陳玉璽，浦益瓊，張 彤，陶建生，王 冰

(上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海 201203)

藥物體外篩選過(guò)程中，很多難溶性小分子藥物都表現(xiàn)出很高的藥理活性，比如羥基喜樹(shù)堿、人參皂苷、紫杉醇等［1-3］。但由于這類藥物溶解度低，生物利用度不高，或劑型選用不合理等因素限制了此類藥物的臨床使用［4］。結(jié)合需長(zhǎng)期治療的疾病，將難溶性小分子藥物制成微球制劑發(fā)揮其長(zhǎng)效和緩釋作用，是解決此類藥物長(zhǎng)期給藥及提高生物利用度的制劑手段之一。微球(Microspheres)是一種骨架型的骨架微粒，是液體或固體類藥物溶解和(或)分散于高分子材料基質(zhì)中，形成的粒徑通常在1～250μm之間的類球形或球形微粒［5-6］。該劑型可以通過(guò)控制藥物的釋放速率達(dá)到緩控釋的目的;可以通過(guò)控制其粒徑使其具有靶向性，快速達(dá)到靶向區(qū)域所需的藥物濃度，這樣就可以降低藥物給藥劑量，減少藥物對(duì)正常細(xì)胞組織的毒副作用;其制備方法廣泛，適用于水溶性、難溶性藥物，也適用于多肽蛋白類藥物的制備。通過(guò)將難溶性小分子藥物制成微球，使其發(fā)揮控制藥物釋放目的，已成為近年來(lái)開(kāi)發(fā)難溶性小分子藥物緩控釋制劑的研究趨勢(shì)。對(duì)于緩控釋制劑研究來(lái)講，如果能保證制劑中藥物的體外釋放實(shí)驗(yàn)與體內(nèi)吸收實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有較好的相關(guān)性，這樣的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)才有實(shí)際意義［7］。

本文對(duì)難溶性小分子藥物微球的體內(nèi)外釋放及體內(nèi)外相關(guān)性方面的文獻(xiàn)進(jìn)行整理和分析，對(duì)已有期刊論文或?qū)W位論文常用研究方法進(jìn)行了歸納和比較，列舉了在考察難溶性小分子藥物微球釋放和吸收時(shí)常用的實(shí)驗(yàn)方法和條件，希望為該類藥物微球制劑的體內(nèi)外評(píng)價(jià)提供借鑒或參考。

1 難溶性小分子藥物微球體外釋放研究

微球體外釋放試驗(yàn)主要考察在特定條件下微球中藥物釋放的速率，一般分為體外長(zhǎng)期釋放和體外加速釋放試驗(yàn)兩種。

1.1 體外長(zhǎng)期釋放試驗(yàn) 體外長(zhǎng)期釋放試驗(yàn)是在與體內(nèi)生理環(huán)境相似的條件下考察藥物的釋放情況。在《美國(guó)藥典》(USP34-NF29)和《英國(guó)藥典》(BP2010)中緩釋制劑的釋放度檢查項(xiàng)下均收載了流通池法。2000年以后，流通池法多被用于一些特殊劑型如藥物釋放支架、混懸劑、植入劑及微球等研究中，很多著名國(guó)際藥企、藥品研發(fā)機(jī)構(gòu)的QC實(shí)驗(yàn)室經(jīng)開(kāi)始應(yīng)用流通池法進(jìn)行制劑的質(zhì)量控制［8］，該方法操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性好，適合于微球制劑的體外釋放評(píng)價(jià)。目前《中國(guó)藥典》2010年版未明確收載專門用于微球制劑的體外釋放度測(cè)定法，文獻(xiàn)調(diào)研表明，難溶性小分子藥物微球大多采用動(dòng)態(tài)透析法或槳法進(jìn)行體外釋放度測(cè)定。

