周志偉 莫海山 黎民宇 董啟超 范津瑞 高 原

廣東省珠海市人民醫(yī)院普外科，廣東 珠海 519040

梗阻性黃疸是肝膽外科常見(jiàn)疾病，梗阻性黃疸不僅能夠引起肝臟的直接損傷，對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能也具有明顯的影響，如胰島素分泌及利用異常、甲狀腺激素代謝異常等。已經(jīng)有研究表明在肝炎、肝硬化等急慢性肝臟損傷時(shí)，常伴隨體內(nèi)甲狀腺激素及其轉(zhuǎn)化物水平異常[1]，并且同預(yù)后密切相關(guān)，能夠反映肝臟的損傷程度及預(yù)后，為明確梗阻性黃疸時(shí)體內(nèi)甲狀腺素的代謝異常情況及給予相應(yīng)的干預(yù)治療，減輕肝臟損傷，增強(qiáng)膽道腫瘤、胰頭腫瘤等重大疾病圍術(shù)期安全，本文就梗阻性黃疸大鼠甲狀腺激素代謝異常以及外源性甲狀腺素對(duì)肝臟的保護(hù)作用進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

促甲狀腺激素（TSH）、游離甲狀腺素 FT3、FT4、TRab 放免試劑盒（天津原子能公司）、血清白蛋白（ALB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、凝血酶原活度（PA）檢測(cè)試劑盒（南京建成生物工程研究所）、大鼠甲狀腺素（南京建成生物工程研究所）。

放免計(jì)數(shù)儀（天津原子能公司），生化分析儀（日本奧林巴斯株式會(huì)社），分光光度計(jì)（常州醫(yī)用儀器廠）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

24只清潔級(jí) SD 雄性大鼠，體重（200±20）g，由中山醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，隨機(jī)分成三組：對(duì)照組、模型組和干預(yù)組，每組各8只。所有大鼠均給予標(biāo)準(zhǔn)飲食，自由飲水，分籠飼養(yǎng)，保持飼養(yǎng)室22℃，適當(dāng)光照，大鼠適應(yīng)環(huán)境后造模，手術(shù)前12 h禁食，自由飲水，腹腔內(nèi)注射1%氯胺酮（80 mg/kg）麻醉，麻醉生效后，取劍突下3 cm無(wú)菌正中切口進(jìn)入腹腔，沿十二指腸上緣找到膽總管，游離之，5-0絲線雙重結(jié)扎，兩線之間離斷，3-0絲線逐層關(guān)腹。對(duì)照組僅游離膽總管，模型組和對(duì)照組給予腹腔注射生理鹽水1 mL/（kg·d），干預(yù)組給予腹腔注射甲狀腺素溶液（20 μg/mL）1 mL/（kg·d），連續(xù) 14 d，后活體開(kāi)胸、剪開(kāi)心臟，取血6 mL，分離血清后深低溫保存，分批檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法

TSH、FT3、FT4檢測(cè)采用放射免疫法 ，ALB、ALT、TBIL、DBIL、AST采用生化分析儀自動(dòng)檢測(cè)，PA采用比色法。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組大鼠血清甲狀腺激素水平

干預(yù)組及模型組TSH水平低于對(duì)照組（P<0.05），對(duì)照組及干預(yù)組FT3、FT4水平高于模型組（P<0.05），對(duì)照組同干預(yù)組FT3、FT4水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。組間比較，TSH、FT3、FT4差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 三組大鼠甲狀腺激素水平比較（）

表1 三組大鼠甲狀腺激素水平比較（）

注：與對(duì)照組比較，＊P<0.05；與模型組比較，△P<0.05

組別 只數(shù) TSH（IU/mL） FT3（ng/dL） FT4（ng/dL）對(duì)照組模型組干預(yù)組F值P值888 0.142±0.010 0.104±0.050 0.106±0.020 12.94<0.05 0.60±0.04 0.34±0.06＊0.57±0.07△27.96<0.05 38.16±6.15 25.97±9.20＊40.20±5.74△33.18<0.05

2.2 三組大鼠肝功能情況

干預(yù)組及對(duì)照組血清ALT、AST、TBIL、DBIL水平低于模型組（P<0.05），干預(yù)組及對(duì)照組ALB及PA水平高于模型組（P<0.05），干預(yù)組血清 ALT、AST、TBIL、DBIL 水平高于對(duì)照組（P<0.05），干預(yù)組ALB及PA水平低于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

