(8):277-277.

[2]張立立.淺論食品添加劑的檢測方法[J].科學(xué)之友，2011(9):36-37.

[3]劉英，尹州，鄒曉筱等.高效液相色譜法同時測定蜜餞中的16種食品添加劑[J].分析測試學(xué)報，2011，30(6):651-655.

[4]張麗妮，范勇.高效液相色譜法同時測定月餅中五種食品添加劑[J].商品與質(zhì)量·學(xué)術(shù)觀察，20(9):235.

[5]苗述.高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用[J].黑龍江科技信息，2013(4):39.

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1674-6708（2013）97-0116-02