袁禧先 張爽 徐宗云 王鳳榮 董慧慧

[摘要] 目的 通過對人結腸癌細胞株HT-29轉(zhuǎn)染shRNA重組質(zhì)粒后觀察Survivin基因的變化。 方法 設計兩條針對Survivin基因CDS區(qū)不同位點的siRNA片段并構建shRNA表達載體，重組質(zhì)粒使用陽離子脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染結腸癌細胞株HT-29。RT-PCR，Western-blot檢測轉(zhuǎn)染后mRNA及蛋白表達。 結果 轉(zhuǎn)染shRNA重組質(zhì)?？捎行б种艸T-29細胞Survivin的表達，Survivin mRNA和蛋白表達下調(diào)，表明Survivin基因沉默效果較高；兩個轉(zhuǎn)染組之間相比pshRNA1組Survivin基因的表達量低于pshRNA2組。 結論 人結腸癌細胞株中的Survivin基因表達率可通過shRNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染而發(fā)生變化；siRNA1和siRNA2序列中Survivin基因表達量存在統(tǒng)計學意義，提示我們在今后有關Survivin基因靶向治療研究中是否需要考慮到序列的選擇以提高作用效果。

[關鍵詞] Survivin；結腸癌HT-29；SiRNA；RT-PCR；Western-blot

[中圖分類號] R730.2[文獻標識碼] A[文章編號] 1673-9701（2012）15-0001-03