施學(xué)驕，張杰紅，韋正，劉友平

《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定枳實(shí)、枳殼均來(lái)源于蕓香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培變種的干燥果實(shí)[1]。因采收期不同而成為不同的兩味藥，枳實(shí)5~6月收集自落果實(shí)，枳殼7月果皮尚綠時(shí)采收。揮發(fā)油作為二者主要功效成分之一，對(duì)耐藥金葡萄球菌有抑制作用[2]；對(duì)CaCl2、Ach及磷酸組織胺引起的痙攣性收縮有明顯的松弛作用，且能減少胃酸量，對(duì)抗大鼠幽門結(jié)扎性潰瘍的形成[3]；李貴海[4]等研究發(fā)現(xiàn)枳殼揮發(fā)油有明顯的促進(jìn)胃腸推進(jìn)作用，是枳殼行氣的主要成分等。

相關(guān)文獻(xiàn)研究表明枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油成分大部分相似[5]，但不同產(chǎn)地、不同采收時(shí)間及其炮制品中枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油成分比較研究較少。本文采用GC－MS對(duì)其揮發(fā)油成分進(jìn)行比較分析，探討不同產(chǎn)地、不同生長(zhǎng)期枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油成分變化規(guī)律。

1 儀器與材料

Agilent Technologies 7890A GC System；水為蒸餾水；其余試劑均為分析純。

藥材從各地郵購(gòu)，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)盧先明教授鑒定為蕓香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培變種的干燥未成熟果實(shí)。于室溫下陰干、粉碎、過(guò)2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)篩。

2 方法

2.1 枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油的提取

參考《中國(guó)藥典》2010年版附錄XD甲法提取。提取的揮發(fā)油用無(wú)水Na2SO4干燥，封裝備用。

2.2 枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油的定性與定量分析

2.2.1 氣相色譜分析條件 色譜柱為Agilent 19091S-433HP-5MS(0.25 mm×30 m×0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度280 ℃；載氣為氦氣，流量：1.0 mL/min；分流比10∶1，進(jìn)樣量1 μL；升溫程序柱溫60 ℃，保持3 min，以2 ℃/min升至80 ℃，再以5 ℃/min升至120℃，再2 ℃/min升至160 ℃，最后以15 ℃/min升至260 ℃，然后保持至分析完成。

2.2.2 氣相色譜-質(zhì)譜分析條件 電離方式：EI，電子轟擊能：70eV；離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃；掃描范圍：50～400amu；掃描頻率：2.1次/s。

3 結(jié)果

枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油取適量用乙醚溶解稀釋，過(guò)0.22μm微孔濾膜。揮發(fā)油成分經(jīng)過(guò)質(zhì)譜計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索（質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)NIST08）與CAS號(hào)查詢，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)，綜合各項(xiàng)分析鑒定，確定其成分，結(jié)果見表1。

