■孫合美 吳琦琦 劉巧利 李 丹 谷 巍

(山東寶來利來生物研究院，山東泰安 271000)

近年來，隨著中藥價(jià)格持續(xù)上漲，中藥多糖的成本也隨之上漲；而生物活性多糖能明顯促進(jìn)機(jī)體非特異性免疫和特異性免疫機(jī)能，提高機(jī)體的抗病力和抵抗力；可作為免疫佐劑與疫苗配合使用，顯著提高疫苗保護(hù)力和機(jī)體抵抗力；還能誘生干擾素產(chǎn)生抗病毒、抗腫瘤作用，用于治療病毒性、腫瘤性疾病。生物多糖已經(jīng)成為人們尋找新型保健藥品和藥物的重要資源，有著十分廣闊的應(yīng)用前景。

本研究旨在尋找合適的生物多糖來替代黃芪多糖，以降低養(yǎng)殖成本，緩解黃芪多糖供不應(yīng)求的局面。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

黃芪多糖、海帶多糖、甘露聚糖由山東圣地寶公司生產(chǎn)；

益生素：山東寶來利來生物工程股份有限公司生產(chǎn)，主要含芽孢桿菌、乳酸桿菌≥3×108CFU/g；

肉雞：購自大宇肉雞育苗廠的白羽肉雞AA+；

日糧：六和全價(jià)肉雞飼料510、511。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和飼養(yǎng)管理

將大小比較均勻的1日齡白羽肉雞120只隨機(jī)分為3組，1組為對(duì)照組，其余2個(gè)為試驗(yàn)組，每組2個(gè)重復(fù)，試驗(yàn)分組見表1。

表1 試驗(yàn)處理及分組

1.3 樣本采集及檢測方法

1.3.1 生長性能的測定

分別在14、21、28、35、42日齡早晨空腹稱重，并準(zhǔn)確稱量記錄耗料量、余料量以及損失量，計(jì)算料肉比。

1.3.2 免疫性能測定

① 免疫器官指數(shù)：分別在14、21、28、35、42日齡稱重后處死雞，測定脾臟和法氏囊的濕重，然后計(jì)算脾臟和法氏囊指數(shù)。

② ND抗體效價(jià)：第7、21 d進(jìn)行免疫。采用血凝抑制法測定初免7、14 d，強(qiáng)免后7、14 d，即第14、21、28、35 d新城疫抗體效價(jià)。

③血清免疫球蛋白(IgG)含量、血清總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量的測定：均采用南京建成試劑盒測定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用DPS分析軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan's新復(fù)極差法進(jìn)行比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能測定(見表2)

表2 不同階段各組肉雞的料肉比

由表2可知，14 d時(shí)，黃芪多糖組與甘海益組料肉比均較高，與對(duì)照組相比較差異顯著(P＜0.05)；21 d時(shí)，甘海益組料肉比較高，與黃芪多糖組和對(duì)照組相比均差異顯著(P＜0.05)；而28 d，甘海益組的料肉比較低，與黃芪多糖組和對(duì)照組相比差異顯著(P＜0.05)；35 d，甘海益組料肉比較低，與黃芪多糖組相比差異極顯著(P＜0.01)，與對(duì)照組相比較差異不顯著（P＞0.05）；42 d時(shí)，甘海益組料肉比較低，與對(duì)照組相比差異不顯著，與黃芪多糖組相比差異顯著（P＜0.05）。試驗(yàn)結(jié)果表明，飼喂前期甘海益組和黃芪多糖組料肉比較高，后期甘海益組料肉比降低。

2.2 免疫性能測定

2.2.1 脾臟濕重指數(shù)(見表3)

表3 各組肉雞脾臟指數(shù)的變化(g/kg)

脾臟、法氏囊是雞的重要免疫器官。由表3可知，21 d前，各組肉雞脾臟指數(shù)差異不顯著(P＞0.05)；在28～35 d階段內(nèi)，黃芪多糖組的脾臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。42 d甘海益組脾臟指數(shù)升高，與對(duì)照組和黃芪多糖組相比差異顯著(P＜0.05)。2.2.2 法氏囊濕重指數(shù)(見表4)

表4 各組肉雞法氏囊指數(shù)的變化(g/kg)

由表4可知，法氏囊指數(shù)隨雞日齡增加呈下降趨勢。14 d時(shí)，甘海益組法氏囊指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，與黃芪多糖組相比無顯著差異(P＞0.05)；21～28 d各組無顯著差異(P＞0.05)；35 d甘海益組法氏囊指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，極顯著高于黃芪多糖組(P＜0.01)；42 d甘海益組與對(duì)照組相比差異不顯著，與黃芪多糖組相比差異顯著(P＜0.05)，說明后期甘海益組對(duì)法氏囊指數(shù)具有一定的促進(jìn)作用。

2.2.3 新城疫抗體效價(jià)(見表5)

表5 各組肉雞新城疫抗體效價(jià)

