龍碧波，徐海衡，陳猛醒，張新定，胡金祥

（海南師范大學(xué) 體育學(xué)院，海南 海口 571158）

長(zhǎng)時(shí)間、大強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)可引起機(jī)體體內(nèi)自由基產(chǎn)生增加，導(dǎo)致體內(nèi)抗氧化防御能力降低，組織細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化代謝產(chǎn)物增強(qiáng)，引起機(jī)體體內(nèi)某些生物大分子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，組織細(xì)胞遭受損傷或破壞，造成運(yùn)動(dòng)能力下降[1].因此，如何從天然物質(zhì)中篩選有效無(wú)毒的抗氧化劑，成為運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn).巴戟天是茜草科植物巴戟天（Morinda Offieinalis How，MOH）的根，具有補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)除濕、增強(qiáng)免疫力等功效[2].本研究通過(guò)分析巴戟天對(duì)游泳訓(xùn)練小鼠肝組織自由基代謝及血清酶GOT、GPT活性的影響，探討其作用機(jī)制，為將巴戟天在運(yùn)動(dòng)性疲勞中的廣泛應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

選用60只健康雄性SD小鼠，體重20～22 g（購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心）.將小鼠隨機(jī)分成分成3大組：安靜組、運(yùn)動(dòng)組、恢復(fù)組，每大組組內(nèi)均設(shè)藥物組和對(duì)照組，每組10只.所有動(dòng)物均在室溫22～27℃、相對(duì)濕度為50%～60%的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飼養(yǎng)，光照時(shí)間隨同自然變化，以基礎(chǔ)飼料（由廣州中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心提供）和蒸餾水正常喂養(yǎng).

1.1.2 試劑

巴戟天購(gòu)自海南省中醫(yī)院，采用蒸餾水浸泡、煮沸、過(guò)濾，濃縮成含巴戟天生藥1.0g·mL-1的藥液供實(shí)驗(yàn)備用[3].超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）、丙二醛（MDA）、血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）的測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所.

1.2.1 造模與給藥

各組小鼠自由攝入水和基礎(chǔ)飼料，藥物組采用灌胃給藥，用藥劑量為 4.5g·kg-1·d-1[4]，每天下午4時(shí)灌服給藥.對(duì)照組灌胃相等劑量的生理鹽水，共連續(xù)6周.訓(xùn)練組和恢復(fù)組小鼠共進(jìn)行6周的游泳運(yùn)動(dòng).水溫（30±2）℃，水深35 cm，每天上午9時(shí)進(jìn)行游泳訓(xùn)練.每周游6 d，休息1 d.第1周每天游泳訓(xùn)練30 min，然后每周遞增10 min，第6周每天游泳時(shí)間已達(dá)到80 min.第6周游泳訓(xùn)練結(jié)束后進(jìn)行最后一次力竭性游泳[5].訓(xùn)練組小鼠在力竭游泳運(yùn)動(dòng)后立即處死.安靜組也同時(shí)處死.恢復(fù)組在力竭游泳運(yùn)動(dòng)后24 h立即處死.

1.2.2 指標(biāo)的測(cè)定

眼眶取血，肝素抗凝，立即取出肝臟組織，低溫組織勻漿，冷凍離心取上清液.嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)的方法測(cè)定肝組織丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性.血液離心取血清，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)的方法測(cè)試血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性.

1.2.3 數(shù)據(jù)處理

所測(cè)數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)一律采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以P＜0.05作為顯著性差異標(biāo)準(zhǔn).

2 結(jié)果

2.1 巴戟天對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響

從表1可以看出，訓(xùn)練對(duì)照組小鼠力竭游泳時(shí)間為216.6 min，訓(xùn)練藥物組小鼠力竭游泳時(shí)間為280.7 min，力竭游泳時(shí)間訓(xùn)練藥物組小鼠較訓(xùn)練對(duì)照組小鼠顯著延長(zhǎng)了64.1 min（P＜0.05），延緩率為29.59%.

表1 巴戟天對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響(x±s,n=10)Tab.1 Effect of MOH on swimming time of mice(x±s,n=10)

2.2 巴戟天對(duì)小鼠肝組織中SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影響

從表2中可以看出，安靜藥物組肝組織中抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均顯著高于安靜對(duì)照組（P＜0.05），MDA含量顯著低于安靜對(duì)照組（P＜0.05）；訓(xùn)練藥物組肝組織SOD、GSH-Px活性顯著高于訓(xùn)練對(duì)照組（P＜0.05），MDA含量顯著低于訓(xùn)練對(duì)照組（P＜0.05）；恢復(fù)藥物組肝組織 SOD、GSH-Px活性顯著高于恢復(fù)對(duì)照組（P＜0.05），MDA含量顯著低于恢復(fù)對(duì)照組（P＜0.05）.說(shuō)明巴戟天不僅對(duì)安靜狀態(tài)和運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下產(chǎn)生的自由基都具有明顯的清除能力，而且還促進(jìn)小鼠在運(yùn)動(dòng)后的恢復(fù)，對(duì)肝組織具有明顯的防御和保護(hù)作用，是一種很強(qiáng)的抗氧化劑.

