黃 明 （山東省東阿縣畜牧局 252200）

文獻(xiàn)綜述

貓傳染性鼻氣管炎研究進(jìn)展

黃 明 （山東省東阿縣畜牧局 252200）

貓傳染性鼻氣管炎(Feline infectious Rhinotracheitis)是由貓皰疹病毒1型（feline herpesvirus type 1，F(xiàn)HV-1）引起的一種以上呼吸道感染為主要癥狀的急性、高度接觸性傳染病。臨床以角膜結(jié)膜炎、上呼吸道感染和流產(chǎn)為特征，但以上呼吸道癥狀為主。主要感染貓科動(dòng)物，發(fā)病率很高，可達(dá)100%，但病死率在不同年齡的貓上差異很大，成年貓一般不引起死亡，但幼仔貓的死亡率可達(dá)50%。該病首先從美國(guó)發(fā)現(xiàn)，并從中分離到病毒[1]。隨后在歐、美等一些國(guó)家均相繼報(bào)道。我國(guó)已多次發(fā)現(xiàn)可疑病例，但還沒(méi)有對(duì)其進(jìn)行診斷和檢測(cè)的報(bào)道。

1 病原

貓皰疹病毒1型屬于皰疹病毒科，甲型皰疹病毒亞科成員[2]，為雙股DNA病毒，具有皰疹病毒的一般形態(tài)特征。1958年由Crandell and Maurer首次從美國(guó)患呼吸道疾病的仔貓?bào)w中分離與鑒定[1]。

1.1 形態(tài)結(jié)構(gòu) 位于細(xì)胞核內(nèi)的FHV-1病毒粒子平均直徑約148nm，位于細(xì)胞漿內(nèi)的病毒粒子直徑約為128～168nm，細(xì)胞外游離病毒的直徑約164nm，含162個(gè)殼粒。病毒粒子主要由核心、衣殼和囊膜三部分組成。核心直徑介于30～70nm之間，由雙股DNA與蛋自質(zhì)纏繞而成，觀察超薄切片標(biāo)本時(shí)，核心常為均勻一致的圓形電子致密區(qū)，但有時(shí)也能看到花紋樣結(jié)構(gòu)。病毒衣殼為立體對(duì)稱的正二十面體，外觀呈六角形。外層衣殼的形態(tài)結(jié)構(gòu)是皰疹病毒科的重要特征，它由162個(gè)互相連接呈放射狀排列且有中空軸孔的殼粒構(gòu)成。殼粒的大小約為12.5×9.5nm.主要成分為多肽[2]。衣殼周圍有一基質(zhì)層，通常被皮層(tegument)包繞，皮層外面由雙層病毒膜包裹，病毒膜表面附有纖突，病毒膜與纖突統(tǒng)稱為囊膜[3]。

通常在宿主細(xì)胞核內(nèi)看到各種形狀核心的未成熟病毒粒子，直徑約95nm，該病毒粒子在細(xì)胞核內(nèi)形成核內(nèi)包涵體，此種包涵體由電子散射力較強(qiáng)的物質(zhì)所構(gòu)成的病毒基質(zhì)和未成熟病毒粒子組成，有時(shí)可看到未成熟粒子似乎以包涵體的基質(zhì)為基地，形成半月?tīng)罨蝰R蹄形結(jié)構(gòu)。在宿主細(xì)胞核的空泡中還看到成熟粒子及向空泡內(nèi)突出的“芽”結(jié)構(gòu)，此種成熟粒子屬于小囊膜病毒粒子，直徑約135nm。在宿主細(xì)胞漿的空泡中看到大囊膜病毒粒子及由多個(gè)核衣殼構(gòu)成的包涵物，同時(shí)在該胞漿空泡膜上能看到病毒“芽”結(jié)構(gòu)。在細(xì)胞間隙看到大囊膜粒子及空心粒子，直徑約為185nm[3]。

1.2 基因結(jié)構(gòu) 1991年Grail等對(duì)貓皰疹病毒I型B927毒種進(jìn)行了限制性酶切圖譜的分析，發(fā)現(xiàn)其基因組大小約為126 kbp，由一99kbp的長(zhǎng)獨(dú)特區(qū)(UL)和一27kbp的短片段組成，其中短片段由長(zhǎng)7～8.5kbp的反向重復(fù)序列夾心8～9kbp的短獨(dú)特序列（US）組成[4]。US區(qū)包含gG、gD、gI和 gE等基因[5]。FHV-1的基因結(jié)構(gòu)模式圖[1]如下：

