■ 王鈺飛 丁麗敏 付京杰 王建梅

（1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，北京 100094；2.北京濟海興業(yè)科技開發(fā)有限公司，北京 100096）

藏獒（Tibetan mastiff）是西藏獒犬的簡稱。原產(chǎn)地青藏高原。它能在高寒、低氧、氣候多變的環(huán)境中健康生長。智商高，判斷能力強，記憶力驚人，能對地震、雪崩事先預(yù)料。不僅是高原優(yōu)勢的牧馬放羊犬，也是護領(lǐng)域、護食物、護庭院型的作業(yè)犬，受到海內(nèi)外人士的喜愛。

寵物犬糧中蛋白質(zhì)組成是決定犬糧品質(zhì)的重要因素。蛋白質(zhì)原料分為兩大類：植物性蛋白質(zhì)和動物性蛋白質(zhì)。犬喜食肉類和脂肪，可雜食，接受植物性和動物性飼料。國內(nèi)外許多研究表明單一的植物性蛋白質(zhì)或動物性蛋白質(zhì)日糧沒有兩者混合使用效果好。寵物食品行業(yè)常用的蛋白質(zhì)原料包括肉骨粉、雞肉粉、魚粉和豆粕等。對于不同蛋白質(zhì)原料的選擇在家畜和家禽研究上有較多的報道，但是在犬貓等寵物上的研究較少。寵物食品的適口性會影響寵物犬貓對飼料的選擇。例如，犬更加喜歡甜味日糧相對未添加甜味的空白糧，與人和鼠類相似。目前，歐美等發(fā)達國家對寵物食品的適口性的研究較多，不僅從食物方面對適口性進行研究，而且也擴展到寵物生理學(xué)、行為學(xué)，甚至心理學(xué)上。國內(nèi)對寵物食品適口性的研究才剛剛起步，相關(guān)報道甚少。

本試驗擬通過選取我國寵物食品行業(yè)常用蛋白質(zhì)原料（包含5種動物性蛋白質(zhì)原料和2種植物性蛋白質(zhì)原料）配制動植物蛋白質(zhì)混合日糧，并配制4種不同蛋白質(zhì)水平日糧。比較不同的蛋白質(zhì)原料和不同蛋白質(zhì)水平對藏獒適口性的影響，為合理設(shè)計藏獒日糧配方，降低飼料成本提供理論依據(jù)和科學(xué)參考。

1 試驗材料和方法

1.1 試驗日糧組成和營養(yǎng)水平

試驗日糧參照美國NRC（2006）犬營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)配制，膨化制粒。試驗待測原料均為市場銷售寵物食品生產(chǎn)原料，分別為玉米蛋白粉、豆粕、雞肉粉65、雞肉粉80、豬肉粉80、魚粉65、鴨架粉65。飼料原料化學(xué)組成見表1。試驗日糧于北京濟海興業(yè)科技有限公司加工生產(chǎn)，加工工藝參數(shù)參照公司正常商品犬糧加工參數(shù)，各日糧保持加工擠壓膨化參數(shù)一致。試驗日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表1 飼料原料的化學(xué)組成（%，風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗于北京濟海興業(yè)科技開發(fā)有限公司試驗犬舍進行，試驗動物選取5～6月齡幼年藏獒16只，平均體重(24.13±1.42)kg；分成2個組，每組體重、雌雄盡量保持平衡，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)1只。適口性測定采用國際通用適口性比較測定方法“雙盆法”，試驗設(shè)計8組對比試驗（A1vs.A2；B1vs.B2；B2vs.C2；D2vs.E2；E2vs.F2；G1vs.G2；G2vs.G3；G3vs.G4）來評估幼年藏獒對不同蛋白質(zhì)原料日糧和不同蛋白質(zhì)水平日糧的偏好。試驗過程中每只藏獒單獨飼養(yǎng)在2.7 m×3.5 m的犬舍，舍外有2.6 m×3.3 m活動場，均單欄飼養(yǎng)。每天07:00和18:00定時定量飼喂，每次采食時間30 min，提供日糧總量為NRC(2006)推薦正常能量維持需要量（MJ/d=0.54×BW0.75）采食量的1.2～1.3倍，保證提供日糧滿足試驗犬的每日采食量。每組預(yù)試期2 d，正試期10 d。試驗過程中準(zhǔn)確稱量采食前后每個盆中的日糧重量，記錄每天藏獒每種日糧的采食量，并記錄每只藏獒對每組試驗兩種日糧的首選日糧。每次飼喂前調(diào)整兩個食盆的左右位置,且要保持兩盆之間距離在10 cm左右，使試驗動物能夠隨意選擇兩盆內(nèi)的日糧。記錄首選日糧后迅速離開，確保動物采食期間無人為干涉。自由飲水。

