李沫民

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)是新生兒窒息的嚴(yán)重并發(fā)癥，是造成兒童傷殘的主要原因之一，嚴(yán)重危及新生兒的生命與健康，給社會(huì)和家庭帶來沉重負(fù)擔(dān)。HIE的發(fā)生機(jī)制尚不十分清楚，近年來研究認(rèn)為免疫炎癥反應(yīng)在HIE的發(fā)病機(jī)制中的起到重要作用［1］。為此我們對65例HIE患兒血清中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和可溶性細(xì)胞粘附分子-1(sICAM-1)的水平進(jìn)行了測定，探討它們與HIE以及病情嚴(yán)重程度之間的相互關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 所有65例患兒均來自于2008年6月至2011年8月在我院住院的足月HIE患兒，其中輕度33例，中度19例，重度13例。診斷標(biāo)準(zhǔn)以及臨床分度標(biāo)準(zhǔn)均按照中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)制定的HIE診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］?；純壕驮诎l(fā)病24 h以內(nèi)人院，其中男39例，女26例;平均出生體質(zhì)量(3.41±0.49)kg，平均胎齡(39.8±2.6)周。所有患兒均行顱腦CT檢查。另選擇正常分娩的足月新生兒30例作為對照，其中男19例，女11例。兩組性別構(gòu)成、胎齡及出生體質(zhì)量差異均無顯著性(P＞0.05)。排除條件:有急慢性感染性疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)畸形以及先天性心臟病的患兒除外。本研究符合本院人體試驗(yàn)委員會(huì)制定的倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，并與患兒監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書。

1.2 方法 于患兒生后第1天(急性期)和生后第7天(恢復(fù)期)分別采集靜脈血2 ml;對照組則在出生后1～2 d采集靜脈血2 ml，以3000 r/min，離心半徑7.5 cm條件下離心15 min，分離血清后置于-20℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA法)測定血清MCP-1、TNF-α和sICAM-1水平。試劑盒均購自北京晶美生物工程有限公司，嚴(yán)格按照說明書由專人進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩樣本間比較采用配對t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

輕、中、重度 HIE組患兒的 MCP-1、TNF-α和sICAM-1水平較對照組顯著升高(P＜0.05);輕、中、重度HIE組MCP-1、TNF-α和sICAM-1水平逐漸升高，組間比較具有顯著性差異(P＜0.05);HIE患兒恢復(fù)期(生后7 d)血清 MCP-1、TNF-α和sICAM-1水平較急性期(生后1 d)均有明顯下降(P＜0.05)。見表1。

表1 HIE各組與對照組血清MCP-1和sICAM-1水平的比較(±s)

表1 HIE各組與對照組血清MCP-1和sICAM-1水平的比較(±s)

注:與對照組比較，①P＜0.05;與同期輕度組比較②P＜0.05;與同期中度組比較③P＜0.05;與同組急性期比較④P＜0.05

3 討論

HIE是新生兒期重要疾病之一，嚴(yán)重影響新生兒生命質(zhì)量，是當(dāng)今圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)研究的重要課題。HIE病情兇險(xiǎn)，患兒常遺留永久性神經(jīng)功能損害，病死率高。隨著HIE發(fā)病機(jī)制的研究，發(fā)現(xiàn)HIE是與急性炎癥反應(yīng)相關(guān)的病理過程，有多種免疫細(xì)胞及細(xì)胞因子參與了腦損傷的發(fā)生發(fā)展過程［3］。

MCP-1是一種重要的單核細(xì)胞趨化因子。有研究［4］發(fā)現(xiàn)MCP-1參與了許多神經(jīng)系統(tǒng)病變的發(fā)病機(jī)制，發(fā)現(xiàn)在腦缺血缺氧時(shí)，MCP-1可趨化單核細(xì)胞到達(dá)炎癥部位，誘發(fā)產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示輕、中、重度HIE組患兒的MCP-1水平較對照組顯著升高(P＜0.05);輕、中、重度 HIE組MCP-1水平逐漸升高，組間比較具有顯著性差異;HIE患兒恢復(fù)期血清MCP-1水平較急性期有明顯下降(P＜0.05)。提示MCP-1參與了HIE的發(fā)病機(jī)制，并與 HIE嚴(yán)重程度密切相關(guān)。這與以往的研究結(jié)果相一致［10］。MCP-1生物學(xué)作用有以下幾方面［5，6］:①趨化激活單核-巨噬細(xì)胞，使其穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入損傷腦組織，并釋放氧自由基、蛋白水解酶和炎性因子等，導(dǎo)致過度炎癥反應(yīng)。②可趨化T淋巴細(xì)胞并引起中性粒細(xì)胞聚集，加重組織炎性損傷。③可上調(diào)黏附分子水平，介導(dǎo)腦缺血時(shí)的腦組織損傷。