1.1.1 動(dòng)態(tài)透析法 動(dòng)態(tài)透析法，即稱取適量載藥微球放入已平衡好的透析袋中，然后將其置于釋放介質(zhì)中進(jìn)行振搖，定時(shí)取樣檢測(cè)的一種體外釋放評(píng)價(jià)方法。該方法有利于透析膜內(nèi)外介質(zhì)的交換，避免了釋放度測(cè)定中微球的損失以及介質(zhì)pH的改變［9］。

李像等［10］采用乳化溶劑揮發(fā)法(S/O/W)制備多西紫杉醇聚乳酸羥基乙酸(PLGA)/納米羥基磷灰石(nHA)復(fù)合微球，選用動(dòng)態(tài)透析法考察兩種微球的體外釋放，釋放介質(zhì)為0.1%(W/V)吐溫80的PBS溶液(pH 7.4)，將透析袋置于37℃恒溫水浴振蕩器內(nèi)以80 r/min速度振蕩，定時(shí)取出10 mL釋放液，并補(bǔ)充等量新鮮釋放介質(zhì)，測(cè)定并計(jì)算微球中累積藥物釋放率。結(jié)果表明，微球中的藥物經(jīng)過(guò)體外突釋后，在復(fù)合微球中比在常規(guī)PLGA微球中釋放速度慢，而到達(dá)30 d時(shí)，復(fù)合微球和常規(guī)PLGA微球累積釋放率分別為62.40%和72.70%。李祥等［11］制備脂溶性藥物塞來(lái)昔布的PLGA緩釋微球，并用動(dòng)態(tài)透析法考察其體外釋藥特征，將塞來(lái)昔布微球和釋放介質(zhì)裝入透析袋內(nèi)，扎緊后將其置于含0.02%的疊氮鈉的PBS(pH 7.4)溶液中，(37.0±1.0)℃水浴恒溫，70 r/min攪拌;分別在設(shè)定的時(shí)間點(diǎn)取出1 mL介質(zhì)，同時(shí)立即補(bǔ)加等量新鮮介質(zhì)。結(jié)果表明，微球在1 d內(nèi)無(wú)突釋現(xiàn)象，40 d時(shí)藥物累積釋放69.1%。王海鷗等［12］采用動(dòng)態(tài)透析法考察了姜黃素聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)微球的體外累積釋放度;釋放介質(zhì)為含0.5%SDS-Na的PBS溶液(pH 7.4)，恒溫(37℃)水浴振蕩(70 r/min)，結(jié)果表明，微球71 h體外累積釋藥率為77%，表明微球具有良好的體外緩釋作用。周榮平等［13］采用動(dòng)態(tài)透析法，精密稱取適量微球(含藥約2 mg)，均勻分散于6 mL生理鹽水中，裝入密閉透析袋，置于 100 mL生理鹽水中，在(37.0±0.5)℃，500 r/min條件下振蕩，定時(shí)取出釋放介質(zhì)5 mL，同時(shí)補(bǔ)充新鮮生理鹽水5 mL，進(jìn)行處理檢測(cè)分析，結(jié)果表明:微球在剛開(kāi)始24 h內(nèi)，藥物有突釋現(xiàn)象，利于藥物的快速起效;24 h后藥物大致呈現(xiàn)零級(jí)釋放;釋藥9 d可達(dá)累積藥物釋放量87%。

1.1.2 漿法 漿法具有通用性強(qiáng)、耐用性高、儀器最為普及的特點(diǎn)，2010版《中國(guó)藥典》二部附錄X C有載，建議首選該法進(jìn)行體外釋放研究。

