蔡良水

（武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司,湖北武漢430070）

豬圓環(huán)病毒分為Ⅰ型和Ⅱ型。PCV1無(wú)致病性，而豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCV2）卻具有致病性，能引起豬表現(xiàn)多種臨床癥狀。PCV2是引起仔豬斷奶多系統(tǒng)衰竭綜合征的主要病原。自1991年在加拿大豬群中暴發(fā)以來(lái)，PMWS已經(jīng)波及全球，給全世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。PCV2還與增生性壞死性肺炎、母豬繁殖障礙、豬皮炎與腎病綜合征和豬呼吸道疾病綜合征相關(guān)。PCV2感染性疾病引起的死亡率增高、飼料報(bào)酬降低，加上我國(guó)規(guī)模化主場(chǎng)飼養(yǎng)管理水平相對(duì)較為落后，所以PCV2及其疫苗成為最近幾年國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)。

1 豬圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)

在我國(guó)雖然近幾年來(lái)才對(duì)豬圓環(huán)病毒引起重視，但是，對(duì)于豬血清中PCV2抗體所作血清學(xué)研究表明PCV2抗體至少?gòu)?969年起就已經(jīng)存在于豬群中了?，F(xiàn)已證明，圓環(huán)病毒病在規(guī)?；i場(chǎng)中流行廣泛，血清學(xué)調(diào)查表明，在德國(guó)、加拿大、英國(guó)和愛(ài)爾蘭，豬血清抗體陽(yáng)性率分別高達(dá)95%、55%、86%和92%，豬Ⅱ型圓環(huán)病毒病的死亡率約為10%～30%不等。較嚴(yán)重的地區(qū)，豬場(chǎng)在暴發(fā)本病時(shí)死亡率高達(dá)40%左右。在我國(guó)黑龍江省、浙江省、上海市、福建省、湖南省、云南省的血清學(xué)調(diào)查表明，豬血滑抗體陽(yáng)性率分別高達(dá)63.59%、58.31%、79.7%、63.6%、62.29%、29%。 并在檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)PCV2陽(yáng)性率與豬繁殖與呼吸綜合征陽(yáng)性率有一定的相關(guān)性,PCV2感染豬群的免疫功能受到損害，導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，易受其他病原的并發(fā)或繼發(fā)感染，使病情加重導(dǎo)致死亡。PCV2與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬偽狂犬病毒等病原有協(xié)同感染。

2 臨床癥狀

PCV2感染豬后主要可以引起以下5種疾?。?/p>

2.1 斷奶豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）

主要發(fā)生在哺乳期和保育期仔豬，影響6～8周齡的豬，很少影響吮乳的豬。一般斷奶后2～3天開(kāi)始發(fā)病，急性發(fā)病豬群中，發(fā)病率4%～25%，病死率高達(dá)90%以上，豬感染后主要表現(xiàn)為漸進(jìn)性消瘦，生長(zhǎng)遲緩，采食量下降，被毛粗亂，有的豬出現(xiàn)貧血、體重減輕，皮膚與可視黏膜蒼白或黃疸，有相當(dāng)一部分豬只出現(xiàn)呼吸困難、喘氣，呈腹式呼吸，少數(shù)豬只出現(xiàn)拉稀癥狀，由于細(xì)菌、病毒的二重感染，常常使PMWS的癥狀復(fù)雜化、嚴(yán)重化。臨床上約有20%的病豬呈現(xiàn)貧血與黃疸癥狀，具有診斷意義。剖檢病變：全身淋巴結(jié)異常腫脹，切片均勻的白凈，肺臟腫脹，堅(jiān)硬似橡皮樣，肝臟發(fā)暗，肝小葉間結(jié)締組織增生。

