路子云，冉紅凡，劉文旭，屈振剛，李建成

(河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所，河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北保定 071000)

粘蟲Mythimna separata(Walker)是鱗翅目夜蛾科的雜食性害蟲，危害水稻、玉米等一百多種作物(浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)，1982)。我國自上世紀(jì)六十年代就開始了對粘蟲的研究和飼養(yǎng)工作，但當(dāng)時(shí)主要以玉米葉作為飼料，尚未出現(xiàn)人工飼料(金翠霞等，1965)。粘蟲的人工飼料最早見于Sato(1965)的介紹，此后Singh(1974，1977)，Neelgund and Mathad(1974)也都用人工飼料飼養(yǎng)粘蟲獲得成功。而我國用人工飼料飼養(yǎng)粘蟲最早見于上世紀(jì)八十年代初(畢富春，1981)，此后陸續(xù)開展對粘蟲人工飼料的研究(蔣素蓉等，2006;朱麗梅等，2001;周曉東等，2009);但也有僅用玉米葉飼養(yǎng)粘蟲的報(bào)道(余洋等，2011)。我們在前人研究的基礎(chǔ)上，經(jīng)過多年實(shí)驗(yàn)室人工飼養(yǎng)，摸索出了粘蟲室內(nèi)飼養(yǎng)的成熟技術(shù)流程和飼料配方，為粘蟲的室內(nèi)大量飼養(yǎng)提供了有力保障。

管側(cè)溝繭蜂Microplitis tuberculifer(Wesmael)是寄生甜菜夜蛾、粘蟲等鱗翅目害蟲低齡幼蟲的天敵，該寄生蜂在甜菜夜蛾等害蟲關(guān)鍵的低齡幼蟲期(1～2齡)寄生，能使目標(biāo)害蟲在大量發(fā)生之前失去作用，具有控制害蟲危害的重要作用(屈振剛等，2004;屈振剛等，2005;王金耀等，2005;王金耀等，2007)。經(jīng)多年研究，在人工繁殖方法上有所突破，以該蜂具有的滯育特性，首創(chuàng)了管側(cè)溝繭蜂周年累積繁育的途徑和方法，繁育出的蜂繭能保存1年左右，具備了良好的商品屬性。鑒于粘蟲具備可以群養(yǎng)且不相互殘殺的特點(diǎn)，在室內(nèi)用它作為替代寄主來大量繁殖管側(cè)溝繭蜂，故建立穩(wěn)定的粘蟲實(shí)驗(yàn)室種群以供管側(cè)溝繭蜂室內(nèi)大量繁殖顯的尤為重要?，F(xiàn)將粘蟲與管側(cè)溝繭蜂室內(nèi)繁育的方法與技術(shù)要點(diǎn)介紹如下。

1 飼養(yǎng)條件與設(shè)備

1.1 飼養(yǎng)環(huán)境條件

養(yǎng)蟲室環(huán)境溫度:25±1℃，RH:65%～75%，光周期L∶D=14∶10。

光照培養(yǎng)箱:GXZ－300B 型，寧波江南儀器廠生產(chǎn)。

1.2 飼養(yǎng)設(shè)備

(1)幼蟲飼養(yǎng)袋:用100目錦綸紗制成，長、寬均為33 cm，一端開口;使用時(shí)袋口用塑料拉桿封住。此袋可供養(yǎng)1～2齡小幼蟲1000頭左右，3～4齡幼蟲200～300頭，5齡以上幼蟲70頭左右。

圖1 幼蟲飼養(yǎng)袋Fig.1 Rearing bag of Mythimna separata(Walker)larvae

(2)粘蟲化蛹盒:為白色四方體硬塑料盒，長35 cm，寬25 cm，高10 cm，頂端開口，配有帶紗網(wǎng)的盒蓋，用于老熟幼蟲化蛹。每盒可供100～150頭老熟幼蟲化蛹。

圖2 粘蟲化蛹盒Fig.2 Pupate box of Mythimna separata(Walker)

