許合金，馮 幼，劉 定，陳子騰，許進(jìn)奉

（湛江東騰飼料有限公司，廣東 湛江 524025）

品種選育、遺傳力提高以及養(yǎng)殖方式的改進(jìn)促進(jìn)了對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模以及產(chǎn)量均得到了極大地提高，使對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)迅速成為我國(guó)漁業(yè)經(jīng)濟(jì)的主要支柱產(chǎn)業(yè)。然而在集約化養(yǎng)殖過(guò)程中，由于高密度、水質(zhì)交換差以及環(huán)境因素不穩(wěn)定等原因?qū)е聦?duì)蝦生長(zhǎng)緩慢且病害頻發(fā)。為提高生長(zhǎng)速度、防治疾病，大量抗生素及其他違禁藥物被廣泛應(yīng)用，從而引起細(xì)菌抗藥性及藥物殘留等問(wèn)題，嚴(yán)重制約了對(duì)蝦產(chǎn)業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展。為解決養(yǎng)殖病害和食品安全等諸多矛盾，尋找新的綠色環(huán)保抗生素替代品成為目前大家關(guān)注的焦點(diǎn)。

益生素由于可通過(guò)改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境，提高養(yǎng)殖動(dòng)物的免疫力，抑制病原微生物，同時(shí)還可提高飼料利用率等特點(diǎn)而引起大家的重視?？莶菅挎邨U菌因具有無(wú)毒副作用、無(wú)殘留污染、不產(chǎn)生耐藥性且可部分替代抗生素等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)，在畜禽養(yǎng)殖方面多有報(bào)道?？莶菅挎邨U菌目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面也被廣泛使用，其中在虹鱒、大馬哈魚(yú)、鯉魚(yú)和斑節(jié)對(duì)蝦等水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖方面都取得了一定效果?？莶菅挎邨U菌添加到對(duì)蝦日糧中，可以提高飼料利用率，改善生產(chǎn)性能，調(diào)節(jié)機(jī)體的腸道機(jī)能、增強(qiáng)免疫機(jī)能等作用。

1 枯草芽孢桿菌特征

芽孢桿菌是人類(lèi)發(fā)現(xiàn)最早的細(xì)菌之一。從生物學(xué)特性來(lái)講，枯草芽孢桿菌具有典型的芽孢桿菌特征，其細(xì)胞呈直桿狀，大小為（0.8～1.2）μm×（1.5～4.0）μm，革蘭氏染色呈陽(yáng)性，著色均勻，可產(chǎn)莢膜、運(yùn)動(dòng)（周生鞭毛）；芽胞中生或近中生，≤細(xì)胞寬，呈橢圓至圓柱狀；菌落粗糙、不透明、擴(kuò)張、污白色或微帶黃色，能液化明膠，胨化牛奶，還原硝酸鹽，水解淀粉，為典型好氧菌[1]。另外，枯草芽孢桿菌還能夠產(chǎn)生蛋白酶、α-淀粉酶、纖維素酶、β-葡聚糖酶、植酸酶、果膠酶和木聚糖酶等，且芽孢桿菌在顆粒料、粉料的加工過(guò)程中以及在通過(guò)酸性和堿性環(huán)境的過(guò)程中具有較高的穩(wěn)定性，在腸道中發(fā)揮作用而不過(guò)度增殖[2]。芽孢桿菌還能利用葡萄糖產(chǎn)酸，pH 2.2～7.0 有較高的存活率，能抵抗多種抗生素，是優(yōu)良的益生菌[3]。

2 枯草芽孢桿菌在對(duì)蝦生產(chǎn)中應(yīng)用

2.1 提高飼料利用率，改善生產(chǎn)性能

王玲等分別在日糧中添加枯草芽孢桿菌600和1200 mg·kg-1，研究其對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能影響，結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌600和1200 mg·kg-1組對(duì)蝦增重率分別較對(duì)照組顯著提高9.08%（P＜0.05）和8.53%（P＜0.05），在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中，枯草芽孢桿菌組對(duì)蝦餌料系數(shù)也均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）[4]。張博等報(bào)道，在日糧中添加枯草芽孢桿菌0.01%和0.03%，凡納濱對(duì)蝦增重率分別較對(duì)照組提高了18.71%（P＜0.05）和9.36%（P＜0.05），同時(shí)特定生長(zhǎng)率也分別較對(duì)照組提高了9.73%（P＜0.05）和5.31%（P＜0.05）[5]。朱學(xué)芝等試驗(yàn)結(jié)果表明，微生態(tài)制劑添加到飼料中或直接添加到水中都能促進(jìn)對(duì)蝦的生長(zhǎng)，降低餌料系數(shù)（P＜0.05），添加到水中比添加到飼料中效果更顯著[6]。