2.2 豬皮炎和腎病綜合征（PDNS）

發(fā)病率為0.5%～2%，有時(shí)可達(dá)7%。病豬表現(xiàn)為厭食、呆滯、蒼白、發(fā)熱、結(jié)膜炎，呼吸困難、腹瀉，消瘦。剖解病變?yōu)槟I臟腫大、蒼白、有病灶，成斑瀾狀，有時(shí)出血和水腫，淋巴結(jié)顯著腫大，腹水、胸腔、腹瀉、心包積液、黏膜，漿膜而出血，肺水腫或呈橡皮樣，有時(shí)皮下水腫、結(jié)腸、腸系膜水腫。特征性癥狀是會(huì)陰部、四肢、胸腹部及耳朵等處的皮膚上出現(xiàn)圓形或不規(guī)則形的紅紫色病變斑點(diǎn)或斑塊，有時(shí)這些斑塊相互融合成條帶狀，不易消失。

2.3 繁殖障礙

發(fā)病母豬主要表現(xiàn)為體溫升高達(dá)41℃～42℃，食欲減退，感染母豬發(fā)生流產(chǎn)、死產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎，母豬的返情率增加，仔豬斷奶前死亡率上升，斷奶后母豬發(fā)情延遲，在死產(chǎn)和新生仔豬出現(xiàn)非化膿性、壞死性或纖維性心肌炎。此外，在公豬精液中也分離到豬II型圓環(huán)病毒。

2.4 豬間質(zhì)性肺炎

發(fā)生PMWS的仔豬有呼吸困難、肺炎癥狀，多見(jiàn)于保育期和育肥期的豬，PCV2與豬肺炎霉形體、豬流感病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、多殺性巴氏桿菌等發(fā)生協(xié)同感染，咳嗽、流鼻汁、呼吸加快、精神沉郁、食欲不振、生長(zhǎng)緩慢。

2.5 先天性震顫

其震顫為從輕度到重度。在出生后第一周，嚴(yán)重的震顫可因不能吃奶而死亡，活一周的仔豬可以存活下來(lái)，但多數(shù)在3周時(shí)間恢復(fù)。震顫為雙側(cè)，影響骨骼肌肉，當(dāng)臥下或睡覺(jué)時(shí)震顫消失，外界刺激可引發(fā)或加重震顫，如聲音或溫度刺激；有的在整個(gè)生長(zhǎng)和發(fā)育期間都不斷發(fā)生震顫。主要是母豬在懷孕階段感染了病毒。PCV2病毒通過(guò)胎盤感染胎兒的可能性很小，或者感染發(fā)生在胎兒免疫功能形成以前。

3 PCV2的防控措施

實(shí)驗(yàn)獸醫(yī)生物安全措施：防止PCV2和使其感染惡化的二重因子，特別是細(xì)茵、支原體及其他病毒侵入豬群。認(rèn)真地對(duì)待引種工作，引種不慎往往是暴發(fā)疫情的主要原因。引進(jìn)的后備母豬應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫，所購(gòu)買的種公豬、精液必須無(wú)PCV2感染。

改進(jìn)飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激，合理配制日糧。注意通風(fēng)與保暖，保持豬舍干燥，改善豬舍的空氣質(zhì)量，降低氨氣濃度。去勢(shì)和注射須遵循良好的衛(wèi)生和消毒習(xí)慣，PCV2是沒(méi)有囊膜的DNA病毒，和環(huán)病毒科的其他病毒一樣，對(duì)理化因素也有較強(qiáng)的抵抗能力，豬場(chǎng)應(yīng)定期使用有效的消毒劑進(jìn)行消毒。生產(chǎn)中應(yīng)用3%的火堿溶液、0.3%的過(guò)氧乙酸溶液及0.5%的強(qiáng)力消毒靈和抗毒威消毒效果良好。

在豬場(chǎng)內(nèi)禁養(yǎng)貓、犬，定期驅(qū)蚊蠅、投餌滅鼠。搞好種豬群的凈化，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)。定期監(jiān)測(cè)，合理制訂免疫程序，避免過(guò)早或過(guò)多地對(duì)仔豬免疫，減少各種應(yīng)激因素對(duì)仔豬的影響。