楊亞蘭等［14］采用乳化交聯(lián)固化法制備依托泊苷鼻用殼聚糖微球，槳法測(cè)定其釋放度，以pH7.4磷酸鹽緩沖液(含10%乙醇)250 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速100 r/min，溫度(37±0.5)℃。結(jié)果表明其體外釋藥符合Higuchi模型。趙琳琳等［15］采用縮聚法制備姜黃素殼聚糖微球，采用漿法考察其體外釋放，轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為37℃，溶出介質(zhì)為人工胃液，其中含有30%無(wú)水乙醇、2.0%十二烷基硫酸鈉，結(jié)果顯示微球在第5小時(shí)達(dá)到釋放平衡狀態(tài)，累積釋放率高達(dá)90%以上。郭振勇等［16］利用槳法測(cè)定丙硫異煙胺微球及原料藥的體外釋放性能，精密稱取丙硫異煙胺－PLGA微球適量，置透析袋內(nèi)，緊密封口后混懸于50 mL含0.1%聚山梨酯-80的PBS(pH 7.4)的釋放介質(zhì)中，在(37±1)℃ 恒溫水浴振蕩器上震蕩，取樣后補(bǔ)充新鮮介質(zhì);結(jié)果表明，微球體外釋藥符合 Higuchi方程(Q=4.4303t1/2+7.7241)，釋藥較慢。

1.2 體外加速釋放試驗(yàn) 微球是一種緩釋劑型，藥物從微球中釋藥一般需要數(shù)天、幾個(gè)月甚至1年以上的時(shí)間，采用模擬體內(nèi)條件的釋放實(shí)驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)在實(shí)際操作中具有一定難度，因此用體外加速釋放預(yù)測(cè)微球的釋藥速率，對(duì)微球的質(zhì)量控制具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義［5，17］。

1.2.1 升溫法 蔣朝軍等［18］在研究微球體外加速釋放時(shí)采用對(duì)釋放介質(zhì)升溫的方法來(lái)達(dá)到。實(shí)驗(yàn)顯示利培酮在不同溫度下均呈零級(jí)釋放，當(dāng)溫度從37℃升高到45℃時(shí)，釋放時(shí)間也由15 d加速到了3 d。將45℃加速釋放的0、1、2、3 d累積釋放度與長(zhǎng)期釋放0、5、10、15 d累積釋放度進(jìn)行線性關(guān)系擬合，相關(guān)性良好，即可通過(guò)45℃的加速釋放來(lái)快速評(píng)價(jià)此微球的釋放特性。王辰允［19］在紫杉醇長(zhǎng)效緩釋注射微球的體外釋放度加速測(cè)定中，采用50℃作為加速釋放溫度，同時(shí)振蕩頻率也由100 r/min提高到200 r/min，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明加速釋放與體外常規(guī)釋放的相關(guān)性良好。冼遠(yuǎn)芳等［20］在阿司匹林微球在體外加速釋放實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，載藥量不同的兩種微球37℃與55℃加速條件下釋放均具有良好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為0.99574和0.99338，提示當(dāng)釋放溫度高于聚乳酸玻璃化溫度2～3℃的條件可以加速聚乳酸微球的釋放。王愷源報(bào)道［21］，G2407-5微球在含 0.5%SDS的磷酸鹽緩沖液(pH7.4)中，37℃和55℃的釋放條件下，結(jié)果證明提高溫度可以有效升高G2407-5微球的降解速度，使微球釋放更快，可以很好的完成G2407-5微球在短時(shí)間釋放的目的。

1.2.2 調(diào)整介質(zhì)pH法 符旭東等［22］研究發(fā)現(xiàn)石杉?jí)A甲微球的釋藥速度與釋放介質(zhì)的pH有著密切的關(guān)系;釋藥72 h內(nèi)，釋放介質(zhì)鹽酸濃度在0.1～1 mol/L時(shí)，微球的釋藥速度隨pH降低而降低，當(dāng)鹽酸濃度降低至0.0001～0.01 mol/L時(shí)，釋藥速度則隨氫離子濃度的增加而加快;72 h后微球在0.1～1 mol/L鹽酸中的釋藥速度明顯加快。楊陽(yáng)等［23］為快速評(píng)價(jià)鹽酸噻吩諾啡的釋藥特性，在加速釋放實(shí)驗(yàn)中采用鹽酸為釋放介質(zhì)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定以0.0001 mol/L的鹽酸(5%乙醇)溶液為加速釋放介質(zhì)，在55℃條件下，加速釋藥與體外長(zhǎng)期釋藥實(shí)驗(yàn)具有良好的相關(guān)性。賀云霞研究發(fā)現(xiàn)［24］，pH值的變化對(duì)雙氯芬酸鈉殼聚糖-海藻酸鈉緩釋微球釋放具有顯著性影響，微球在酸性條件下和水中釋藥速率最慢，8 h累積釋放量不超過(guò)40%;在人工腸液環(huán)境中緩慢釋藥，可達(dá)理想緩釋效果;在pH梯度環(huán)境下，微球初期釋藥較少，當(dāng)pH值升至6.8時(shí)微球釋藥出現(xiàn)突釋，6 h內(nèi)釋藥完全。

