許文學(xué) 邢學(xué)鋒*

（1南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院；2南方醫(yī)科大學(xué)附屬中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，廣州510515）

紫外分光光度法測(cè)定澳泰樂(lè)顆粒中總黃酮的含量

許文學(xué)1,2邢學(xué)鋒1*

（1南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院；2南方醫(yī)科大學(xué)附屬中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，廣州510515）

目的 建立紫外法測(cè)定澳泰樂(lè)顆粒中總黃酮的含量測(cè)定方法。方法 采用紫外分光光度計(jì)，檢測(cè)波長(zhǎng)510nm，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定本品總黃酮含量。結(jié)果 測(cè)得線性回歸方程為Y=2.1196X+0.0017，R2= 0.99969（n=5），平均回收率為98.75%，RSD為2.08%（n =9）。結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確、重復(fù)性好。

澳泰樂(lè)顆粒；總黃酮；紫外分光光度法

澳泰樂(lè)顆粒由中藥返魂草、郁金、黃精等五味組成，為臨床上較為常用的中藥。國(guó)家衛(wèi)生部藥典委員會(huì)部頒中藥成方制劑第十八冊(cè)中收載的澳泰樂(lè)顆粒[1]質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（WS3-B-3520-98）未對(duì)含量進(jìn)行有關(guān)規(guī)定.本研究采用紫外分光光度法對(duì)澳泰樂(lè)顆粒中所含的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定，從而使該品種的質(zhì)量控制達(dá)到一個(gè)更為完善的水平。

1 儀器與材料

1.1 儀器 美國(guó)惠普UV-8453型可見(jiàn)紫外分光光度計(jì)；DK-S26型電熱恒溫水浴鍋（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）賽多利斯CP3245型萬(wàn)分之一天平；KQ-500DE型醫(yī)用數(shù)控超聲儀（昆山超聲儀器有限公司）。

1.2 材料與試劑 蘆丁對(duì)照品（供含量測(cè)定用，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇均為市售分析純。

2 總黃酮含量測(cè)定方法研究

2.1 對(duì)照品溶液的配制 稱(chēng)取減壓干燥至恒重的蘆丁約20mg，精密稱(chēng)定為19.2mg，置100ml棕色容量瓶中，加70%乙醇適量，微熱使溶解，冷卻至室溫后以70%乙醇稀釋至刻度，搖勻，得濃度為0.192mg/ml的蘆丁對(duì)照品溶液，冷藏備用。

2.2 供試品溶液的配制 取澳泰樂(lè)顆粒適量，精密稱(chēng)重后，溶解于少量蒸餾水中，采用濕法上樣加于已處理好的聚酰胺柱（30～60目，1g，內(nèi)徑約9mm），用蒸餾水洗至水無(wú)色后，以70%乙醇洗脫，直至顏色很淡時(shí)停止洗脫，收集洗脫液并揮干溶劑，得總黃酮部位。少量70%乙醇溶解后定容于25ml容量瓶中備用，即得供試品溶液。

2.3 最大吸收波長(zhǎng)的選擇 精密移取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5.0ml置25ml量瓶管，加5% NaNO2溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加入10% Al（NO3）溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加氫氧化鈉試液10.0ml，加70%乙醇至刻度，混勻，放置15min，照紫外分光光度法[2-4]，在400～700nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，對(duì)照品與供試品溶液顯色后吸收曲線相似度高，在510nm處均有最大吸收，見(jiàn)圖1，故選擇510nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密移取上述蘆丁對(duì)照溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，置25ml容量瓶中，各加蒸餾水5.0ml，加5% NaNO2溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加入10%Al（NO3）溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加10%NaOH溶液10.0ml，然后以70%乙醇定容至刻度，混勻，放置15min，以1號(hào)容量瓶溶液為空白，于510nm處測(cè)定吸光度值，以總黃酮量（C，mg）為縱坐標(biāo)，以吸光度值（Abs）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)圖2?；貧w方程如下式：Y= 2.1196X+0.0017，R2= 0.9996。數(shù)據(jù)表明蘆丁在0.192～0.960mg范圍內(nèi)具有良好線形關(guān)系。