(3)粘蟲成蟲產(chǎn)卵籠:產(chǎn)卵籠規(guī)格為50 cm×35 cm×55 cm，框架、底座、后部為鋁合金材料，側(cè)面和頂面為不銹鋼紗網(wǎng)，前部為玻璃推拉門。每籠可供300頭左右成蟲產(chǎn)卵，產(chǎn)卵介質(zhì)為塑料繩(鄭桂玲等，2002)。

圖3 產(chǎn)卵籠Fig.3 Oviposition cage of Mythimna separata(Walker)

(4)管側(cè)溝繭蜂接蜂箱:規(guī)格為40 cm×35 cm×35 cm 的有機(jī)玻璃盒，前面盒蓋帶有60目的錦綸紗網(wǎng)，保持盒子的通透性。

圖4 接蜂箱Fig.4 Parasitism case of Microplitis tuberculifer(Wesmael)

2 粘蟲的飼養(yǎng)方法

2.1 蟲源的獲得

每年6月份待田間自然發(fā)生時(shí)采集粘蟲幼蟲，選擇健康無病的幼蟲作為室內(nèi)飼養(yǎng)的蟲源。

2.2 各蟲態(tài)的飼料

1)成蟲:成蟲羽化后，放入產(chǎn)卵籠內(nèi)，用10%蜂蜜水補(bǔ)充營養(yǎng)。

2)幼蟲:1～3齡幼蟲需選擇較鮮嫩的玉米苗或小麥苗作為飼料飼養(yǎng)，4齡以后的幼蟲可以用改良的人工飼料飼養(yǎng)。

人工飼料配方:

人工飼料的制作方法:在鍋中放入1300mL水煮開;加入瓊脂、白糖;加入玉米葉粉、麥麩、山梨酸、尼泊金、酵母粉(用700mL 水?dāng)嚢?;降溫后加入Vc 40片，Vb 15片(混合磨碎)，混合均勻。

飼料盤事先用酒精消毒，具體方法:將酒精倒入飼料盤內(nèi)，讓其均勻分布于盤底，點(diǎn)燃酒精。待酒精燃盡后放置空盤，至不燙手為止。

將鍋內(nèi)攪拌好的飼料倒入盤內(nèi)，晾涼后放入冷藏箱保存，隨用隨取。

2.3 各蟲態(tài)的飼養(yǎng)方法

2.3.1 消毒

首先要進(jìn)行養(yǎng)蟲室、養(yǎng)蟲器具的消毒，其方法主要有40%甲醛熏蒸，紫外線照射0.5～1 h，100℃開水浸燙10 min 等。

2.3.2 卵

將帶有粘蟲卵的塑料繩用無菌水沖洗2～3 遍，然后用4%的甲醛溶液浸泡10 min，最后再用無菌水沖洗2～3 遍，充分晾干后放到保鮮袋中加少許玉米苗保濕。放入溫度25℃±1℃，光周期為L∶D=14∶10 的光照培養(yǎng)箱中使其孵化。

2.3.3 幼蟲

幼蟲孵化后，放入養(yǎng)蟲袋中，養(yǎng)蟲袋內(nèi)放入U(xiǎn)形鐵絲支撐起一定空間供幼蟲活動。每天加入一定量的新鮮玉米苗供其食用。每隔1～2 d 清除一次殘余食物和糞便，清除時(shí)根據(jù)幼蟲大小使用不同目數(shù)的篩子篩選;更換飼料時(shí)，要防止幼蟲丟失，注意把殘余在玉米芯葉內(nèi)的幼蟲收回。待幼蟲到達(dá)3齡時(shí)，要及時(shí)調(diào)整養(yǎng)蟲袋內(nèi)幼蟲密度，每天更換飼料并清除糞便。3齡前環(huán)境濕度以70%～80%為宜。幼蟲到達(dá)4齡以后，用人工飼料飼養(yǎng)，此時(shí)幼蟲的食量、排糞量不斷增加，必須注意飼料的補(bǔ)充及糞便的徹底清除。飼料添加時(shí)要足量，并及時(shí)調(diào)整幼蟲，剔除病蟲。養(yǎng)蟲場所要注意通風(fēng)換氣，該時(shí)期幼蟲適宜的環(huán)境濕度為60%～70%。