2 難溶性小分子藥物微球體內(nèi)釋放

微球制劑中藥物含量一般較低，為檢測(cè)此類制劑體內(nèi)釋藥情況，通常采用以下兩種方法，即體內(nèi)滯留法［5，25］和血藥濃度法［5，26-27］。體內(nèi)滯留法通過(guò)給藥部位微球殘余藥量的測(cè)定來(lái)間接反映藥物體內(nèi)釋放速度，大多選用大鼠、小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，此法較易推廣，但必須具有熟練的解剖技巧及操作技巧。血藥濃度法為測(cè)定腦脊液或血中藥物濃度以評(píng)價(jià)體內(nèi)藥物吸收情況，多選用大鼠、兔、犬等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，此法要求有高精密度的分析儀器及熟練的操作技術(shù)。

2.1 體內(nèi)滯留法 潘峰等［28］采用改良國(guó)外檢測(cè)黃體激素釋放激素的方法，考察O/O法制備的石杉?jí)A甲注射用緩釋微球體內(nèi)釋藥，具體為:將石杉?jí)A甲微球注入大鼠腹部皮下后，定時(shí)取出注射部位的微球和肌肉組織，勻漿處理后測(cè)定藥物殘留量，間接獲取微球的體內(nèi)釋藥速率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，微球釋藥呈三相模式，第一相是藥物首日突釋作用，第二相是藥物緩慢釋放的過(guò)程(1～3 d)，第三相藥物以每日6.7%的釋藥速度按零級(jí)速率(r=0.9978)幾乎釋放全部藥物(3～14 d)。楊陽(yáng)等［29］在研究鹽酸噻吩諾啡緩釋微球體內(nèi)釋藥時(shí)，混懸后于大鼠皮下注射，給藥后定時(shí)剪取注射部位的皮下組織，測(cè)定殘留藥物量，計(jì)算出實(shí)際注射微球在大鼠體內(nèi)的釋藥率。結(jié)果表明其在大鼠體內(nèi)釋藥速率符合Higuchi方程 Q=20.49 t1/2－ 5.87，R2=0.9891。王彥君［30］研究微球粒徑對(duì)白藜蘆醇微球體內(nèi)釋藥情況的影響時(shí)，以小鼠為研究對(duì)象，皮下注射微球后定時(shí)取樣檢測(cè)藥物在體內(nèi)的滯留量，結(jié)果顯示，釋放開(kāi)始4 h，藥物從5μm微球中釋放量(20.36%)與20μm微球中的釋放量(20.08%)相當(dāng);1 d后5μm微球中藥物釋放量(49.13%)明顯快于20μm微球(35.20%);第3天開(kāi)始，5μm微球體內(nèi)釋放量則明顯慢于20μm微球;到第15天，20μm微球釋放量已達(dá)97.25%，而5μm微球僅為75.16%。