1.3 指標(biāo)測定

采用凱氏定氮法測定飼料原料和試驗日糧中的粗蛋白質(zhì)含量，采用索式提取法測定粗脂肪的含量，采用（105±2）℃烘箱干燥法測定水分含量，干物質(zhì)通過計算w(DM)=1-w(moisture)，采用（550±20）℃烘箱干燥法測定灰分含量，采用高錳酸鉀(KMnO4)仲裁法測定鈣含量，采用鉬黃比色法測定磷含量。

適口性喜好程度依據(jù)日糧的采食率進行評價，采食率為0.5表示兩者沒有偏愛差異，采食率計算公式為：

采食率矯正系數(shù)可以觀察采食率相對無差異0.5的程度，以反映適口性偏愛差異的顯著性。

采食率矯正系數(shù)計算公式為：采食率矯正系數(shù)=采食率-0.5。

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用SAS 9.0統(tǒng)計軟件PROC MEANS過程進行t檢驗，數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”的形式表示，以P＜0.05作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蛋白質(zhì)原料日糧對幼年藏獒適口性的影響（見表3）

表3 幼年藏獒對不同蛋白質(zhì)原料日糧適口性的比較

由表3可知，在動物性蛋白質(zhì)源相同情況下，添加不同的植物性蛋白質(zhì)原料玉米蛋白粉和豆粕，玉米蛋白粉組的采食率（57%）高于豆粕日糧組的采食率（43%），差異不顯著（P＞0.05）。玉米蛋白粉日糧組的采食量、首選日糧也都略高于豆粕組日糧，差異也不顯著（P＞0.05）。在植物性蛋白質(zhì)相同情況下，配制日糧時添加不同動物性蛋白質(zhì)原料，在表3中試驗2結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雞肉粉65組日糧的采食率與魚粉65組差異不顯著（P＞0.05）。從試驗3中可以看出，豬肉粉80的采食量和采食率都明顯高于雞肉粉65組，差異極顯著（P＜0.01），且豬肉粉80組日糧的首選日糧次數(shù)（88%）也明顯高于雞肉粉65組的首選次數(shù)（12%）。試驗4比較了雞肉粉80組日糧和雞肉粉65組日糧適口性差異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)含量較高的雞肉粉80要比雞肉粉65的采食量和采食率極顯著提高（P＜0.01），首選日糧的次數(shù)，雞肉粉80組日糧（74%）也明顯高于雞肉粉65組日糧的首選日糧次數(shù)（26%）。試驗5中比較兩種蛋白質(zhì)含量接近的動物性蛋白質(zhì)原料雞肉粉65和鴨架粉65，結(jié)果顯示兩者采食量和采食率很接近，差異不顯著（P＞0.05），且首選日糧次數(shù)也非常接近。