圖1 可見(jiàn)－紫外吸收曲線

圖2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.5 精密度試驗(yàn) 取供試品顯色溶液重復(fù)測(cè)定510nm處吸光度值5次，吸光度平均值0.7043，RSD=0.49%，方法精密度良好。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn) 稱(chēng)取澳泰樂(lè)顆粒約3g 5份，精密稱(chēng)定，依法處理、測(cè)定507nm處吸光度值。以相應(yīng)試劑為空白，按對(duì)照品的回歸方程計(jì)算供試品中總黃酮含量，平均含量為10.55%，RSD=0.47%，方法重現(xiàn)性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液，自首次測(cè)定后10min、30min、60min、90min、120min測(cè)定吸光度值，RSD= 1.26%，樣品顯色后2h 內(nèi)穩(wěn)定性良好，測(cè)定結(jié)果可信。2.8 加樣回收率試驗(yàn) 稱(chēng)取已知含量的澳泰樂(lè)顆粒5份，精密稱(chēng)定后，精密移入“2.1”項(xiàng)下新鮮配制的蘆丁對(duì)照品溶液5.0ml（含蘆丁0.960mg），依法處理、測(cè)定510nm處吸光度值。以相應(yīng)試劑為空白，按對(duì)照品的回歸方程計(jì)算供試品中總黃酮含量。平均加樣回收率為98.75%，RSD=2.08%。

3 樣品總黃酮含量的測(cè)定

按供試品制備方法制備5批樣品，同法測(cè)定。精密移取供試品溶液1ml，依法處理、測(cè)定507nm處吸光度值。以相應(yīng)試劑為空白，按對(duì)照品的回歸方程計(jì)算供試品中總黃酮含量，其總黃酮平均含量為10.54%。

4 討論

最大吸收波長(zhǎng)的選擇：精密移取對(duì)照品溶液依法照紫外分光光度法（中國(guó)藥典2010年版附錄），在400～700nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，對(duì)照品溶液顯色后吸收曲線在510nm處有最大吸收，故選擇510nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。

反應(yīng)時(shí)間分別選擇10、15、20、30min，測(cè)定含量后發(fā)現(xiàn)15min后反應(yīng)已基本完全，吸光度未見(jiàn)明顯增加，故選擇15min為最佳反應(yīng)時(shí)間。

部頒中藥成方制劑第十八冊(cè)中收載的澳泰樂(lè)顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（WS3-B-3520-98）未對(duì)其中含量進(jìn)行有關(guān)規(guī)定。澳泰樂(lè)顆粒所含的總黃酮在起所有成分中占有較大比例，且為有效成分，因此，本研究將總黃酮作為澳泰樂(lè)顆粒質(zhì)量控制的指標(biāo)是可行的，這為控制該藥品質(zhì)量和保障人民用藥安全提供了保障，為全面控制藥品質(zhì)量提供了方法參考。

[1] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).澳泰樂(lè)顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(WS3-B-3520-98)[S].中藥成方制劑第十八冊(cè).

[2] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

[3] 呂鵬,賈秀梅,張振凌.懷山藥及非藥用部位總黃酮含量測(cè)定[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(2):65-68.

[4] 杜芳艷,付凱卿.花生蔓不同部位黃酮含量的研究[J].食品科學(xué),2008, 29(1):137-140.

許昌每個(gè)科室都有新聞宣傳信息員

[本刊訊] 許昌市疾病預(yù)防控制中心自7月1日起將新聞宣傳和信息工作量化，并納入年度目標(biāo)考評(píng)范圍。各業(yè)務(wù)科室指定一名新聞宣傳信息員，負(fù)責(zé)本科室疾病預(yù)防控制信息的報(bào)送和新聞宣傳稿件的撰寫(xiě)工作。

許昌市疾病預(yù)防控制中心高度重視新聞宣傳和信息工作，將該項(xiàng)工作與精神文明建設(shè)、創(chuàng)先爭(zhēng)優(yōu)等活動(dòng)有機(jī)結(jié)合。該中心實(shí)行新聞宣傳和信息工作責(zé)任制，完善了新聞宣傳和信息稿件審核制度、月報(bào)制度和考核獎(jiǎng)懲制度。

（李楊 楊建宇）

Determination of Total Flavone in Aotaile Granules by UV

Xu Wenxue1，2 Xing Xuefeng1■,(1 College of Traditional Chinese Medicine,Southern Medical University, Guangzhou 510515; 2 Integrative Medicine Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515)

Objective To establish a method for determination of total flavone in Aotaile granules by ultraviolet spectrophotometric method. Methods The content of total flavone was determined at 510 nm by ultraviolet spectrophotometric method with rutin as standard. Results The regression equation is Y= 2.11960X+0.0017, R2= 0.99969(n=5), the average recovery rate and RSD were 99.67% and 0.58%, respectively. Conclusion The method is simple, accurate and reproducible.

Aotaile granules; Total flavone; Ultraviolet spectrophotometric method

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.15.107

1672-2779（2012）-15-0163-02

韓世輝

2012-06-29）

*通訊作者