表1 不同產(chǎn)地枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油成分

31 苯乙醛 C8H8O 0.06 0.03 32 順-α,α-5-三甲基-5-乙烯基四氫化呋喃-2-甲醇 C10H18O2 0.13 0.25 1.23 0.5 33 月桂烯 C10H16 0.49 0.64 0.86 0.48 0.21 0.15 34 鄰異丙基甲苯 C10H14 4.1 3.63 35 (Z)-3,7-二甲基-1,3,6-十八烷三烯 C10H16 0.43 0.21 0.34 36 壬醛 C9H18O 0.22 0.18 0.31 0.29 37 2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)環(huán)己醇 C10H18O 0.09 0.1 38 2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)環(huán)己酮 C10H16O 0.24 0.12 39 2-異丙基-5-甲基茴香醚 C11H16O 0.57 0.91 0.76 0.86 0.43 0.46 0.54 40 香葉醇 C10H18O 0.43 0.15 0.67 0.41 0.88 0.34 0.46 41 紫蘇醛 C10H14O 0.35 0.16 0.35 0.51 42 (Z)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇乙酸酯 C12H20O2 0.14 0.18 0.14 0.4 0.15 0.2 0.37 0.23 43 辛醛 C8H16O 0.3 0.37 0.25 44 β-檸檬醇 C10H18O 0.07 0.71 0.81 45 4-(1-甲基乙烯基)-1-環(huán)己烯-1-甲醛 C10H14O 0.14 0.29 0.38 0.5 46 [1S-(1α,4α,7α)]-1,2,3,4,5,6,7,8-八氫化-1,4-二甲基-7-(1-甲基乙烯基)奧 C15H24 0.16 0.03 0.08 47 3,7,7-三甲基二環(huán)[4.1.0]庚-3-烯 C10H16 0.51 48 反-α,α-5-三甲基-5-乙烯基四氫化-2-呋喃甲醇 C10H18O2 1.14 2.78 1.7 1.73 0.56 49 香芳醇乙酸酯 C12H22O2 0.1 50 月桂醛 C12H24O 0.09 0.04 0.18 51 熒蒽 C16H10 0.1 52 苯甲醛 C7H6O 0.02 53 香茅醛 C10H18O 0.07 0.07 54 龍腦 C10H18O 0.03 55 三甲基苯甲醇 C10H14O 0.22 56 2,3-二氫-2,2,6-三甲基苯甲醛 C10H14O 0.03 57 百里香酚醚 C11H16O 0.36 58 胡椒酮 C10H16O 0.03 59 2-(甲氨基)苯甲酸甲酯 C9H11NO2 0.08 60 [3S-(3α,3Aβ,5α)]-1,2,3,3A,4,5,6,7-八氫化-α,α-3,8-四甲基-5-奧甲醇 C15H26O 0.06 0.12 61 植酮 C18H36O 0.03 0.26 0.04 0.25 62 亞油酸甲酯 C19H34O2 0.37 1.21 0.38 0.64 63 蛇床子素 C15H16O3 0.08 1.36 1.21 64 3,6-二氫-4-甲基-2-(2-甲基-1-丙烯基)-2H-吡喃 C10H16O 0.07 65 香茅醇 C10H20O 0.2 66 壬酸 C9H18O2 0.05 67 十一醛 C11H22O 0.15 68 癸酸 C10H20O2 0.12 69 合金歡醇 C15H26O 0.08 70 油酸 C18H34O2 0.37 71 3,7,11-三甲基-1,6,10-十二烷三烯-3-醇乙酸酯 C17H28O2 0.06 72 二十二烷六烯酸 C22H32O2 0.06 73 2,2,7,7-四甲基-5,6-環(huán)氧三環(huán)[2.2.1.01,6]十一烷 C15H24O 0.1 0.08 74 3-亞甲基-6-(1-甲基乙基)環(huán)己烯 C10H16 0.12 75 (1α,2β,5α)-2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-環(huán)己烷-1-醇 C10H18O 0.21 76 維生素A C20H30O 0.08

4 討論

4.1 檸檬烯和芳樟醇是枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油中的主要成分，且檸檬烯有鎮(zhèn)咳、祛痰、抗菌的作用；芳樟醇有防腐、抗病毒、鎮(zhèn)靜作用[8]。不同產(chǎn)地枳實(shí)、枳殼揮發(fā)油成分存在較大差異。其中檸檬烯：江枳實(shí)生品（28.19%）>西南藥都枳實(shí)（26.17%）>沅江枳實(shí)(22.99%)，西南藥都枳殼（47.81%）>江枳殼生品（9.76%）>沅江枳殼(9.44%)；芳樟醇的含量是沅江枳實(shí)（18.86%）>江枳實(shí)生品（16.13%）>西南藥都枳實(shí)（13.26%）, 西南藥都枳殼(11.90%)>沅江枳殼(10.77%)>江枳殼生品（10.24%）。

4.2 對(duì)于不同生長(zhǎng)期的枳實(shí)、枳殼而言，沅江和江西產(chǎn)枳實(shí)中檸檬烯含量高于枳殼，而西南藥都以及經(jīng)炮制的枳實(shí)檸檬烯含量不如枳殼高。芳樟醇的含量則是枳實(shí)高于枳殼，但經(jīng)過(guò)炮制后芳樟醇的含量則是枳殼高于枳實(shí)。通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)，隨著生長(zhǎng)期的延長(zhǎng)，芳樟醇、alpha-松油醇、香芹酚和香葉醇的含量呈現(xiàn)一定的規(guī)律性變化，其中芳樟醇和香芹酚的含量隨著生產(chǎn)期的延長(zhǎng)而降低，而alpha-松油醇和香葉醇的含量隨著生產(chǎn)期的延長(zhǎng)而升高。

4.3 通過(guò)比較炮制前后江枳實(shí)和江枳殼揮發(fā)油成分差異發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)炮制后檸檬烯的含量升高，與有關(guān)報(bào)道相符[6~7]。且炮制后，有效成分各組分間的比例也發(fā)生了變化，都有部分新成分增加。其中江枳實(shí)經(jīng)炮制后新增了10個(gè)新化合物，化合物總成分由38個(gè)減少至29個(gè)，芳樟醇/檸檬烯的比值從生品的0.57降至0.29；江枳殼經(jīng)炮制后新增了9個(gè)新化合物，化合物總成分由30個(gè)減少至28個(gè)，芳樟醇/檸檬烯的比值從生品的1.06降至0.25。同時(shí)還存在部分化合物含量增加或減少的現(xiàn)象。

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