1.3 培養(yǎng) 本病毒對(duì)貓紅細(xì)胞有凝集和吸附特性。FHV-1能在貓胚的腎、肺以及睪丸細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)良好增殖和傳代。病毒增殖迅速，細(xì)胞致病性強(qiáng)，接種12h就開(kāi)始出現(xiàn)CPE，24hCPE達(dá)50%，CPE呈分散性病灶，細(xì)胞圓縮，胞漿呈線狀，合胞體形成。36h達(dá)高峰，病變細(xì)胞培養(yǎng)物往往葡萄串狀，48h細(xì)胞全部脫落[3]。感染細(xì)胞因融合而產(chǎn)生多核巨細(xì)胞，核內(nèi)有大量橢圓形嗜酸性包涵體、正常傳代時(shí)，一般在接種后2～4d可達(dá)收獲程度。貓鼻氣管炎病毒在瓊脂覆蓋層下能形成蝕斑。其他異種動(dòng)物細(xì)胞能較好增值病毒的只有兔腎細(xì)胞一種，不感染雞胚和雞胚成纖維細(xì)胞，可對(duì)人、猴和牛源細(xì)胞發(fā)生頓挫型感染，并形成包涵體，但難以傳代。

1.4 血清型和變異 最早的研究發(fā)現(xiàn)這些毒株的特性相同，都屬于一個(gè)血清型。交叉中和試驗(yàn)證明本病毒與貓細(xì)小病毒、牛鼻氣管炎病毒、偽狂犬病病毒、貓杯狀病毒以及單純摘疹病毒等都不呈現(xiàn)交叉反應(yīng)[2]。但隨后的研究發(fā)現(xiàn)了FHV-1存在一些新的基因型。1992年Horimoto等進(jìn)行了9個(gè)毒株的同源性分析，發(fā)現(xiàn)致弱的F2疫苗株缺乏一種分子量為36kDa的蛋白質(zhì)，并且MluI限制性酶的切割模式和野毒株有明顯的不同[6]。1995年Maeda等發(fā)現(xiàn)所有的分離株可以通過(guò)M1uI消化的方法分為3個(gè)血清型：C7301，F(xiàn)2和C7805型[7，8]。2005年Hamano等報(bào)道SalI酶切可以作為FHV-1的基因標(biāo)志進(jìn)行FHV-1野毒分離株的鑒別[9]。1998年Fujita等發(fā)現(xiàn)FHV-1不同毒株之間可以發(fā)生體外基因重組，重組頻率從10.1%到21.5%不等[10]。

1.5 抵抗力 FHV-1對(duì)外界因素的抵抗力很弱，離開(kāi)宿主后只能存活數(shù)天。對(duì)酸和脂溶劑敏感，在-60℃下只能活存3個(gè)月，在56℃下經(jīng)4～5min滅活。

2 流行病學(xué)

（1）貓是本病的自然宿主，其它的貓科動(dòng)物也可以感染，曾有幼齡印度豹感染引起皮膚潰瘍的報(bào)道[11]。但也有從犬中分離到貓皰疹病毒I型的報(bào)道[12]。本病成年和幼體貓均易發(fā)生，特別是幼仔感染后，嚴(yán)重的會(huì)引起死亡。仔貓通常在4～6周齡，因其母源抗體水平下降易感。（2）病貓是主要的傳染源。病毒在鼻、咽喉、氣管和支氣管以及舌、結(jié)膜等的上皮細(xì)胞內(nèi)增殖并經(jīng)鼻、眼、咽等的分泌物排出。急性感染貓由其唾液和淚液大量散毒可達(dá)數(shù)周：持續(xù)帶毒貓無(wú)明顯癥狀，呈應(yīng)激性間歇性小量散毒；近年來(lái)的研究證明，自然康復(fù)或人工接種耐過(guò)貓，能長(zhǎng)期帶毒和排毒，成為危險(xiǎn)的傳染源。本病很可能象很多皰疹病毒那樣，具有潛伏感染的性質(zhì)。孕貓感染后可能發(fā)生垂直感染并致死胎兒。（3）貓傳染性鼻氣管炎主要是通過(guò)直接接觸，或通過(guò)含病毒的飛沫而傳播，呈現(xiàn)高度的接觸傳染性。FHV-1通過(guò)易感貓的口、鼻直接接觸傳播。懷孕貓感染可將FHV-1傳染給胎兒。發(fā)情期可因交配感染。（4）FHV-1全世界皆有流行。群居時(shí)，貓感染FHV-1后普遍發(fā)病較重，這與管理不善、FHV-1帶毒貓的存在有直接關(guān)系。因此，合理的管理、消毒和對(duì)病貓的適當(dāng)隔離都能很好地預(yù)防FHV-1的感染與傳播。

