張曉杰，李玉俠，盧志勇

（哈爾濱遠(yuǎn)大牧業(yè)有限公司，哈爾濱 150060）

抗菌肽具有抗菌譜廣、不易產(chǎn)生耐藥性、提高動(dòng)物機(jī)體自身免疫功能的優(yōu)勢(shì)[1-3]。目前世界上已知的抗菌肽＞1 700種，并且不斷有新發(fā)現(xiàn)的抗菌肽被補(bǔ)充到抗菌肽數(shù)據(jù)庫(kù)中，抗菌肽由天然來(lái)源的抗菌肽、化學(xué)合成的抗菌肽、基因工程來(lái)源的抗菌肽3部分組成，由于基因工程技術(shù)在抗菌肽產(chǎn)業(yè)化中的實(shí)際應(yīng)用，才能實(shí)現(xiàn)抗菌肽低成本生產(chǎn)和在飼料領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用[4-6]。本試驗(yàn)考查不同類型抗菌肽在仔豬上的應(yīng)用效果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

A型抗菌肽：天蠶素抗菌肽；B型抗菌肽：復(fù)合型抗菌肽。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用33日齡、體重約為（9.23±0.71）kg的斷奶仔豬90頭，隨機(jī)分配到3個(gè)處理組，公母各半，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭豬。

1.3 試驗(yàn)飼糧

基礎(chǔ)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平參考NRC（1998）10～20 kg仔豬營(yíng)養(yǎng)需要配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在哈爾濱遠(yuǎn)大種豬場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)前豬舍清洗消毒。按照仔豬常規(guī)管理辦法進(jìn)行管理，試驗(yàn)共進(jìn)行17 d，每日飼喂4次，自由采食，自由飲水，觀察并記錄仔豬拉稀、采食等生長(zhǎng)發(fā)育狀況。

1.5 樣品采集及前處理

料樣及糞樣的采集，采集全價(jià)飼料樣品；收集全期的糞樣，每天8:30采集糞樣，加入H2SO410%，并作好記錄，-20℃保存[7]。

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

平均日增重：于試驗(yàn)開始前和第17天8:00空腹進(jìn)行單個(gè)逐一稱重，記錄體重?cái)?shù)據(jù)，計(jì)算平均日增重。

平均日采食量：每天記錄各圈仔豬的飼糧供給量、損耗量和余料量，計(jì)算每天的實(shí)際采食量，以周耗料量來(lái)計(jì)算仔豬的平均日采食量。

料肉比（F/G）的計(jì)算公式見式1。

腹瀉率：試驗(yàn)進(jìn)行期間，每天9:00～10:00及15:00～16:00觀察仔豬排糞情況（糞便顏色、形狀等），記錄腹瀉個(gè)體數(shù)并評(píng)分，具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表3。腹瀉指數(shù)計(jì)算公式見式3。

表3 腹瀉狀況評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS Statistics 17.0軟件檢驗(yàn)，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

不同抗菌肽對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能和腹瀉指數(shù)的影響見表4。

由表4可知，處理1和2組仔豬平均日增重和日采食量與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05），飼料料肉比顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；蛋白質(zhì)表觀消化率與對(duì)照組比較不存在顯著差異（P＞0.05），但處理組的表觀消化率都高于對(duì)照組。由表4可知，處理1和2組仔豬腹瀉指數(shù)顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