2.2 不同蛋白質(zhì)水平對幼年藏獒適口性的影響（見表4）

由表4可知，選取不同蛋白質(zhì)水平（19.92%、23.24%、27.90%、34.28%）的日糧進行適口性比較，發(fā)現(xiàn)三組對比試驗均有明顯的差異（P＜0.05）,4個蛋白質(zhì)水平處于中間蛋白質(zhì)水平（27.90%）的日糧G3更容易被幼年藏獒接受。從試驗6可以看出，日糧G1的采食量和采食率都比日糧G2的高（P＜0.01），且首選日糧次數(shù)（66%）也明顯高于對低蛋白質(zhì)水平組（34%）。試驗7中比較蛋白質(zhì)水平為23.24%的日糧G2和蛋白質(zhì)水平含量為27.90%的日糧G3，發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)水平較高的日糧G3要比蛋白質(zhì)水平較低的日糧G2采食量和采食率明顯高，差異極顯著（P＜0.01），且日糧G3首選日糧次數(shù)也高于日糧G2。試驗8日糧G3的采食率比蛋白水平更高的日糧G4(40%)的好，差異顯著（P＜0.05）,日糧G3首選日糧次數(shù)（61%）也明顯高于日糧G4的首選日糧次數(shù)（39%）。

表4 幼年藏獒對不同蛋白質(zhì)水平日糧適口性的比較

3 討論

3.1 不同蛋白質(zhì)原料和蛋白質(zhì)水平對幼年藏獒適口性的影響。

本研究結(jié)果表明在動物性蛋白質(zhì)完全相同的情況下，添加不同植物性蛋白質(zhì)原料玉米蛋白粉和豆粕兩種日糧適口性沒有明顯的差異，從表3試驗1中數(shù)據(jù)對比趨勢可以看出，玉米蛋白粉組日糧的采食量和采食率都要比豆粕日糧組的高（P＞0.05）。但通過兩種日糧比較可知，對幼年藏獒來說玉米蛋白粉的適口性略好于豆粕。Félix等報道添加豆粕的日糧的采食率要比沒有添加豆粕的對照組采食率要高（P＜0.05）,而且添加豆粕組的首選采食次數(shù)也要更多。但是豆粕中含有水蘇糖、棉籽糖和非淀粉性多糖,這些可能限制豆粕在寵物食品中的使用量。玉米蛋白粉作為玉米加工過程中的副產(chǎn)品，與飼料工業(yè)常用的豆粕、魚粉相比，不僅具有資源優(yōu)勢，而且抗?fàn)I養(yǎng)因子少，安全性能好。但關(guān)于玉米蛋白粉在寵物食品上的應(yīng)用研究幾乎很少有報道。本試驗研究表明，在寵物食品中玉米蛋白粉與豆粕的適口性沒有差異，玉米蛋白粉的適口性略好于豆粕。

動物性蛋白質(zhì)原料在寵物行業(yè)應(yīng)用更加廣泛，尤其是雞肉類產(chǎn)品應(yīng)用較為廣泛，是一種很好的蛋白質(zhì)原料，且對犬的適口性很高。如表3試驗2可知，在植物蛋白質(zhì)原料相同情況下，添加動物性蛋白質(zhì)魚粉65和雞肉粉65，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者采食量和采食率沒有明顯差異，這也與Foladar等研究結(jié)果一致，一些魚類蛋白質(zhì)與雞肉粉適口性差異不顯著。而在試驗3和試驗4中選取蛋白質(zhì)含量比雞肉粉65更高的動物性蛋白質(zhì)豬肉粉80和雞肉粉80與雞肉粉65進行適口性比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)較高的豬肉粉80和雞肉粉80采食量和采食率都要比雞肉粉65要高，且差異極顯著（P＜0.01），且首選日糧比例也更高，因此可以看出蛋白含量更高的蛋白質(zhì)原料雞肉粉80比雞肉粉65適口性更好。而且從日糧營養(yǎng)水平上看，豬肉粉80組日糧蛋白水平略高于雞肉粉65組，雞肉粉80組日糧和雞肉粉65組蛋白水平很接近。這可能是由于犬繼承了其野生祖先對高蛋白飲食的喜好，它們通常會選擇高蛋白食物，其中蛋白質(zhì)能提供25%～30%的能量需求。姬真真等研究不同蛋白水平（16.82%、18.32%、19.89%、21.06%）對4～8月齡藏獒生長狀況的影響，發(fā)現(xiàn)高蛋白組日糧采食量和日增重都較高，且生長發(fā)育狀況最好。但是日糧蛋白質(zhì)水平應(yīng)在正常合適的范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)含量很高的犬糧常常被認為對犬有害。而且從表4中可以看出，當(dāng)日糧蛋白質(zhì)水平達到34.28%的日糧G4適口性卻沒有蛋白含量較低的日糧G3（27.90%）適口性好（P＜0.05）。因此可以得出，不同的蛋白質(zhì)水平日糧對幼年藏獒的日糧適口性有較大的影響，蛋白質(zhì)水平在23%～35%之間日糧適口性可能最好，根據(jù)本試驗數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)27.90%蛋白質(zhì)含量更容易被幼年藏獒接受。