2.2 血藥濃度法 王九成等［31］制備包載氟維司群的3種微球，大鼠皮下給予3種不同處方的微球50 mg/kg 1次，利用LC-MS/MS法測(cè)定血藥濃度并計(jì)算主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，結(jié)果顯示，制備的3種微球均具有緩釋作用，從藥物釋放91 d的趨勢(shì)可見(jiàn)，在3種微球制劑載藥量相近的情況下，PLA-block-mPEG(相對(duì)分子質(zhì)量比為40000∶2000)包載藥物的微球半衰期較長(zhǎng)，釋放效果較好。程國(guó)華等［32］制備了漢防己甲素肺靶向聚乳酸(TET-PLA)微球，并采用反相液相色譜法測(cè)定家兔注射微球后的血藥濃度，結(jié)果表明TET-PLA微球在家兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過(guò)程符合二室模型，t1/2β為(286.49±237.55)min，AUC為(810.33±287.49)μg min/mL，該藥在體內(nèi)體現(xiàn)出緩釋效果。

3 體內(nèi)外相關(guān)性評(píng)價(jià)

按照2010年版《中國(guó)藥典》二部中“緩控釋制劑指導(dǎo)原則”中“只有當(dāng)體內(nèi)外具有相關(guān)性，才能通過(guò)體外釋放曲線預(yù)測(cè)體內(nèi)的情況”，指導(dǎo)原則將體內(nèi)外相關(guān)性歸納為三種:①體外釋放曲線與體內(nèi)釋放曲線(即由血藥濃度數(shù)據(jù)去卷積而得到的曲線)上對(duì)應(yīng)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別相關(guān)，這種相關(guān)簡(jiǎn)稱為點(diǎn)對(duì)點(diǎn)相關(guān)，表明兩條曲線可以重合;②應(yīng)用統(tǒng)計(jì)矩分析原理建立體外釋放的平均時(shí)間與體內(nèi)平均滯留時(shí)間之間相關(guān)，由于能產(chǎn)生相似的平均滯留時(shí)間可有很多不同的體內(nèi)曲線，因此體內(nèi)平均滯留時(shí)間不能代表體內(nèi)完整的血藥濃度－時(shí)間曲線;③將一個(gè)釋放時(shí)間點(diǎn)(t50%，t90%等)與一個(gè)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)(如AUC，Cmax或tmax)之間單點(diǎn)相關(guān)，但只能說(shuō)明部分相關(guān)［33］。

體內(nèi)外相關(guān)性是指利用數(shù)學(xué)模型來(lái)描述藥物的體外釋放規(guī)律與體內(nèi)特性(藥物吸收量或血藥濃度)之間的關(guān)系［34］。體內(nèi)外相關(guān)程度的高低不僅與體外釋放度和體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)測(cè)定方法有關(guān)，也與采用的數(shù)據(jù)處理及分析方法有關(guān)［35］。難溶性小分子微球體內(nèi)釋放/吸收數(shù)據(jù)處理多選用模型依賴法、反卷積法、統(tǒng)計(jì)矩法，然后再利用線性最小二乘法回歸原理，將同批次微球體外釋放曲線和體內(nèi)釋藥/吸收曲線上對(duì)應(yīng)的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的釋放率和吸收率回歸，判斷其體內(nèi)外相關(guān)程度。