2.3.4 蛹

老熟幼蟲達(dá)到6齡時(shí)，開始化蛹。每天將接近化蛹的老熟幼蟲挑出，放入化蛹盒內(nèi)，盒底鋪幾層吸水紙，并噴灑適量水，加放少量的玉米苗，在提供食物的同時(shí)還可達(dá)到保濕的目的。在25℃±1℃條件下，大約3～5 d 即可完成化蛹過程。

2.3.5 成蟲

在25℃條件下，粘蟲蛹的歷期約為10～11 d。成蟲羽化后要及時(shí)移入產(chǎn)卵籠內(nèi)，每籠300頭左右?；\子底部鋪有兩層濾紙，上部用濕毛巾保濕，濕度應(yīng)保持在80%～90%，光周期為L∶D=16∶8。產(chǎn)卵籠內(nèi)放置盛有10%蜂蜜水的蜜碗，作為粘蟲成蟲的營養(yǎng)來源。成蟲取食3 d 后，在籠中放塑料繩，供成蟲產(chǎn)卵及停息之用。產(chǎn)卵籠放在干擾少、通風(fēng)良好的場所。每天收集卵條，供下一代繁殖用。也可把卵保存于冷藏箱內(nèi)供以后使用(4～5℃條件下大約可以保存1個(gè)月)。

3 管側(cè)溝繭蜂的飼養(yǎng)

3.1 蜂種來源

在河北省保定地區(qū)采集被管側(cè)溝繭蜂寄生的甜菜夜蛾幼蟲，通過室內(nèi)飼養(yǎng)獲得自然蜂種。

3.2 替代寄主粘蟲的準(zhǔn)備

將帶有粘蟲卵的塑料繩用無菌水沖洗2～3 遍，然后用4%的甲醛溶液浸泡10 min，再用無菌水沖洗2～3 遍，充分晾干后放到保鮮袋中加少許玉米苗保濕。放入溫度25℃±1℃，光周期為L∶D=14∶10的光照培養(yǎng)箱中使其孵化。待粘蟲幼蟲發(fā)育到2齡或2齡末時(shí)備用。

3.3 接蜂

在接蜂箱底部鋪一薄層玉米苗，將準(zhǔn)備好的2齡或2齡末粘蟲幼蟲放在玉米苗上;在管側(cè)溝繭蜂羽化后，將雌雄蟲放入交配箱48 h 供其交配，然后按1:20 的蜂蟲比例放入接蜂箱。箱壁上放置兩個(gè)沾有10%蜂蜜水的脫脂棉球以供成蟲取食補(bǔ)充營養(yǎng)。接蜂箱用透明膠帶密封好，以防粘蟲小幼蟲逃逸。接蜂24 h 后將箱內(nèi)粘蟲幼蟲取出，開始寄生蜂的繁育。

3.4 被寄生幼蟲的收集與管理

將接蜂24 h 的粘蟲幼蟲過篩后，放入養(yǎng)蟲袋中飼養(yǎng)，幼蟲密度要適當(dāng)。每天更換飼料(新鮮玉米葉)并清除糞便，及時(shí)剔除病蟲和未寄生的幼蟲。5～7 d 后待寄生癥狀明顯時(shí)，放入適量的紙條，以備結(jié)繭。

3.5 管側(cè)溝繭蜂的收集

管側(cè)溝繭蜂在非滯育環(huán)境條件下(溫度25℃±1℃，L∶D=14∶10)一般10 d 左右即可結(jié)繭化蛹。將養(yǎng)蟲袋、紙條、玉米苗上的繭收集起來放到0－5℃的冷藏箱中備用，發(fā)育繭可存放7～10 d。

管側(cè)溝繭蜂在滯育環(huán)境條件下(溫度16℃±1℃，L∶D=10∶14)25 d 左右結(jié)繭化蛹。滯育繭保存在底部裝有濕沙保濕的玻璃瓶中，置于0～5℃的冷藏箱中儲存，保存期達(dá)1年左右。