動物性蛋白質(zhì)原料不僅為寵物食品提供充足蛋白質(zhì)，還是提供Ca和其他礦物質(zhì)元素的重要原料。從本研究的8組適口性對比試驗可以發(fā)現(xiàn)，兩種日糧進行適口性比較發(fā)現(xiàn)灰分含量較低的一組適口性會更好，即日糧粗灰分含量越低，對幼年藏獒的適口性越好。Aldrich曾報道低灰分的日糧貓更加喜歡，而關(guān)于灰分含量對犬適口性的影響沒看到相應(yīng)的報道。通過本試驗可以總結(jié)出低灰分的日糧對犬的適口性也更好。

3.2 寵物食品適口性的影響因素及評定方法

本研究主要探究不同蛋白質(zhì)原料和蛋白質(zhì)水平對幼年藏獒日糧適口性的影響。寵物食品適口性是決定其品質(zhì)的一個非常重要的指標(biāo)，如果適口性不好，犬不愛吃，營養(yǎng)的全價性就不能體現(xiàn)。影響寵物食品適口性的因素很多，從目前報道和研究的結(jié)果看，除了寵物的自身因素，如寵物的種類、品種、生理特點、行為特征等以外，還與食品本身的特點，如食物的味道、氣味、質(zhì)地、顆粒大小、組成成分、成分來源、物理性質(zhì)等有關(guān)。而且不同的動物種類、同一種動物的不同生長階段及生理狀況，對飼料適口性的要求不同。

測定食物的適口性最大的問題是：食物適口性的組成部分不明確，測定適口性的方法很多，并且測定技術(shù)也在不斷改進。我們不能像在人類食物測試中那樣向動物詢問一些相關(guān)問題，因此我們必須選擇動物行為中的一些可以觀察的行為，并記錄下來。國外研究學(xué)者設(shè)計了很多測試日糧適口性的方法，并且這些方法還在不斷的完善和更新。主要方法有：單日糧法、自由選擇法（偏食性測定法）、操作性條件反射、瘤胃瘺管與食道瘺管假飼法，但被大家廣泛接受的“自由選擇法”，即“雙盆法”，是寵物食物適口性研究的專業(yè)經(jīng)典方法。目前很多關(guān)于適口性的試驗使用這種方法，而且很多人通過這種方法得到了可靠的數(shù)據(jù)。