TNF-α是一種由巨噬細(xì)胞所分泌的具有多種生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，在中樞神經(jīng)組織中可由小膠質(zhì)細(xì)胞和星形細(xì)胞產(chǎn)生，TNF-α在應(yīng)激過程和炎癥反應(yīng)中可誘導(dǎo)合成急性時(shí)相蛋白 CRP，與內(nèi)毒素共同引起組織損傷［7］。研究［8］證實(shí)TNF-α水平輕度增加可改善新生兒窒息時(shí)的免疫抑制狀態(tài)，增強(qiáng)其免疫功能，但TNF-α水平過度升高則會(huì)導(dǎo)致機(jī)體全身性炎癥反應(yīng)，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生毒性作用，導(dǎo)致腦細(xì)胞水腫或壞死等不利后果。本研究結(jié)果顯示:輕、中、重度HIE組患兒的TNF-α水平較對照組顯著升高;輕、中、重度HIE組TNF-α水平逐漸升高，組間比較具有顯著性差異(P＜0.05);HIE患兒恢復(fù)期TNF-α水平較急性期明顯下降P＜0.05)。提示缺氧缺血產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，使患兒血清TNF-α水平升高，可能作為重要介質(zhì)參與了HIE的病理過程，參與缺氧缺血性腦損傷的炎癥反應(yīng)。還提示隨著并且的好轉(zhuǎn)，缺氧缺血癥狀的逐步改善，TNF-α水平也隨之下降，腦細(xì)胞損傷減輕。

ICAM-1在體內(nèi)分布廣泛，是一種粘附分子球蛋白，多表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞。ICAM-1自血管內(nèi)皮細(xì)胞脫落后成為sICAM-1，具有介導(dǎo)中性粒細(xì)胞粘附于血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用，促進(jìn)中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞聚集于損傷區(qū)域，并釋放細(xì)胞毒物質(zhì)，如氧自由基、神經(jīng)毒細(xì)胞因子等，再次引起神經(jīng)細(xì)胞損傷［9，10］。本研究結(jié)果顯示輕、中、重度 HIE組患兒的sICAM-1水平較對照組顯著升高;輕、中、重度HIE組sICAM-1水平逐漸升高，組間比較具有顯著性差異(P＜0.05);HIE患兒恢復(fù)期sICAM-1水平較急性期明顯下降P＜0.05)。提示sICAM-1參與了HIE的發(fā)病機(jī)制，并與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，能夠反映HIE患兒腦損傷的嚴(yán)重程度，對病情監(jiān)測具有一定意義。

綜上所述，MCP-1、TNF-α和sICAM-1可能參與了HIE的發(fā)病機(jī)制，測定HIE患兒血清 MCP-1、TNF-α和 sICAM-1水平，對了解HIE腦損傷的嚴(yán)重程度及判斷預(yù)后可能具有一定意義，并為HIE的免疫學(xué)治療提供一定的理論基礎(chǔ)。

［1］麥水強(qiáng)，陳銘珍，蘇贊彩.新生兒缺氧缺血性腦病血清細(xì)胞因子測定及臨床意義．中國婦幼保健，2007，22(21):3001-3002．

［2］中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科分會(huì)新生兒學(xué)組.新生兒缺氧缺血性腦病診斷標(biāo)準(zhǔn)．中國當(dāng)代兒科雜志，2005，7(2):97-98．

［3］韓玉昆，許植之，虞人杰.新生兒缺血缺氧性腦?。本?人民衛(wèi)生出版社，2000:15．

［4］Iikuni N，Okamoto H，Yoshio T，Raised monocyte chemotactic protein1(MCP-1)/CCLin cerebrospinal fluid ofpatientswith neuropsychiatric lupus．Ann Rheum Dis，2006，65(2):253-256．

［5］曹靜，陳偉華，梁秋瑾.血清單核 /巨噬細(xì)胞趨化因子與新生兒缺氧缺血性腦病的相關(guān)研究．中國實(shí)用兒科雜志，2006，23(9):664-665．

［6］Arakelvan A，Petrkova J，Hermanova Z，et al.Serum levels of the MCP-1 chemokine in patientswith ischemic stroke and myocar2 dial infarction．Mediators Inflamm，2005，3(3):175-179．

［7］王旭.新生兒缺氧缺血性腦病血清腫瘤壞死因子水平的動(dòng)態(tài)變化及其臨床意義．中國婦幼保健，2006，21(23):294-295．

［8］張麗慧，苗萍，劉國紅.新生兒缺氧缺血性腦病血清IL-8和TNF-α的變化及臨床意義．中國醫(yī)師雜志，2006，8(11):1573-1574．

［9］王洪新，孫兆林，韓仲容，等.腦梗死患者血清sICAM-1含量的研究．臨床神經(jīng)病學(xué)雜志，2002，15(5):294．

［10］李漢東，李志華新生兒缺氧缺血性腦病患者血漿sICAM-1和Ps及 vWF含量變化的臨床意義．中國校醫(yī)，2007，21(5):586-587．