3.1 模型依賴法 在點(diǎn)對(duì)點(diǎn)相關(guān)水平的分析中，體內(nèi)吸收數(shù)據(jù)的處理可以采用模型依賴法，是根據(jù)藥物動(dòng)力學(xué)模型來(lái)計(jì)算，在實(shí)際應(yīng)用時(shí)選擇幾個(gè)時(shí)間段將不同時(shí)間的體內(nèi)參數(shù)吸收分?jǐn)?shù)等對(duì)應(yīng)時(shí)間的體外釋放參數(shù)作圖，建立相關(guān)性，該相關(guān)性水平較高且確定了體外釋放與體內(nèi)吸收之間的直接關(guān)系。對(duì)于在體內(nèi)吸收呈一室模型的藥物，按Wagner-Nelson公式計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的吸收百分率，而對(duì)于雙室模型藥物則可采用簡(jiǎn)化的Loo-Riegelman公式進(jìn)行計(jì)算［35-36］。楊明世等［37］對(duì)尼群地平微球進(jìn)行犬體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)以及體內(nèi)外相關(guān)性的研究，根據(jù)藥物在體內(nèi)的過(guò)程為一室(單室)模型，采用Wagner-Nelson法計(jì)算藥物在犬體內(nèi)的吸收百分?jǐn)?shù)，對(duì)0.5～6 h藥物累積吸收百分?jǐn)?shù)與對(duì)應(yīng)時(shí)間的體外累積釋放百分率(ft)進(jìn)行線性回歸方程擬合，其中當(dāng)釋放介質(zhì)為17.4 mmol/L十二烷基硫酸鈉時(shí)，體外累積釋放百分?jǐn)?shù)與體內(nèi)吸收分?jǐn)?shù)相關(guān)系數(shù)較好(r=0.9851)，方程為Fa=1.6458 ft－27.642。李鳳前等［38］對(duì)靶向漢防己甲素緩釋制劑進(jìn)行體內(nèi)外相關(guān)性評(píng)價(jià)，其中將體外釋藥百分?jǐn)?shù)作為體外指標(biāo)，靶部位的藥效學(xué)指標(biāo)作為體內(nèi)釋藥指標(biāo)，將漢防己甲素緩釋制劑在1、5、10、20、30、60 min時(shí)藥物的體外釋放百分?jǐn)?shù)對(duì)平均肺動(dòng)脈壓力下降百分?jǐn)?shù)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果表明其相關(guān)性良好(r=0.9707)。王津等［39］對(duì)布洛芬微球進(jìn)行體內(nèi)外相關(guān)性評(píng)價(jià)，體外實(shí)驗(yàn)顯示布洛芬的釋藥行為符合Higuchi方程，在大鼠體內(nèi)的釋藥情況與單室模型擬合程度較高，同時(shí)對(duì)體外累積釋放度(X)和體內(nèi)吸收百分率(F)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為F=1.5481X+5.1587(r=0.9887)，說(shuō)明體外釋放度與體內(nèi)吸收分?jǐn)?shù)具有良好的相關(guān)性。

3.2 反卷積法 反卷積(Deconvolution)法［40］是一種不依賴室模型而直接根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)得到藥物體內(nèi)動(dòng)態(tài)信息的數(shù)學(xué)計(jì)算方法，尤其適用于隔室模型模擬困難和緩控釋制劑的體內(nèi)外相關(guān)性研究，其擬合結(jié)果準(zhǔn)確可靠。梅康康等［41］研究非諾貝特緩釋微球片的體內(nèi)外相關(guān)性時(shí)，采用了反卷積法，將各時(shí)間點(diǎn)的體內(nèi)吸收百分?jǐn)?shù)與其對(duì)應(yīng)的體外累積釋放百分?jǐn)?shù)進(jìn)行回歸分析，結(jié)果表明體外累積釋放百分?jǐn)?shù)和體內(nèi)吸收百分?jǐn)?shù)相關(guān)性較好(r=0.9225)。朱海燕［42］給家兔肌肉注射單劑量尼群地平聚乳酸微球，給藥后定時(shí)從耳緣靜脈取血，血樣處理后HPLC法測(cè)定，采用反卷積法計(jì)算，結(jié)果尼群地平微球的體內(nèi)累積吸收百分?jǐn)?shù)與其體外累積釋放百分率相關(guān)性顯著(df=30，r1－0.001/2=0.554)。賀云霞［24］分別采用Wagner-Nelson法和反卷積法計(jì)算雙氯芬酸鈉殼聚糖－海藻酸鈉緩釋微球藥物體內(nèi)吸收百分?jǐn)?shù)，與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的體外累積釋放百分?jǐn)?shù)進(jìn)行線性回歸，考察微球的體內(nèi)外相關(guān)性，由試驗(yàn)結(jié)果可知:與Wagner-Nelson法相比，采用反卷積法計(jì)算得到的體內(nèi)吸收曲線與體外釋放曲線吻合度更好，相關(guān)系數(shù)更大(ft=1.1274 Ft-D+21.907，r=0.9711)，表明由反卷積法得到的體內(nèi)外關(guān)系的數(shù)學(xué)模型優(yōu)于Wagner-Nelson法，其體內(nèi)外相關(guān)性研究結(jié)果更可靠。