在雙盆法試驗中，有5個可作為數(shù)據(jù)分析的評估量：平均日采食量、消耗量之差：A-B；采食率（IR）：A/（A+B）或B/（A+B）；采食比（CR)：A/B；首選日糧（FC）:A或B優(yōu)先采食次數(shù)/總次數(shù)。消耗量之差A(yù)-B和采食率（IR）兩者在統(tǒng)計分析上都沒有什么問題。每天每個動物都可以計算得到一個度量值，這個度量值先在不同的天數(shù)之間取平均值，再在不同的動物之間取平均值。使用A/B形式來表達試驗結(jié)果,可是當(dāng)食物B沒有被消耗時，這個值就不能定下來，所獲得的數(shù)據(jù)就得在進行統(tǒng)計分析之前放棄或者更改。另一個問題是單就A/B比值看來，如果動物更喜歡食物A，這一比值的范圍可以從1.0到無窮大，如果動物更喜歡食物B，那么這個比值只局限于0～1.0之間，因此A/B不能明顯地表現(xiàn)出飼料的適口性程度。相比之下，A/(A+B)或B/(A+B)則更直觀、客觀、可靠。所得的值分別在0～0.5或0.5～1.0之間，直接顯示出適口性的好壞程度。其他的評估量雖然是學(xué)界公認要測量的量，但沒有文獻確實的應(yīng)用這些數(shù)據(jù)說明一些問題，只說可以提供額外的信息。在Griffin博士倡導(dǎo)適口性試驗應(yīng)該統(tǒng)一使用一個標(biāo)準(zhǔn)進行分析，同時他也同意IR是5個標(biāo)準(zhǔn)中最適合的，Trivedi等也認為采食率是評價適口性喜好程度的最佳參數(shù)。

本試驗選用雙盆法，并記錄試驗過程中藏獒對每兩種日糧的首選日糧和采食量，計算出采食率。結(jié)果通過分析采食量、采食率和首選日糧進行評定日糧的適口性差異，但在三者數(shù)據(jù)有不一致時，以采食率為準(zhǔn)。從表4試驗8結(jié)果可以看出，不同蛋白質(zhì)水平含量的日糧G3和日糧G4，兩者平均日采食量分別是(332.5±30.9)、(277.5±43.5)g/d，可以看出G3日糧的日采食量略高于G4日糧的日采食量，但是差異不顯著（P=0.278）。G3日糧和G4日糧的平均日采食率分別是60%和40%，差異顯著（P＜0.05）。因此可以得出采食量的差異顯著性不一定和采食率保持一致。同時，通過8對適口性試驗結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，每組日糧中首選日糧比例較高的日糧，該日糧的采食率也較高。這可能與犬具有較強的嗅覺能力有關(guān)，犬的嗅覺系統(tǒng)比人類發(fā)達的多，犬的嗅腦占大腦比例的大小為人的106～108倍，與嗅覺先關(guān)的受體細胞數(shù)達 7.0×108～2.0×109個，所以嗅覺決定犬是否采食某種食物的主要因素。首選日糧（FC）是試驗動物在采食前通過嗅覺感知食物氣味，并做出選擇。因此可以得出首選日糧（FC）和采食率（IR）具有一致性，即首選日糧次數(shù)較多的往往適口性較好。

4 結(jié)論

①不同蛋白質(zhì)原料對幼年藏獒適口性存在差異，植物性蛋白質(zhì)玉米蛋白粉和豆粕差異不顯著(P＞0.05)。動物性蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)含量接近的魚粉65、鴨架粉65和雞肉粉65適口性差異不顯著(P＞0.05)；而蛋白質(zhì)含量較高的雞肉粉80、豬肉粉80都要比雞肉粉65的適口性好，差異極顯著(P＜0.01)。

②不同的蛋白質(zhì)水平日糧對幼年藏獒適口性有影響，蛋白質(zhì)水平在23%～35%日糧適口性對幼年藏獒更好（P＜0.05），蛋白質(zhì)含量為27.90%的日糧比23.24%和34.28%的日糧適口性更好(P＜0.05)。

③日糧的粗灰分含量對幼年藏獒適口也有一定的影響，低灰分的日糧對幼年藏獒適口性更好（P＜0.05）。

（參考文獻21篇，刊略，需者可函索）