表4 不同抗菌肽對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能和腹瀉指數(shù)的影響

3 討論

保育仔豬生產(chǎn)是養(yǎng)豬生產(chǎn)的重要組成部分，是仔豬生長(zhǎng)過程中的最重要時(shí)期，也是豬相對(duì)生長(zhǎng)速度最快的階段[8]。因此，搭配合理的營(yíng)養(yǎng)調(diào)控手段對(duì)于保證仔豬正常生長(zhǎng)至關(guān)重要。研究發(fā)現(xiàn)，斷奶期仔豬抵抗力下降、容易發(fā)生腹瀉、生長(zhǎng)性能下降等現(xiàn)象，很可能與抗菌肽表達(dá)的下降有關(guān)，通過外源性添加抗菌肽是提高畜禽防御功能、增強(qiáng)自身免疫力和抗病能力的重要途徑[9]。在飼料中添加外源性的抗菌肽，能夠增加動(dòng)物對(duì)外源性病原菌的抵抗能力[10]。在日糧中添加抗菌肽0.1%、0.3%和0.5%，能夠顯著增加斷奶仔豬平均日增重（P＜0.05），降低料肉比，提高仔豬生產(chǎn)性能[11]。Bechinger等進(jìn)行了抗菌肽體外抑菌試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腸道中大量的致病菌（大腸埃希菌和沙門菌等）被優(yōu)先抑制，尤其Bac7對(duì)兩種病原菌的最低抑菌質(zhì)量濃度為0.25～0.5μmol?？梢?，抗菌肽具有較強(qiáng)的抑菌效果[12]。麻延峰等研究抗菌肽對(duì)30日齡仔豬的呼吸道疾病預(yù)防及治療效果情況，研究結(jié)果表明，飼用抗菌肽添加劑日糧的仔豬能有效的預(yù)防呼吸道疾病，顯著優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05）[13]。豬繁殖與呼吸障礙綜合征（PRRS）是一種由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的疾病，研究表明，抗菌肽DermaseptinS4體外對(duì)PRRSV的直接滅活效果好[14]。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧添加不同種類抗菌肽對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能和腹瀉情況的影響與對(duì)照組相比有顯著性差異，生長(zhǎng)性能顯著增加、腹瀉情況顯著下降?？咕木哂幸种撇【绮《?、改善仔豬生產(chǎn)性能的作用。目前應(yīng)用的抗菌肽雖然種類很多，但其作用機(jī)制的側(cè)重點(diǎn)大致是相同的，都是破壞細(xì)菌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，其作用功效是否一致，目前還未取得一致結(jié)論。

[1] 岳俊伊,張健.抗菌肽抗結(jié)核作用的研究進(jìn)展[J].重慶醫(yī)學(xué),2010,39（19）:2 673-2 675.

[2] 劉倚帆,徐良,朱海燕,等.抗菌肽與抗生素對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌的體外協(xié)同抗菌效果研究[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2010,22（5）:1 457-1 463.

[3] 陳曉生,劉為民,周慶國(guó),等.飼糧中添加抗菌肽對(duì)肉鴨血清代謝激素及生理生化指標(biāo)的影響[J].獸藥與飼料添加劑,2005,10（2）:4-6.

[4] Li J,Xu C,Zhou W,et al.Anti-infection peptidomics of amphibi?an skin[J].Mol Cell Proteomics,2007,6（5）:882-894.

[5] 劉誠(chéng),黎滿香,盧帥,等.抗菌肽研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2011,32（3）:94-99.

[6] 曹琦,黎滿香,劉珂,等.新型抗菌肽Hadrurin基因的克隆與表達(dá)[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2009,30（4）:43-46.

[7] 馬文鋒,焦喜蘭,李振田,等.抗菌肽替代氧化鋅對(duì)仔豬生產(chǎn)性能及血清豬瘟抗體水平的影響[J].中國(guó)飼料,2011（19）:22-23.

[8]Walsh M C,Sholly D M,Hinson R B,et al.Effects of acid LAC and KemGest acid blends on growth performance and microbial shedding in weanling pigs[J].Anim Sci,2007,85（2）:459-467.

[9] 趙玉蓉,周燦,范志勇,等.斷奶及日齡對(duì)仔豬骨髓組織抗菌肽Protegrin-l mRNA表達(dá)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2007,19（5）:605-609.

[10] Chen X,Zhu F,Cao Y,et al.Novel expression vector for secretion of cecropin AD in bacillus subtilis with enhanced antimicrobial ac?tivity[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy,2009,53（9）:3 683-3 689.

[11] 劉丁健,曾其恒,李秀寶,等.復(fù)合抗菌肽制劑對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能和健康水平的影響[J].養(yǎng)豬,2011（1）:15-16.

[12] Bechinger B.Structure and functions of channelforming peptides:magainins,cecropins,melittin and alamethicin[J].Journal of Mem?brane Biology,1997,156（3）:197-211.

[13] 麻延峰,周文仙,應(yīng)志銳,等.抗菌肽防治金華豬呼吸道疾病綜合癥的療效研究[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào),2010,31（1）:90-92.

[14] 曹云飛,王曙陽(yáng),梁劍平,等.抗菌肽Dermaseptin S4體外抑制豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒的活性[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2011,27（1）:100-104.