3 癥狀

（1）本病潛伏期很短，約2～5d，取決于貓的年齡、免疫狀況以及品種和可能的其他末知因素。FHV-1在略低于正常體溫時(shí)復(fù)制增殖最快[13]。貓感染本病后，病毒能在病貓的鼻腔、咽喉、氣管、結(jié)膜和舌的上皮細(xì)胞內(nèi)繁殖，并隨其分泌物排到體外。因此，F(xiàn)HV-1感染多局限于眼、口、上呼吸道等淺表組織。（2）本病傳播迅速，常突然發(fā)病，病貓的臨床表現(xiàn)多種多樣。病貓或者呈亞臨床表現(xiàn)，體溫正?；騼H有輕微發(fā)熱而無(wú)任何其他癥狀；或者明顯發(fā)病。仔貓較成年貓癥狀嚴(yán)重。斷乳仔貓或易感成年貓感染FHV-1后均表現(xiàn)出典型癥狀，病貓?bào)w溫升高，達(dá)40℃左右，精神沉郁，食欲減少，呈明顯的上部呼吸道感染癥。不時(shí)打噴嚏，眼鼻分泌物增多、流眼淚，鼻分泌物增多、發(fā)熱和厭食等。同時(shí)出現(xiàn)鼻卡他性炎癥和結(jié)膜炎，繼之精神沉郁，食欲減退。鼻液和眼淚初期透明，病勢(shì)嚴(yán)重后即變?yōu)檎骋耗撔?。由于分泌物刺激，眼、鼻周圍的被毛常脫落。舌及硬腭出現(xiàn)潰瘍的貓，因口腔劇痛，可致過(guò)度流涎。由于感染貓免疫能力不同，病程長(zhǎng)短不一，一般在數(shù)周內(nèi)得以控制和恢復(fù)?；疾∽胸埣s半數(shù)死亡，如合并細(xì)菌感染，死亡率更高。臨床癥狀經(jīng)一周后逐漸緩和并痊愈。部分患貓可轉(zhuǎn)為慢性，出現(xiàn)咳嗽、鼻竇炎和呼吸困難等癥狀。極少有下呼吸道或肺感染的報(bào)道，即使發(fā)生也是繼發(fā)細(xì)菌感染的結(jié)果。（3）皰疹性角膜炎為FHV-1感染的示病性癥狀。典型損害是出現(xiàn)普遍嚴(yán)重的樹(shù)枝狀潰瘍。繼發(fā)細(xì)菌感染時(shí)可致潰瘍加深，甚至角膜穿孔。潰瘍修復(fù)過(guò)程中，結(jié)締組織形成，甚至可導(dǎo)致角膜和結(jié)膜粘連。感染進(jìn)一步擴(kuò)散，導(dǎo)致全眼球炎，造成永久性失明。局部使用皮質(zhì)類固醇時(shí)，可致角膜剝離[13]。（4）急性感染FHV-1臨床治愈的貓大部分轉(zhuǎn)為慢性帶毒者，再次感染FHV-1時(shí)，表現(xiàn)為間歇性角膜結(jié)膜炎或輕微鼻炎。慢性帶毒者一般不表現(xiàn)癥狀，難于鑒別，在應(yīng)激或使用皮質(zhì)類固醇藥物時(shí)發(fā)生間歇排毒。個(gè)別病貓可發(fā)生病毒血癥，導(dǎo)致全身組織感染。生殖系統(tǒng)感染FHV-1時(shí)，可致陰道炎和子宮頸炎，并發(fā)生短期不孕。孕貓感染FHV-1時(shí)，缺乏典型的上呼吸道癥狀，但可能造成死胎或流產(chǎn)，即使順利生產(chǎn)，幼仔多伴有嗜睡，呼吸道癥狀，體格衰弱，極易死亡。

4 病理變化

病變主要在呼吸道。初期，算腔和鼻甲骨黏膜呈彌漫性充血、潰瘍甚至扭曲變形。喉頭和氣管也呈現(xiàn)類似變化。數(shù)日后在鼻腔和鼻甲骨黏膜出現(xiàn)壞死灶甚至溶骨性病變。扁桃體和頸部淋巴結(jié)腫大，散在不等數(shù)量的出血點(diǎn)。慢除病例可見(jiàn)鼻竇炎[13]。感染后2～5d，典型核內(nèi)包涵體即出現(xiàn)于呼吸道黏膜細(xì)胞，其中以鼻中隔，鼻甲骨和扁桃體黏膜細(xì)胞中的包涵體最多。