沈文英等研究也證實(shí)，日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.01%和0.05%能夠顯著提高南美白對(duì)蝦增重率（P＜0.05）[7]?？莶菅挎邨U菌的促生長(zhǎng)作用，可能跟消化酶分泌、提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率有關(guān)。於葉兵分別在日糧中添加枯草芽孢桿菌1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 g·kg-1，觀察其對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦消化酶活性影響，結(jié)果顯示，在試驗(yàn)第5 周，芽孢桿菌1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 g·kg-1組對(duì)蝦肝蛋白酶活性分別較對(duì)照組提高12.49%（P＜0.05）、11.08%（P＜0.05）、16.72%、26.79%（P＜0.05）和16.62%（P＜0.05）[8]。丁賢等報(bào)道，在日糧中添加枯草芽孢桿菌可顯著提高凡納濱對(duì)蝦的蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶活性（P＜0.05）[9]。Lin等發(fā)現(xiàn)，在凡納濱對(duì)蝦日糧中添加枯草芽孢桿菌可提高對(duì)蝦對(duì)飼料的消化率[10]。於葉兵在斑節(jié)對(duì)蝦日糧中添加不同劑量的枯草芽孢桿菌，結(jié)果表明，添加枯草芽孢桿菌3.0 g·kg-1能夠顯著提高斑節(jié)對(duì)蝦對(duì)日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、氨基酸和磷的表觀消化率（P＜0.05）[8]。這與張博等研究結(jié)果一致[5]。

2.2 調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡

描述微生物群落多樣性的指數(shù)主要有Shannon指數(shù)、Simpson 指數(shù)和McIntosh 指數(shù)。李卓佳等分析比較了施用枯草芽孢桿菌和沒(méi)有施用任何有益菌的蝦池在養(yǎng)殖后期凡納濱對(duì)蝦腸道微生物菌落的結(jié)構(gòu)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌組對(duì)蝦腸道中可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量較對(duì)照組少，但微生物群落Shannon 指數(shù)、Simpson 指數(shù)和McIntosh 指數(shù)及其微生物群落代謝功能均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）[11]。研究表明，枯草芽孢桿菌能抑制斑節(jié)對(duì)蝦哈維氏弧菌的生長(zhǎng)，降低腸道弧菌數(shù)，顯著提高哈維氏弧菌侵染攻毒后的成活率（P＜0.05）[12-14]。胡毅等研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加枯草芽孢桿菌1 g·kg-1可降低凡納濱對(duì)蝦腸道細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù)，同時(shí)還使對(duì)蝦糞便中細(xì)菌總數(shù)和弧菌總數(shù)分別顯著下降16.69%和19.11%（P＜0.05）[15]。

2.3 增強(qiáng)免疫機(jī)能

栗雄高等研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加枯草芽孢桿菌0.2%，凡納濱對(duì)蝦血清中酚氧化酶、溶菌酶和超氧化物歧化酶分別較對(duì)照組提高39.32%（P＜0.05）、44.54%（P＜0.05）和67.66%（P＜0.05），攻毒試驗(yàn)表明，感染溶藻弧菌后，枯草芽孢桿菌組對(duì)蝦第1、3、4 天的累積死亡率均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），第4 天的免疫保護(hù)率達(dá)到27.1%（P＜0.05）[16]。陸家昌等研究顯示，在水體中使用了枯草芽孢桿菌可使對(duì)蝦堿性磷酸酶、過(guò)氧化物酶、酚氧化酶、超氧化物歧化酶、抗菌和溶菌活力分別較對(duì)照組提高367%、164%、45%、306%、257%和114%[17]。胡毅等在日糧中添加枯草芽孢桿菌1 g·kg-1，觀察其對(duì)凡納濱對(duì)蝦免疫指標(biāo)影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌組對(duì)蝦血清酚氧化酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶和總抗氧化力分別較對(duì)照組提高116.92%（P＜0.05）、30.77%（P＜0.05）、3.21%（P＞0.05）和115.61%（P＜0.05）[15]。與沈文英等研究結(jié)果相一致[7]。朱學(xué)芝等報(bào)道，在凡納濱對(duì)蝦日糧中添加枯草芽孢桿菌可顯著提高對(duì)蝦血清的堿性磷酸酶活力，且降低了溶藻弧菌攻毒后的死亡率（P＜0.05）[18]。

