包美玉 章惠琴 凌華萍

[摘要] 目的 觀察CD44v6和MMP-9在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義。 方法 收集2008年6月～2011年6月我院手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的子宮內(nèi)膜癌患者60例，采用免疫組化SP法檢測CD44v6和MMP-9的表達(dá)。 結(jié)果 60例子宮內(nèi)膜癌患者CD44v6陽性24例，陽性率為40％；MMP-9陽性43例，陽性率為71.7%，CD44v6、MMP-9陽性表達(dá)均位于細(xì)胞漿，以細(xì)胞質(zhì)中見棕黃色顆粒分布為陽性。子宮內(nèi)膜癌組織中，CD44v6、MMP-9與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否關(guān)系密切，但與組織類型、病理分級(jí)及FIGO分期及浸潤肌層與否關(guān)系不大，差異無顯著性（P ＞ 0.05）。 結(jié)論 CD44v6與MMP-9協(xié)同作用促進(jìn)腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移。因此，共同檢測CD44v6和MMP-9，可更有效地判斷宮頸癌的轉(zhuǎn)移潛能，為臨床治療及判斷預(yù)后提供有力的理論依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 子宮內(nèi)膜癌；CD44v6；MMP-9；免疫組化

[中圖分類號(hào)] R737.33[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-9701（2012）16-0041-02

Expression and clinicopathological significance of CD44v6，MMP-9 in endometrial carcinoma

BAO Meiyu1 ZHANG Huiqin1 LING Huaping2

1.Department of Maternity, the Peoples Hospital of Sanmen County in Zhejiang Province, Sanmen 317100, China; 2.Department of Gynaecology and Obstetrics, the Second People''s Hospital of Fuyang City in Zhejiang Province, Fuyang 311404, China

[Abstract] Objective To observe the expression of CD44v6 and MMP-9 expression in endometrial carcinoma and its clinical significance. Methods Collected from June 2008 to June 2011，surgical resection and pathology confirmed 60 cases endometrial cancer by immunohistochemical SP method detected CD44v6 and MMP-9 expression. Results Sixty cases of endometrial cancer CD44v6 was positive in 24 cases, the positive rate of CD44v6 was 40%，MMP-9 was positive in 43 cases, the positive rate was 71.7%, and CD44v6 positive expression of MMP-9 werelocated in the cytoplasm, to see the brown in the cytoplasm particle size distribution for the positive. CD44v6, MMP-9 and endometrial cancer lymph node metastasis, or not closely related, but with the histological type, histological grade and FIGO stage and invasive grass-roots or not has little to no significant difference (P > 0.05). Conclusion CD44v6 and MMP-9 synergy to promote tumor invasion transfer. Therefore, the common detection of CD44v6 and MMP-9, may determine the metastatic potential of cervical cancer more effectively and provide a strong theoretical basis for clinical treatment and prognosis.

[Key words] Endometrial carcinoma; CD44v6; MMP-9; Immunohistochemistry

子宮內(nèi)膜癌（endometrial carcinoma，EC）是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病率逐漸升高，研究子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制，尋找可以預(yù)測其惡性潛能的生物學(xué)標(biāo)志物成為近年來研究的新熱點(diǎn)[1]。CD44是近年研究較多的細(xì)胞黏附分子家族，其與腫瘤發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系十分密切，研究發(fā)現(xiàn)，CD44v6在結(jié)腸癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞及惡性淋巴瘤細(xì)胞中其表達(dá)水平較高[2]。MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）家族中分子量最大的酶，也稱為Ⅳ型膠原酶或明膠酶B，其參與形成腫瘤的新生血管及調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附等作用，在腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移的過程中起到極為重要的作用[3]。本研究通過免疫組化方法檢測CD44v6和MMP-9在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)情況，探討其臨床應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2008年6月～2011年6月我院手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的子宮內(nèi)膜癌患者60例，年齡35～67歲，平均（56.2±2.4）歲。根據(jù)FIGO分期：Ⅰ期31例，Ⅱ期17例，Ⅲ～Ⅳ期12例。組織類型：子宮內(nèi)膜腺癌50例，非子宮內(nèi)膜腺癌10例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移14例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移46例。所有患者治療及手術(shù)前均未接受過放療、化療或激素治療。