5 診斷

由于上呼吸道感染可由杯狀病毒、衣原體、支原體等多種病原引起，因此，單憑上呼吸道癥狀很難對(duì)FHV-1感染確診。但角膜炎和角膜潰瘍具有一定的示病特征。

5.1 病原學(xué)診斷 病毒分離分離病毒是最準(zhǔn)確可靠的診斷方法。病毒能在病貓鼻咽部黏膜和結(jié)膜持續(xù)存在30d以上，是采取檢樣最理想的部位。出現(xiàn)臨床癥狀9d后，在肝、肺、脾、腎等實(shí)質(zhì)臟器內(nèi)也能檢出病毒。最容易分離病毒的檢樣是鼻咽部和結(jié)膜拭子，將其置入含高濃度抗菌素的營(yíng)養(yǎng)液內(nèi)經(jīng)擠壓后取出，將混懸液于4℃感作2一4h后，接種貓?zhí)ツI原代或繼代細(xì)飽培養(yǎng)物，37℃吸附2h.更換新維持液后后置于37 C培養(yǎng)，逐日觀察有無(wú)細(xì)胞病變出現(xiàn)直至一周。無(wú)細(xì)胞病變時(shí)，應(yīng)連續(xù)傳代二代用已知的貓鼻氣管炎病毒免疫血清，對(duì)新分離病毒作中和試驗(yàn)，即可達(dá)到鑒定病毒的日的。有報(bào)道激素處理可以提高病毒的檢出率[14]。

5.2 血清學(xué)診斷 對(duì)結(jié)膜、鼻黏膜刮片或活檢組織片進(jìn)行組織學(xué)或免疫熒光檢測(cè)，可發(fā)現(xiàn)典型的核內(nèi)皰疹病毒包涵體確診。應(yīng)用中和試驗(yàn)檢測(cè)病貓急性期和恢復(fù)后雙份血清的中和抗體效價(jià)，具有回顧性診斷意義，多數(shù)病貓?jiān)诟腥竞?周抗休效價(jià)最高，隨后迅速下降。

5.3 分子生物學(xué)診斷 應(yīng)用PCR檢測(cè)急性和慢性FHV-1感染，也有較高的特異性和敏感性。

6 防治

（1）FHV-1的預(yù)防除了合理的管理、消毒和對(duì)病貓的適當(dāng)隔離等預(yù)防措施外，對(duì)易感貓進(jìn)行免疫是最重要的預(yù)防方法。FHV-1疫苗不能完全阻止病毒感染，但可以防止疾病發(fā)生，減少病毒排出[15]?，F(xiàn)階段所使用的疫苗主要包括活疫苗和滅活苗兩類。滅活疫苗需同時(shí)使用佐劑。仔貓一般在斷乳期接種，免疫2次，間隔3～4周。免疫效果一般可維持4～5年。但對(duì)群居貓或受FHV-1感染威脅的貓，再次免疫間隔需要適當(dāng)縮短。（2）國(guó)內(nèi)外已有弱毒疫苗供應(yīng)，可以單獨(dú)使用也可與貓杯狀病毒結(jié)合成二聯(lián)苗，或與貓泛自細(xì)胞減少癥病毒、貓肺炎衣原體結(jié)合成多聯(lián)苗使用。一般進(jìn)行肌肉注射，幼貓注射兩次，間隔3周，成貓每年注射1次。（3）本病的治療常采用抗菌藥物，防止繼發(fā)性感染，并配合對(duì)癥治療。對(duì)患貓眼、鼻的周圍應(yīng)經(jīng)常擦拭，避免分泌物刺激。對(duì)眼分泌物較多的貓，可使用氯霉素、氧四環(huán)素或氯四環(huán)素眼膏，但應(yīng)避免使用皮質(zhì)類固醇。局部噴霧可軟化分泌物，避免結(jié)痂，便于清除。鼻部黏膜嚴(yán)重充血時(shí)，可短期使用收斂藥物，以改善通氣。（4）當(dāng)出現(xiàn)皰疹性角膜炎時(shí)，需使用抗皰疹的藥物如皰疹凈等，4～6次/d。口服重組人α－干擾素或貓干擾素可作為輔助的抗病毒治療措施。（5）繼發(fā)的慢性鼻竇炎治療比較困難，但在抗生素治療后會(huì)有所緩解，停藥后極易復(fù)發(fā)。癥狀嚴(yán)重時(shí)，可結(jié)合使用抗生素和收斂藥物，減少充血，緩解癥狀。大多數(shù)貓，慢性鼻竇炎一旦發(fā)生，將伴其一生，完全恢復(fù)，幾近無(wú)望。（6）對(duì)不能飲食的貓，需及時(shí)靜脈補(bǔ)液，以維持水代謝平衡，并使眼、鼻分泌物不致過(guò)于粘稠。應(yīng)給病貓?zhí)峁┛煽谒绍浀氖澄?。厭?d以上的病貓，應(yīng)強(qiáng)迫進(jìn)食，給予營(yíng)養(yǎng)支持。

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