4 粘蟲與管側(cè)溝繭蜂飼養(yǎng)流程

在室內(nèi)粘蟲和管側(cè)溝繭蜂的繁育過程中，應(yīng)嚴(yán)格控制每一個(gè)環(huán)節(jié)的環(huán)境條件，調(diào)控發(fā)育進(jìn)度，保證寄生蜂與適宜齡期的寄主幼蟲相吻合。粘蟲與管側(cè)溝繭蜂的室內(nèi)繁育飼養(yǎng)流程見圖5。

圖5 粘蟲與管側(cè)溝繭蜂室內(nèi)繁育流程Fig.5 The flow chart of mass rearing of Mythimna separata(Walker)and Microplitis tuberculifer(Wesmael)

5 結(jié)論與討論

粘蟲具有可以群體飼養(yǎng)、沒有休眠特性可以周年生產(chǎn)、飼養(yǎng)成本低、大量繁殖容易等優(yōu)點(diǎn)，因此以粘蟲作為管側(cè)溝繭蜂的繁育寄主，并完善室內(nèi)大量飼養(yǎng)粘蟲的飼料配方和繁殖技術(shù)對于完善天敵昆蟲的群體生產(chǎn)具有促進(jìn)作用。

對粘蟲的飼養(yǎng)，最初僅用玉米葉作飼料(金翠霞等，1965;余洋等，2011)，后來出現(xiàn)了人工飼料(畢富春，1981;朱麗梅等，2001;蔣素蓉等，2006;周曉東等，2009)。玉米葉是粘蟲的天然食料，但受氣候和生物本身生長發(fā)育條件的限制，不能成批生產(chǎn);而人工飼料盡管具有能批量制作的優(yōu)點(diǎn)，但多少與粘蟲的天然食物有區(qū)別，尤其對粘蟲低齡幼蟲有較大影響。而本方法通過玉米苗與人工飼料的結(jié)合，即保證了粘蟲低齡幼蟲的存活率，又保證了大齡幼蟲飼料的批量供應(yīng)。當(dāng)然本方法也有需要改進(jìn)的地方，仍然需要大量的人工操作，今后需要在人工飼料和粘蟲飼養(yǎng)的機(jī)械化、標(biāo)準(zhǔn)化方面進(jìn)一步深入研究。

在開展大量繁育寄主粘蟲的同時(shí)，我們確定了室內(nèi)大量繁育管側(cè)溝繭蜂的工藝流程，創(chuàng)造了周年性累積繁育滯育蜂繭，進(jìn)行保存和按需擇期解除滯育進(jìn)行田間釋放的技術(shù)，使該蜂具備了更強(qiáng)的商品屬性，初步制定了產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法。通過上述飼養(yǎng)方法，已建立穩(wěn)定的管側(cè)溝繭蜂實(shí)驗(yàn)種群，目前正在進(jìn)行管側(cè)溝繭蜂的中試生產(chǎn)，但距離商品化工業(yè)化生產(chǎn)還有一定距離，特別是在活體昆蟲上繁殖天敵容易造成病毒感染，缺乏全程的調(diào)控技術(shù)研究。進(jìn)行全面質(zhì)量控制是保證管側(cè)溝繭蜂大量繁育和釋放成功的必要措施，個(gè)體大小、壽命、生殖力、羽化率、性比、雌性畸形率、飛行能力、寄主選擇行為、田間擴(kuò)散和寄生能力等特征均決定管側(cè)溝繭蜂的質(zhì)量。因此，如何改進(jìn)提高蜂的質(zhì)量，制定相關(guān)的生物學(xué)參數(shù)及其標(biāo)準(zhǔn)化的測定技術(shù)，保證蜂的質(zhì)量常年保持在最佳水平，取得最佳的田間釋放防治效果等一系列問題仍需進(jìn)一步的研究。若達(dá)到大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，這些技術(shù)參數(shù)和操作規(guī)程仍需明確。

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