2.4 改善養(yǎng)殖環(huán)境

水質(zhì)的惡化是影響對(duì)蝦存活率和產(chǎn)量的主要障礙。在養(yǎng)殖過(guò)程中尤其是養(yǎng)殖后期產(chǎn)生的殘餌、動(dòng)植物的殘?bào)w及其代謝排泄物累積下來(lái)會(huì)產(chǎn)生許多有毒有害物質(zhì)，滋生大量病原菌，嚴(yán)重影響對(duì)蝦正常生長(zhǎng)?？莶菅挎邨U菌除了可添加在日糧中供對(duì)蝦采食以外，還可直接加入水體，改善蝦池的水環(huán)境。陸家昌等研究了在對(duì)蝦養(yǎng)殖過(guò)程中，不同濃度枯草芽孢桿菌對(duì)養(yǎng)殖水質(zhì)環(huán)境的影響，結(jié)果顯示，枯草芽孢桿菌能顯著降低水體中化學(xué)需氧量（COD）和氨氮（NH3-N）含量（P＜0.05），抑制亞硝酸氮（NO2-N）產(chǎn)生；當(dāng)枯草芽孢桿菌投放濃度為1.25×104cfu·mL-1時(shí)，水體中COD、NH3-N和NO2-N 含量分別較對(duì)照組降低65.30%（P＜0.05）、59.70%（P＜0.05）和88.64%（P＜0.05）[17]。朱學(xué)芝等報(bào)道，使用枯草芽孢桿菌制劑后，蝦池水體中pH、氨氮和亞硝酸鹽含量與對(duì)照組相比有降低的趨勢(shì)（P＞0.05），其中pH和亞硝酸鹽含量在試驗(yàn)后期有顯著性差異（P＜0.05）[6]。通過(guò)對(duì)施用枯草芽孢桿菌制劑后蝦池底泥細(xì)菌群落變化的研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌制劑改變了蝦池底泥細(xì)菌類(lèi)群組成，增加了底泥好養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量，優(yōu)勢(shì)菌屬發(fā)生了變化，黃桿菌屬和粘纖維菌屬數(shù)量增加，而弧菌和發(fā)光細(xì)菌數(shù)量減少[19]。Thimmalapura等報(bào)道，向蝦池中投入枯草芽孢桿菌制劑能夠增加沉積物中好氧菌數(shù)量，抑制弧菌數(shù)量，加快了有機(jī)物的分解，凈化蝦池水環(huán)境，提高了對(duì)蝦產(chǎn)量[20]。

3 小 結(jié)

在對(duì)蝦日糧中添加枯草芽孢桿菌可通過(guò)凈化養(yǎng)殖水質(zhì)環(huán)境，調(diào)解腸道微生態(tài)區(qū)系平衡，提高對(duì)蝦對(duì)飼料的消化能力，保持對(duì)蝦機(jī)體的健康，提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)對(duì)蝦生長(zhǎng)。雖然在對(duì)蝦生產(chǎn)中使用枯草芽孢桿菌在表觀指標(biāo)方面表現(xiàn)出較大的應(yīng)用潛力，但目前有關(guān)枯草芽孢桿菌在對(duì)蝦日糧中的添加方法及適宜添加劑量等方面報(bào)道不一，對(duì)能發(fā)揮功效且符合經(jīng)濟(jì)效益的適宜添加劑量還有待于進(jìn)一步研究。另外，枯草芽孢桿菌作為單一菌種，有其自身的局限性，應(yīng)注意與其他益生菌、中草藥、寡糖及酶制劑等配合使用，做到優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，對(duì)機(jī)體內(nèi)、外微環(huán)境進(jìn)行整體調(diào)節(jié)。

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