梗阻性黃疸是臨床常見(jiàn)疾病，梗阻性黃疸多由于膽道機(jī)械性阻塞所致，膽道內(nèi)壓力增高，引起膽汁分泌障礙，膽色素逆向反流進(jìn)入血液，導(dǎo)致梗阻性黃疸的發(fā)生，梗阻性黃疸多引起明顯的肝臟損害，除急性肝臟損傷外，甚至能夠引起肝臟的纖維化及膽汁性肝硬化，引起肝臟功能?chē)?yán)重的損害。肝臟是體內(nèi)最大的內(nèi)分泌器官，肝臟能夠合成多種激素、酶類(lèi)及相關(guān)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，也是體內(nèi)激素代謝、滅活的場(chǎng)所，因此肝臟功能損害時(shí)多伴有內(nèi)分泌系統(tǒng)功能異常及激素代謝障礙，如胰島素代謝異常引起的血糖水平紊亂。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)[2]，在嚴(yán)重肝功能損害患者，多半有體內(nèi)甲狀腺激素的代謝障礙，表現(xiàn)為T(mén)SH與T3、T4同向變化，甲狀腺激素的內(nèi)在反饋調(diào)節(jié)機(jī)制異常，有研究認(rèn)為，在發(fā)生肝臟功能損害時(shí)，肝臟甲狀腺原氨酸 5-脫碘酶（5-deiodinase，5-MDI）合成 5-MDI減少，導(dǎo)致T3生成減少[3]。此外，外周組織對(duì)T4攝取減少，可導(dǎo)致T4濃度下降。但是，T4的外環(huán)氧酶活性和含量增加，導(dǎo)致T4向rT3轉(zhuǎn)化增多，引起體內(nèi)甲狀腺的激素水平的降低。此外，有研究認(rèn)為[4]，在肝臟功能損害時(shí)，肝臟合成甲狀腺素受體蛋白及下丘腦-垂體-甲狀腺軸功能抑制也是引起體內(nèi)甲狀腺激素水平異常的主要機(jī)制。甲狀腺激素能夠促進(jìn)機(jī)體的能量代謝，在膽汁分泌過(guò)程中，甲狀腺激素能夠促進(jìn)膽汁的分泌[5]，但是具體機(jī)制目前尚未明確。

表2 三組大鼠肝功能變化比較（）

表2 三組大鼠肝功能變化比較（）

注：與對(duì)照組比較，＊P<0.05；與模型組比較，△P<0.05

組別 只數(shù) ALT（U/L） AST（U/L） TBIL（μmol/L） DBIL（μmol/L） ALB（g/L） PA（g/L）對(duì)照組模型組干預(yù)組F值P值888 41.20±1.83 340.4±21.47＊202.83±19.65＊△89.67<0.05 41.20±1.83 340.4±21.47＊202.83±19.65＊△89.67<0.05 7.32±1.15 137.66±17.15＊105.40±9.45＊△126.42<0.05 5.57±0.55 119.94±11.89＊87.37±8.41＊△227.64<0.05 5.57±0.55 119.94±11.89＊87.37±8.41＊△227.64<0.05 164.29±17.58 129.46±13.26＊142.65±22.40＊△17.2<0.05

本研究發(fā)現(xiàn)，在梗阻性黃疸大鼠，體內(nèi)存在甲狀腺激素代謝異常情況，F(xiàn)T3及FT4水平下降，而TSH水平并未出現(xiàn)升高，而是同步下降，提示在梗阻性黃疸時(shí)，大鼠體內(nèi)甲狀腺激素分泌的反饋機(jī)制失衡，其可能是甲狀腺激素水平異常的主要原因，而在給予外源性甲狀腺激素后，干預(yù)組大鼠體內(nèi)甲狀腺激素水平上升，但是TSH水平未發(fā)生明顯的變化，說(shuō)明采用外源性甲狀腺激素能夠改善梗阻性黃疸大鼠體內(nèi)的甲狀腺激素水平異常，但是并不能糾正甲狀腺軸反饋機(jī)制的異常。在進(jìn)一步的研究中發(fā)現(xiàn)，給予外源性甲狀腺素后，干預(yù)組大鼠的肝功能明顯改善，肝臟損傷減輕，值得注意的是，干預(yù)組大鼠的TBIL及DBIT水平低于模型組，說(shuō)明外源性甲狀腺素能夠調(diào)節(jié)梗阻性黃疸大鼠膽色素的代謝，由于膽道梗阻并未解除，提示其可能在膽色素合成、轉(zhuǎn)運(yùn)或分泌的水平發(fā)生了調(diào)節(jié)作用，甲狀腺素能夠調(diào)節(jié)能量代謝，能夠調(diào)節(jié)三羧酸循環(huán)和Na+-K+-ATP酶的活性，在病理?xiàng)l件下，能夠促進(jìn)肝臟細(xì)胞的增殖[6-7]，促進(jìn)損傷干細(xì)胞的修復(fù)，也是肝功能改善的原因之一，此外對(duì)于ALB及PA的檢測(cè)證實(shí)，外源性甲狀腺素在減輕肝臟功能損傷的同時(shí)能夠改善肝臟的合成功能，發(fā)揮對(duì)肝臟的保護(hù)作用。

[1]韓放，于慧，宋秋苓.甲狀腺激素水平在肝臟疾病診斷中的意義[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2011，6（6）：77-78.

[2]Kostopanagiotou G，Kalimeris K，Mourouzis I，et al.Thyroid hormones alterations during acute liver failure：possible underlying mechanisms and consequences[J].Endocrine，2009，6（2）：8-204.

[3]肖洪廣，黃澤紅，林勇平，等.肝臟疾病對(duì)血清甲狀腺激素水平的影響及其臨床意義[J].廣州醫(yī)藥，2005，36（1）：68-69.

[4]張海鳴，徐三榮，周科軍，等.甲狀腺激素對(duì)急性肝衰竭大鼠肝細(xì)胞的保護(hù)作用[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2010，30（8）：1112-1115.

[5]劉瑞明，常洪賢，張慧，等.病毒性肝病患者血清甲狀腺激素含量變化的臨床意義[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2007，7（11）：2025-2026.

[6]Oren R，Dahevava MD，Karnezis AN，et al.Role of thyroid hormone in stimulating in liver repopulation in the rat by transplanted hepatocytes[J].Hepatology，1999，30（4）：903-913.

[7]姚泰.生理學(xué)[M].5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：386-389.