阮汝明　張學(xué)寧

[摘要] 目的 了解SLE患者活動(dòng)期與非活動(dòng)期時(shí)抗核抗體（ANA），抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體的滴度的關(guān)系。 方法 用間接免疫熒光法和金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法分別測(cè)定21例活動(dòng)期系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）住院病人及47例非活動(dòng)期SLE病人的抗核抗體（ANA），抗雙鏈DNA（ds-DNA）抗體的滴度。 結(jié)果 活動(dòng)期病人ANA滴度與抗-dsDNA抗體滴度與非活動(dòng)期病人組經(jīng)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），活動(dòng)期病人組兩種抗體平均滴度顯著高于非活動(dòng)期組。 結(jié)論 ANA、抗ds-DNA抗體的滴度會(huì)隨著病情的變化而改變，因而可作為SLE病人活動(dòng)期與非活動(dòng)期判斷指標(biāo)之一。

[關(guān)鍵詞] 抗核抗體；抗雙鏈DNA抗體；紅斑狼瘡

[中圖分類(lèi)號(hào)] R593.24 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2013）01（b）-0021-02

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）有多種自身抗體存在，一般認(rèn)為抗核抗體（ANA），抗ds-DNA抗體對(duì)SLE診斷有著重要的價(jià)值[1]。為進(jìn)一步探討ANA與抗ds-DNA抗體的滴度高低與SLE的活動(dòng)性的關(guān)系，該文報(bào)告了2007年6月—2012年6月21例SLE活動(dòng)期患者與47例SLE非活動(dòng)期患者的ANA與抗ds-DNA抗體的檢測(cè)結(jié)果，探討有關(guān)問(wèn)題如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

21例活動(dòng)期患者，全為女性。47例非活動(dòng)期患者，其中男性患者5例，女性患者42例。全組患者年齡介于12～64歲之間。

1.1.1 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) 所選患者均為確診的SLE患者。其分期標(biāo)準(zhǔn)符合JiangX ，Chen，F(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)[2]，即ANA、抗ds-DNA、ENA三項(xiàng)抗體均為陽(yáng)性，且IgG>16.8 g/L，補(bǔ)體C3，C4 降低的 患者為活動(dòng)期患者。凡有一條不符合以上條件的為非活動(dòng)期患者。

1.2 檢測(cè)方法及操作步驟

1.2.1 ANA的檢測(cè)方法及操作步驟 ①檢測(cè)方法： 用間接免疫熒光法（IIF）檢測(cè)ANA。采用ANA檢測(cè)試劑盒，其每個(gè)反應(yīng)測(cè)試區(qū)都有人上皮細(xì)胞（HEP-2）和靈長(zhǎng)類(lèi)肝冰凍組織切片。②操作步驟：將待測(cè)血清用PBS-T ween緩沖液稀釋為1：100、1：1000等不同稀釋度，然后加樣25 uL于反應(yīng)區(qū)上，在室溫下溫育30 min后，用PBS-T ween緩沖液沖洗并浸泡1 min以上，然后加20uL IgG熒光抗體至反應(yīng)區(qū)上，同前溫育及沖洗。最后滴加甘油-PBS封片，置于熒光顯微鏡下觀察。

1.2.2 抗ds-DNA抗體的檢測(cè)方法及操作步驟 ①檢測(cè)方法：用金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法測(cè)抗ds-DNA抗體。采用抗ds-DNA抗體檢測(cè)試劑盒。②操作步驟：加TBS緩沖液2滴于反應(yīng)區(qū)→加樣品4滴→去除濾蓋→加膠體金標(biāo)記抗體3滴→加 TBS緩沖液1～2滴→觀察結(jié)果[3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行線形分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以（x±s）表示對(duì)SLE活動(dòng)期和非活動(dòng)期抗體的滴度采用標(biāo)本均值t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 ANA滴度與SLE活動(dòng)期和非活動(dòng)期的關(guān)系

21例活動(dòng)期患者均ANA陽(yáng)性，陽(yáng)性率為100%。47例非活動(dòng)期患者ANA陽(yáng)性為27例，陰性20例，陽(yáng)性率為57.4%。兩組比較活動(dòng)期陽(yáng)性率明顯高于非活動(dòng)期（P<0.05），而且活動(dòng)期患者抗體的滴度也明顯高

2.2 抗dsDNA抗體滴度與活動(dòng)期與非活動(dòng)期的關(guān)系

21例活動(dòng)期患者抗ds-DNA抗體陽(yáng)性為21例，陽(yáng)性率為100%。47例非活動(dòng)期患者抗ds-DNA抗體陽(yáng)性為27例，陽(yáng)性率為57.4%。兩組比較活動(dòng)期陽(yáng)性率明顯高于非活動(dòng)期（P<0.05），而且活動(dòng)期患者抗體的滴度也明顯高于非活動(dòng)期患者，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），見(jiàn)表2。

3 討論

ANA是自身對(duì)各種細(xì)胞核成分產(chǎn)生相應(yīng)抗體的總稱(chēng)，常見(jiàn)于SLE，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病和干燥綜合癥等，在SLE中包含有抗糖蛋白抗體、抗脫氧核糖核酸（DNA）抗體和抗鹽水可提取性核抗原（ENA）抗體。目前診斷SLE和觀察SLE病情的常見(jiàn)檢測(cè)為間接免疫熒光法測(cè)定ANA， ANA陽(yáng)性率及陰性率，在活動(dòng)期患者與非活動(dòng)期患者之間有著明顯的差異，且滴度變化也存在明顯的差異[4]。故對(duì)患者ANA及抗ds-DNA滴度的檢測(cè)可估計(jì)SLE患者的病情。但據(jù)謝紅付等的報(bào)道[5]，憑借單純的ANA陰性既不能排除SLE的診斷，也不能否定病情的活動(dòng)性。

抗ds-DNA抗體變化與ANA試驗(yàn)結(jié)果在一些方面存在一致性，但也不完全等同?？筪s-DNA陽(yáng)性患者，ANA也為陽(yáng)性，而抗ds-DNA陰性者，ANA可能為陽(yáng)性[6]。該研究表明，SLE活動(dòng)期組患者的抗體滴度顯著大于非活動(dòng)期組患者，同樣也能用于估計(jì)患者的病情及預(yù)后。而徐世正等的報(bào)道[7]也指出了ANA、抗ds-DNA的消長(zhǎng)同臨床活動(dòng)有著非常密切的聯(lián)系，因而定期檢查患者抗ds-DNA、ANA等，對(duì)于監(jiān)察患者的病情變化，預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)和指導(dǎo)治療，提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 葉任高，陸再英.內(nèi)科學(xué)[M].5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：909-915.

[2] Jiang X，Chen F.Clin Immunol and Immunol pathology[J].American Journd of patndogy，1992.63（1） ：152.

[3] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：655-660.

[4] Maddison PJ， Provost TT， Reichlin M. Serological findings in patients with “ANA-negative”systemic lupus erythematosus[J].Medicine，1981，60（2） ：87-94.

[5] 謝紅付，劉稚然，朱武.抗核抗體對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷與活動(dòng)性的研究[J].湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，22（2）：177-178.

[6] 林海青，龔燕，張紅逵，等.抗核抗體測(cè)定診斷SLE的臨床意義[J]山東醫(yī)藥，1991，31（5）：29-91.

[7] 徐世正，李洪迥，王惠珍.抗雙鏈DNA抗體、抗核抗體的消長(zhǎng)同SLE臨床表現(xiàn)的關(guān)系[J].中華皮膚科雜志，1983，16（3）：138-142.

（收稿日期：2012-08-20）