李蘊(yùn)峰，柴汝松，劉宇明

（黑龍江省森林植物園，黑龍江 哈爾濱150040）

色木槭（Acer mono Maxim.），又名五角槭、色木，為槭樹(shù)科槭樹(shù)屬，落葉喬木，樹(shù)勢(shì)優(yōu)美，枝葉濃密，葉形秀麗，嫩葉紅色，入秋變成橙黃或紅色，花色清淡，翅果美麗，甚為美觀，是良好的園林綠化樹(shù)種，可孤植、片植、群植。耐陰性較好，可植于建筑物北側(cè)、西側(cè)或東側(cè)。在廠礦綠化中也能有較好的生長(zhǎng)，可作為樹(shù)樁盆景材料［1］。色木槭主要是用種子來(lái)進(jìn)行繁殖［2］，組織培養(yǎng)技術(shù)不受環(huán)境季節(jié)的影響和制約，可以解決種苗短缺的難題，實(shí)現(xiàn)集約化、工廠化的管理生產(chǎn)［3］。

1 材料與方法

1.1 材料的采集

試驗(yàn)所用材料采于黑龍江省五常市鳳凰山，采后于4℃冰箱中保存、備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 無(wú)菌材料的獲得 水培3～4d，腋芽生長(zhǎng)有嫩莖，易操作，對(duì)外植體進(jìn)行滅菌消毒實(shí)驗(yàn)，用75%乙醇30s＋0.2%HgCl2溶液10min進(jìn)行體表滅菌，無(wú)菌水沖洗6次后置于無(wú)菌水中備用。

1.2.2 基本培養(yǎng)基 采用 MS作為基本培養(yǎng)基，pH值5.8，蔗糖25g·L－1。外植體為長(zhǎng)2～3cm的帶頂芽莖段，每瓶接種1個(gè)莖段，每組重復(fù)10瓶，4組重復(fù)試驗(yàn)。莖段接種后培養(yǎng)30d時(shí)觀察生長(zhǎng)狀況。

1.2.3 培養(yǎng)室的條件 培養(yǎng)室溫度為25℃，光/暗周期為14/10h，光照強(qiáng)度2 500～3 500lx。

1.2.4 培養(yǎng)基的選擇 啟動(dòng)培養(yǎng)基：MS添加不同濃度的 NAA0.1、0.2、0.3mg·L－1，pH 值5.8，瓊脂0.7%，糖25g·L－1。增殖培養(yǎng)基：MS添加不同濃度的6－BA 2、3、4、5mg·L－1，pH 5.8，瓊脂0.7%，糖25g·L－1。

1.2.5 生根培養(yǎng) 培養(yǎng)基1/2MS添加0.1mg·L－1NAA，其中pH 5.8，瓊脂0.7%，糖20g·L－1。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

用Excel 2003軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

計(jì)算公式如下：

莖段增殖系數(shù)＝增殖出新芽苗的莖段總數(shù)/接種的莖段總數(shù)

生根率（%）＝生根的苗數(shù)×100/用于生根培養(yǎng)的總苗數(shù)

成活率（%）＝成活苗株數(shù)×100/煉苗總數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 不同滅菌時(shí)間對(duì)莖芽萌發(fā)和莖芽生長(zhǎng)的影響

色木槭由于木質(zhì)含糖，這是其莖段滅菌成功率低的重要原因。外植體滅菌時(shí)間對(duì)外植體影響很大。在組培試驗(yàn)中，莖段的滅菌最佳滅菌劑是HgCl2，但滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)對(duì)材料本身具有殺傷作用，影響成活率。

表1 0.2%HgCl2不同滅菌時(shí)間對(duì)色木槭莖芽生長(zhǎng)的影響

從表1中可以看出，當(dāng)0.2%升汞滅菌時(shí)間為12min時(shí)，色木槭莖芽成活率最高，所以選擇12 min為色木槭莖芽最佳滅菌時(shí)間。

2.2 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)莖芽生長(zhǎng)和增殖的影響

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可以調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)程、分化方向和器官發(fā)生［4，5］，而不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑結(jié)合使用時(shí)，濃度的相對(duì)比例要在一定的范圍內(nèi)才能夠?qū)ζ鞴侔l(fā)生起到明顯的誘導(dǎo)增殖作用［6，7］。在色木槭的啟動(dòng)培養(yǎng)中，當(dāng)NAA濃度為0.2mg·L－1時(shí)，莖芽成活率最高，見(jiàn)表2。

表2 不同濃度的NAA對(duì)色木槭莖芽生長(zhǎng)的影響

使用6－BA對(duì)色木槭增殖培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，隨著6－BA濃度升高，莖芽增殖系數(shù)先增大后減小，當(dāng)6－BA為3.0mg·L－1時(shí)，增殖系數(shù)最大，為5.0，見(jiàn)表3。

表3 不同濃度6－BA對(duì)色木槭莖芽增殖的影響

2.3 生根培養(yǎng)

以1/2MS為基本培養(yǎng)基，取培養(yǎng)后健壯的芽苗，接種到含有0.1mg·L－1NAA的培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)。在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)生根培養(yǎng)30d后，將株高2 cm以上、根系發(fā)達(dá)、葉片展開(kāi)2～4片的健壯幼苗在培養(yǎng)室內(nèi)將培養(yǎng)瓶敞口煉苗5～7d，然后用水將根系附著的培養(yǎng)基洗凈，移植到營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)中，將基質(zhì)澆透水并用塑料薄膜覆蓋容器口，于溫室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)期間保持較高的濕度。10d左右待葉片變?yōu)樯罹G色，逐漸把保鮮膜移除，將再生植株移栽到溫室的花盆中。

3 結(jié)論

外植體滅菌時(shí)間對(duì)外植體影響很大。在組培試驗(yàn)中，莖段的滅菌最佳滅菌劑是HgCl2，12min為色木槭莖芽最佳滅菌時(shí)間。

在色木槭的組織培養(yǎng)中，當(dāng)NAA濃度為0.2 mg·L－1時(shí)，莖芽成活率最高。

使用6－BA對(duì)色木槭增殖培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，隨著6－BA濃度升高，莖芽增殖系數(shù)先增大后減小，當(dāng)6－BA為3.0mg·L－1時(shí)，增殖系數(shù)最大，為5.0。

以1/2MS為基本培養(yǎng)基，取培養(yǎng)后健壯的芽苗，接種到含有0.1mg·L－1NAA的培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，可以建立色木槭組織培養(yǎng)體系。

［1］卜亞玲.槭樹(shù)的造景特色［J］.湖南林業(yè)，2008（2）：28

［2］胡興無(wú)，楊淑玲，李殿波.色木槭綠化用大規(guī)格苗木的培育［J］.特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)植物，2008（7）：23－24

［3］胡海波，黃丹，許岳香.木犀科植物組織培養(yǎng)研究綜述［J］.林業(yè)科技開(kāi)發(fā)，2009，23（3）：5－8

［4］鞏振輝，申書(shū)興.植物組織培養(yǎng)［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2007

［5］Pradeep C，Robert M，Mary T，et al.Somatic embryogenesis，organogenesis and plant regeneration in taro（Colocasia esculenta var.esculenta）［J］.Plant Cell Tiss Organ Cult，2009，99：61－71

［6］張紅曉，康向陽(yáng)，沈燕，等.白刺組培快繁的研究［J］.經(jīng)濟(jì)林研究，2003，21（4）：60－63

［7］李小川，張華通，周麗華，等.迷迭香帶芽莖段的組織培養(yǎng)技術(shù)［J］.經(jīng)濟(jì)林研究，2006，24（3）：15－20