4 PCV2疫苗研究現(xiàn)狀

采用PCV2對(duì)豬群進(jìn)行疫苗接種，是目前控制本病最有效的方法。

4.1 滅活苗

可用于經(jīng)產(chǎn)母豬和初產(chǎn)母豬的滅活PCV2疫苗，現(xiàn)在已經(jīng)在商業(yè)上應(yīng)用，其中含有免疫佐劑，并且在一些歐洲國(guó)家獲得應(yīng)用許可。該疫苗對(duì)PMWS的防控效果十分顯著。在國(guó)內(nèi)已經(jīng)有相應(yīng)的進(jìn)口和國(guó)產(chǎn)商品化PCV2滅活疫苗，且在實(shí)際應(yīng)用中效果不錯(cuò)。

4.2 弱毒苗

FenauxM等學(xué)者將分離到的一株P(guān)CV2在PK15上連續(xù)傳代數(shù)次，發(fā)現(xiàn)傳代至第120代的病毒對(duì)于豬的致病性明顯低于原分離株，表明體外傳代可增強(qiáng)PCV2在細(xì)胞中的增殖能力，弱化其致病性，這為研制PCV2疫苗提供了一個(gè)新的思路。

4.3 核酸疫苗

KamstrupS等克隆了PCV2的ORF2基因，并證實(shí)了此質(zhì)粒能夠在體外(通過(guò)直接表達(dá)蛋白)以及體內(nèi)(通過(guò)對(duì)小鼠用基因槍注射質(zhì)粒，誘導(dǎo)小鼠免疫產(chǎn)生抗體)進(jìn)行表達(dá)。免疫試驗(yàn)結(jié)果表明，所構(gòu)建的核酸疫苗均能誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生一定的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)。

4.4 亞單位疫苗

ZhouJY等首次在大腸埃希菌中對(duì)缺失了核定位信號(hào)序列(NLS)的PCV2Cap蛋白(dCap)與谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)進(jìn)行了融合表達(dá)，獲得了rGSTdCap蛋白，用rdCap蛋白制備的單抗，可與感染PK15細(xì)胞的病毒粒子以及在PK15細(xì)胞中表達(dá)的Cap蛋白發(fā)生反應(yīng)，同時(shí)表現(xiàn)對(duì)PCV2病毒粒子的中和活性。表明rGSTdCap蛋白可以作為潛在的疫苗抗原和血清學(xué)診斷試劑。

4.5 嵌合疫苗

FenauxM等應(yīng)用基因工程方法，構(gòu)建了PCV1和PCV2相互嵌合的感染性克隆，對(duì)其免疫原性和致病性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)將PCV2的ORF2基因克隆進(jìn)PCV1基因組中，對(duì)豬的致病性小于PCV2基因組，并可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生PCV2核衣殼蛋白抗體，但是對(duì)豬的免疫反應(yīng)性很弱。隨后的試驗(yàn)表明，該減毒的PCV12嵌合感染性克隆可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫保護(hù)，抵抗PCV2野毒株的攻擊。用PCV12免疫后，攻毒豬的病毒血癥發(fā)生率、淋巴結(jié)腫大、淋巴結(jié)中PCV2基因組拷貝量、PCV2抗原量、淋巴組織的病變等方面均顯著低于非免疫豬，表明減毒的PCV12嵌合子可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)PCV2的保護(hù)性免疫反應(yīng)，有望作為疫苗使用。

4.6 活載體疫苗

JuC等用減毒的偽狂犬病病毒(PRV)作為活病毒載體，構(gòu)建了表達(dá)PCV2ORF1ORF2的重組病毒PRV-PCV2。試驗(yàn)表明，PRV-PCV2可誘導(dǎo)小鼠和豬產(chǎn)生強(qiáng)烈的抗PCV2和PRV抗體反應(yīng)，在小鼠中產(chǎn)生針對(duì)PRV的免疫保護(hù)，可抵抗致死量的PRVEa株的攻擊，表明PRVPCV2可用于抵抗PCV2和PRV感染。WangXW等用表達(dá)PCV2 ORF2的重組腺病毒免疫小鼠，結(jié)果表明，所構(gòu)建的重組腺病毒能夠表達(dá)ORF2蛋白，能夠在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)抗PCV2免疫反應(yīng)，對(duì)有效預(yù)防PCV2相關(guān)疾病的感染，重組腺病毒可能是一個(gè)比較理想的載體。