3.3 統(tǒng)計(jì)矩法 統(tǒng)計(jì)矩法(Statistical moment method)［35-36，43］是應(yīng)用統(tǒng)計(jì)矩分析法分別算出平均體內(nèi)殘留時(shí)間、平均吸收時(shí)間、平均體內(nèi)釋藥時(shí)間以及體外平均溶出時(shí)間，從而通過(guò)處理體內(nèi)外數(shù)據(jù)得到較高水平的相關(guān)關(guān)系。Chu等［44］在研究可降解的石杉?jí)A甲微球制劑體內(nèi)外相關(guān)性時(shí)，也嘗試使用了統(tǒng)計(jì)矩法，并獲得了較好的擬合相關(guān)性。李靜［45］研究報(bào)道采用統(tǒng)計(jì)矩分析原理建立體外釋放平均時(shí)間與體內(nèi)平均滯留時(shí)間之間的相關(guān)性。研究結(jié)果表明，對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的體外累積釋放量與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)顯著相關(guān)(Y=3.4463X+4.6675，R2=0.9930)，提示可根據(jù)體外累積百分釋放量預(yù)測(cè)體內(nèi)對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。

4 結(jié)語(yǔ)

對(duì)微球藥物體外釋放度測(cè)定，2000年以后國(guó)外多采用流通池法，而《中國(guó)藥典》至今還未明確收載專用于微球的體外釋放度測(cè)定方法，從已有研究來(lái)看，國(guó)內(nèi)研究者多采用動(dòng)態(tài)透析法或槳法測(cè)定，對(duì)于方法簡(jiǎn)便、重復(fù)性好的流通池法的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究則較少。

進(jìn)行體外加速釋放時(shí)，一般采用升溫或調(diào)整釋放介質(zhì)pH等方法。升溫多采用比聚合物玻璃化溫度稍高的溫度來(lái)縮短聚合物降解時(shí)間，該條件下聚合物變得松軟，通透性有所增強(qiáng)，藥物的分子運(yùn)動(dòng)也有一定程度地加劇。另外，由于聚合物微球的降解主要為酯鍵水解，故調(diào)整釋放介質(zhì)pH也可加速微球的降解，但相對(duì)于升高介質(zhì)溫度，調(diào)整pH加速的效果較為溫和，因此只單純通過(guò)調(diào)整pH不易達(dá)到加速微球釋放，需要結(jié)合升溫等其他操作來(lái)協(xié)同促進(jìn)微球的加速釋放。

在微球體內(nèi)外相關(guān)性評(píng)價(jià)方法中，模型依賴法與反卷積法的分析結(jié)果是一致的，前者是后者的良好近似，后者對(duì)任何模型的藥物均適用;反卷積法則是雙向的，可以根據(jù)體內(nèi)藥動(dòng)數(shù)據(jù)推算體內(nèi)藥物吸收數(shù)據(jù)，也可根據(jù)體外釋放數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)體內(nèi)藥時(shí)數(shù)據(jù)［35］。

本文主要是希望通過(guò)體外特性研究來(lái)預(yù)測(cè)藥物在體內(nèi)的釋放行為，達(dá)到減少動(dòng)物數(shù)量最終節(jié)省研究成本的目的。體外特性與體內(nèi)行為兩者之間相關(guān)程度，對(duì)于以微球藥物體外釋放特征預(yù)測(cè)體內(nèi)藥時(shí)曲線，指導(dǎo)和優(yōu)化微球處方設(shè)計(jì)，以及確立更合理的微球藥物體外釋放測(cè)定方法都具有指導(dǎo)意義?，F(xiàn)有研究文獻(xiàn)多集中于微球體外或體內(nèi)釋放評(píng)價(jià)，對(duì)于體內(nèi)外相關(guān)性的研究并不多，研究者可以多進(jìn)行一些各種聚合物微球的體內(nèi)外相關(guān)性研究。

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