表2 巴戟天對(duì)小鼠肝組織中SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影響(x±s,n=10)Tab.2 Effect of MOH on SOD，GSH-Px,MDA of mouse liver(x±s,n=10)

2.3 巴戟天對(duì)小鼠血清GPT、GOT活性的影響

從表3中可以看出，安靜藥物組小鼠血清GOT、GPT活性下降，且GPT的下降具有顯著性意義（P＜0.05）；訓(xùn)練藥物組小鼠血清GOT、GPT活性均顯著低于訓(xùn)練對(duì)照組（P＜0.05）；經(jīng)過(guò)24 h恢復(fù)后，恢復(fù)藥物組小鼠血清GOT、GPT活性也顯著低于恢復(fù)對(duì)照組（P＜0.05）.這研究結(jié)果顯示巴戟天不僅具有保護(hù)肝組織和促進(jìn)肝功能恢復(fù)的作用，而且巴戟天對(duì)心肌組織也具有保護(hù)作用.

表3 巴戟天對(duì)小鼠血清GPT、GOT活性的影響(x±s,n=10)Tab.3 Effect of MOH on GPT,GPT of mouse blood serum(x±s,n=10)

3 討論與分析

3.1 巴戟天對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響

運(yùn)動(dòng)能力的提高是機(jī)體抗疲勞能力加強(qiáng)的重要表現(xiàn)，反映運(yùn)動(dòng)能力最常用的指標(biāo)是小鼠力竭游泳時(shí)間的長(zhǎng)短[6].本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：訓(xùn)練藥物組小鼠力竭游泳時(shí)間顯著長(zhǎng)于訓(xùn)練對(duì)照組小鼠（P＜0.05）.這說(shuō)明巴戟天可以提高小鼠的運(yùn)動(dòng)能力，具有明顯的抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用.

3.2 巴戟天對(duì)小鼠肝組織中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影響

肝臟是機(jī)體進(jìn)行物質(zhì)代謝的重要器官，肝組織自由基的代謝以及肝組織抗氧化酶活性的變化在運(yùn)動(dòng)中的變化最為顯著，同時(shí)機(jī)體的運(yùn)動(dòng)能力也與肝組織的生理機(jī)能密切相關(guān)[7].SOD、GSH-PX是機(jī)體體內(nèi)自由基清除體系中的重要抗氧化酶.MDA是機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化代謝的產(chǎn)物，它的含量可體現(xiàn)出自由基對(duì)機(jī)體組織造成損傷的程度[8].本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：藥物組小鼠肝組織中抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均顯著高于它們各自的對(duì)照組，MDA含量顯著低于它們各自的對(duì)照組，由此可見(jiàn)巴戟天不僅可以清除小鼠運(yùn)動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生的自由基，而且對(duì)小鼠安靜狀態(tài)下產(chǎn)生的自由基也有清除作用，有很強(qiáng)的抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力.

3.3 巴戟天對(duì)小鼠血清GPT、GOT活性的影響

GPT和GOT活性是肝細(xì)胞損傷最敏感指標(biāo)之一[9].GPT分布以肝臟中最高，GOT分布以心肌最高，其次為肝.但是如果肝細(xì)胞受損，則導(dǎo)致GPT和GOT從受損的肝細(xì)胞中逸出到血液，致使血清中GPT、GOT活性明顯增加.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，藥物組小鼠血清中GPT、GOT活性均顯著低于他們各自的對(duì)照組.說(shuō)明巴戟天不僅對(duì)肝組織細(xì)胞具有明顯的保護(hù)作用，對(duì)心肌組織也有保護(hù)作用.

[1]熊正英,唐量.蘆薈對(duì)訓(xùn)練小鼠骨骼肌自由基代謝及運(yùn)動(dòng)能力的影響[J].中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志,2003,22(2)：182-183.

[2]陳志霞,林勵(lì).巴戟天的研究進(jìn)展[J].中藥材,2001,24(3)：209-210.

[3]陳忠,涂濤,方代南.南藥巴戟天水提液對(duì)小鼠造血功能的研究[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,22(5)：21-22,52.

[4]馮昭明,肖柳英,張丹.巴戟水提液對(duì)小鼠肝癌模型的作用[J].廣州醫(yī)藥,1999,30(5)：65-67.

[5]龍碧波.絞股藍(lán)提取物對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)能力的影響[J].中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志,2010,26(3)：339-340.

[6]龍碧波.海南野生絞股藍(lán)抗運(yùn)動(dòng)性疲勞的實(shí)驗(yàn)研究[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2009,36(4)：712-716.

[7]龍碧波,張新定,蘇家文.絞股藍(lán)對(duì)訓(xùn)練小鼠肝組織自由基代謝及血清酶活性的影響[J].海南師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2008,21(2)：193-196.

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[9]張秀明,李健齋,魏明竟,等.現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)[M].北京：人民軍醫(yī)出版社,2001：1277-1288.