1.2 免疫組化

CD44v6單克隆抗體及MMP-9單克隆抗體，SP即用型試劑盒購自北京中山生物技術(shù)有限公司。采用SP免疫組化染色法常規(guī)10％中性福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)4 μm厚切片。經(jīng)二甲苯和梯度乙醇脫蠟、水化，高壓煮沸修復(fù)抗原；滴加一抗，置于4℃冰箱過夜；依次滴加生物素化山羊抗小鼠IgG及試劑，DAB顯色；蘇木素復(fù)染后水洗，依次酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，最后顯微鏡下觀察。均設(shè)陰性和陽性對(duì)照。用PBS替代一抗為陰性對(duì)照，用已知陽性片為陽性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定[2]

采用雙向評(píng)分：CD44v6和MMP-9均定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞漿，按染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞所占百分比計(jì)分。癌細(xì)胞<10％陽性0分，11％～40％ 1分，40％～70％ 2分，>70％ 3分；顯色度計(jì)分：細(xì)胞無顯色0分；淺黃色1分；棕黃色2分；棕褐色3分。將兩分相加，0分為-；1~2分為+；3~4分為++；5～6分為+++。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)關(guān)系判斷用Pearson相關(guān)分析，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

60例子宮內(nèi)膜癌患者CD44v6陽性24例，陽性率為40％；MMP-9陽性43例，陽性率為71.7%，CD44v6、MMP-9陽性表達(dá)均位于細(xì)胞漿，以細(xì)胞質(zhì)中見棕黃色顆粒分布為陽性。CD44v6、MMP-9在子宮內(nèi)膜癌中的陽性表達(dá)情況及與各臨床病理特征的關(guān)系見表1。由表1可知，子宮內(nèi)膜癌組織中，CD44v6、MMP-9與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否關(guān)系密切，但與組織類型、病理分級(jí)及FIGO分期及浸潤肌層與否關(guān)系不大，差異無顯著性（P ＞ 0.05）。

CD44v6、MMP-9在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)相關(guān)性見表2。CD44v6、MMP-9在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)呈明顯正相關(guān)（r = 0.5276，P ＜ 0.05）。

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，浸潤和轉(zhuǎn)移是影響其預(yù)后的重要因素。近年來研究表明，表面黏附分子（CD44）和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）在浸潤和轉(zhuǎn)移中起著重要作用。腫瘤發(fā)生浸潤及轉(zhuǎn)移時(shí)，必須先破壞細(xì)胞外基質(zhì)，ECM是細(xì)胞脫落游走并發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移的主要障礙[4]。MMP-9可以降解破壞ECM中的Ⅳ型、Ⅴ型膠原和明膠。本研究顯示，60例子宮內(nèi)膜癌患者M(jìn)MP-9陽性43例，陽性率為71.7%，MMP-9與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否關(guān)系密切，提示MMP-9參與了腫瘤的轉(zhuǎn)移過程[5]。

CD44v6是一類細(xì)胞表面跨膜糖蛋白，能特異結(jié)合基質(zhì)成分，介導(dǎo)細(xì)胞與基質(zhì)間的異質(zhì)黏附作用[6]。CD44v6在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用，即CD44v6高表達(dá)癌細(xì)胞可能獲得淋巴細(xì)胞的“偽裝”，逃避人體免疫系統(tǒng)的識(shí)別和殺傷，更容易進(jìn)入淋巴結(jié)形成轉(zhuǎn)移。CD44v6陽性細(xì)胞更易與毛細(xì)血管后小靜脈中的高柱狀內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合，使腫瘤更易進(jìn)入淋巴系統(tǒng)及循環(huán)系統(tǒng)，透明質(zhì)酸降解產(chǎn)物還能啟動(dòng)血管的發(fā)生，這些都能使CD44v6陽性腫瘤細(xì)胞獲得更強(qiáng)的浸潤轉(zhuǎn)移能力[7]。本研究顯示，60例子宮內(nèi)膜癌患者中CD44v6陽性24例，陽性率為40％，子宮內(nèi)膜癌組織中，CD44v6與子宮內(nèi)膜癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否關(guān)系密切。且CD44v6、MMP-9在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)呈明顯正相關(guān)（r = 0.5276，P ＜ 0.05）。以上說明，CD44v6與MMP-9協(xié)同作用促進(jìn)腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移。因此，共同檢測CD44v6和MMP-9可更有效地判斷宮頸癌的轉(zhuǎn)移潛能，為臨床治療及判斷預(yù)后提供有力的理論依據(jù)[8，9]。

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（收稿日期：2012-02-01）