由表5可知，在第14 d時(shí)，黃芪多糖組新城疫抗體效價(jià)較高，與對(duì)照組相比無顯著差異(P＞0.05)，與甘海益組相比差異顯著(P＜0.05)。在21～28 d階段，各組無顯著差異。35 d時(shí)，甘海益組新城疫抗體效價(jià)較高，與對(duì)照組和黃芪多糖組相比較差異顯著(P＜0.05)。在整個(gè)飼喂周期中，甘海益組新城疫抗體效價(jià)平穩(wěn)上升，說明甘海益組可促進(jìn)機(jī)體特異性免疫功能的提升。

2.2.4 雞血清中IgG含量(見表6)

表6 各組肉雞血清IgG的含量(g/l)

IgG的含量可以反映出雞只的非特異性免疫機(jī)能。IgG含量越高，則非特異性免疫機(jī)能越強(qiáng)。由表6可知，14 d甘海益組IgG含量與對(duì)照組和黃芪多糖組相比差異顯著(P＜0.05)；21 d，甘海益組和黃芪多糖組相比差異不顯著(P＞0.05)，與對(duì)照組相比較差異顯著(P＜0.05)；28 d甘海益組IgG含量較高，但組間差異不顯著；35 d各組差異不顯著；42 d甘海益組與黃芪多糖組IgG含量較高，與對(duì)照組相比較差異顯著(P＜0.05)；說明黃芪多糖和甘海益對(duì)免疫球蛋白IgG的生成均有促進(jìn)作用，可增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫功能。

2.2.5 T-AOC血清總抗氧化能力(見表7)

表7 各組肉雞T-AOC血清總抗氧化能力(U/ml)

由表7可知，14～21 d時(shí)，T-AOC的指數(shù)整體呈略下降的趨勢，且兩試驗(yàn)組與空白組相比，差異不顯著。28 d時(shí)空白組略有升高，但各組差異不顯著。35 d時(shí)，甘海益組T-AOC上升幅度較大，抗氧化能力最強(qiáng)，與對(duì)照組和黃芪多糖組相比差異極顯著(P＜0.01)；42 d各組間差異不顯著。

2.2.6 丙二醛（MDA）含量(見表8)

丙二醛是生物體內(nèi)自由基作用于脂質(zhì)，發(fā)生過氧化反應(yīng)產(chǎn)生的氧化終產(chǎn)物，其含量在一定程度上反映機(jī)體受損傷的程度，含量越少，機(jī)體受損傷的程度越小。由表8可知，14～28 d時(shí)，黃芪多糖組和甘海益組MDA含量均較低，與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05)；28 d時(shí)兩試驗(yàn)組與對(duì)照組相比較差異極顯著(P＜0.01)；說明黃芪多糖組和甘海益組均具有極強(qiáng)清除氧自由基的能力；后期甘海益組MDA含量仍低于對(duì)照組，但各組間差異不顯著。隨著雞日齡的增長，機(jī)體自身的抵抗力較強(qiáng)，添加多糖的優(yōu)勢較小。

表8 各組肉雞血清MDA含量(nmol/ml)

3 結(jié)論

①對(duì)生長性能的影響：從肉雞的整個(gè)飼喂周期來看，甘海益組的料肉比低于黃芪多糖組，與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

② 脾臟指數(shù)：28～35 d內(nèi)，黃芪多糖組的脾臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。42 d甘海益組脾臟指數(shù)升高，與對(duì)照組和黃芪多糖組相比差異顯著（P＜0.05），黃芪多糖對(duì)于增強(qiáng)脾臟免疫能力有很好的效果。從法氏囊指數(shù)來看，甘海益組整個(gè)試驗(yàn)周期優(yōu)于黃芪多糖組。綜合兩個(gè)指標(biāo)，甘海益組效果較好。

③養(yǎng)殖前期，黃芪多糖組新城疫抗體效價(jià)較高。35 d后，甘海益組新城疫抗體效價(jià)較高，與對(duì)照組和黃芪多糖組相比差異顯著。在整個(gè)飼喂周期中，甘海益組新城疫抗體效價(jià)平穩(wěn)上升，說明甘海益組可促進(jìn)機(jī)體特異性免疫功能的提升。

④黃芪多糖和甘海益組對(duì)IgG的生成均有促進(jìn)作用，其對(duì)非特異性免疫機(jī)能的影響具有促進(jìn)作用。

⑤ 根據(jù)T-AOC指標(biāo)，14～35 d，甘海益組可較大幅度提高血清總抗氧化能力；35 d后，各試驗(yàn)組的作用效果無顯著差異。

⑥14～35 d黃芪多糖組和甘海益組MDA含量較低，黃芪多糖組和甘海益組均具有較強(qiáng)清除體內(nèi)自由基能力，可有效降低機(jī)體受損傷的程度。

綜合以上結(jié)果，并非飼養(yǎng)周期全程添加黃芪多糖作用效果最好，建議養(yǎng)殖前35 d添加黃芪多糖；而甘海益組在提高機(jī)體免疫整體效果方面優(yōu)于黃芪多糖組，可較好地替代黃芪多糖。