趙廣高 蘇全生 李新建 董柔 何建偉

摘要：為了比較分析大蒜素與聯(lián)合抗氧化對對運(yùn)動員大強(qiáng)度離心運(yùn)動后不同時相肌肉酸痛程度、血T_AOC、SOD、MDA與GSH—Px水平的影響，將運(yùn)動員24名，隨機(jī)均衡分為對照組(A組)、聯(lián)合抗氧化劑組(B組)和大蒜素組(c組)，運(yùn)動前2周至運(yùn)動后2 d每天分別口服安慰劑、聯(lián)合抗氧化劑或大蒜素腸溶膠丸。服藥2周后進(jìn)行1次大強(qiáng)度離心跑臺運(yùn)動，建立運(yùn)動員延遲性肌肉酸痛(DOMS)模型，在服藥前、運(yùn)動前和運(yùn)動后即刻、24 h、48 h測定運(yùn)動員肘正中靜脈血，r_AOC、SOD、MDA與GSH—Px水平及運(yùn)動后相應(yīng)時相肌肉酸痛程度，并記錄運(yùn)動時間。結(jié)果：3組運(yùn)動員運(yùn)動后肌肉酸痛程度均呈遞增趨勢，B、C組運(yùn)動后各時相肌肉酸痛程度(P<0，05)均低于A組同時相，運(yùn)動時間(P<0.05)均長于A組，血r＝AOC(P<0.05)、SOD、GSH-Px水平均高于A組，iVIDA濃度均低于A組；B、C組各項(xiàng)抗氧化指標(biāo)的變化趨勢并不一致。結(jié)論：大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑均可減小大強(qiáng)度離心運(yùn)動引起的自由基損傷和細(xì)胞膜通透性改變，減輕DOMS；與聯(lián)合抗氧化劑相比，大蒜素可能具有更好的抗氧化能力。

關(guān)鍵詞：大蒜素；聯(lián)合抗氧化劑；延遲性肌肉酸痛；總抗氧化能力

中圖分類號：G 804.2

文章編號：1009 783x(2012)02-0189一04

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

機(jī)體從事不適應(yīng)的大強(qiáng)度運(yùn)動可引起骨骼肌纖維的微細(xì)損傷，導(dǎo)致運(yùn)動性肌肉損傷(EIMI)，表現(xiàn)出DOMs，對EIMI防治手段的研究是多年來國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)之一。在DOMS的發(fā)生發(fā)展過程中，自由基起重要作用。醫(yī)學(xué)研究表明，大蒜素具有清除自由基、抗菌消炎、提高免疫力、改善血流灌注和減輕鈣超載介導(dǎo)的細(xì)胞損傷等作用，其中清除自由基和減輕鈣超載方面的作用提示了將其應(yīng)用到體育運(yùn)動中的可能性。目前，有關(guān)大蒜素在運(yùn)動中的研究尚少，且多存在于動物實(shí)驗(yàn)中。vF、Vc及se均是高效無毒或低毒單體抗氧化劑，抗氧化、清除自由基、抑制鈣超載作用已為大量實(shí)驗(yàn)所證實(shí)。

本研究采用大蒜素與Ve、Vc和se組成的聯(lián)合抗氧化劑作為干預(yù)手段，比較分析兩者對運(yùn)動員一次性大強(qiáng)度離心運(yùn)動后抗氧化能力與脂質(zhì)過氧化損傷的影響，探討兩者減緩IX)MS的可能性與機(jī)制，為科學(xué)化訓(xùn)練和開發(fā)新的營養(yǎng)補(bǔ)劑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1研究對象與方法

1.1研究對象

成都體育學(xué)院競技體校運(yùn)動員24名，實(shí)驗(yàn)前2周，未服用有增強(qiáng)運(yùn)動能力或抗疲勞功效的藥物。

1.2研究方法

1.2.1運(yùn)動員分組及處理因素

在保證運(yùn)動員運(yùn)動級別均衡的前提下，隨機(jī)將其分為對照組(A紐m一8)、聯(lián)合抗氧化劑組(B組，8)和大蒜素組(c組一一8)。參考文獻(xiàn)資料，并結(jié)合受試者在日常生活中(包括飲食及其他途徑)的攝入量，令3組受試者分別在運(yùn)動前2周和運(yùn)動后2 d每天口服安慰劑(80 rag)、聯(lián)合抗氧化劑(VE600 r-llg，Vc 500 mg，se 200 t.tg)或大蒜素腸溶膠丸(80 mg)。

本實(shí)驗(yàn)參考已有的人體IX)MS模型的誘導(dǎo)方法，結(jié)合受試者日常的訓(xùn)練項(xiàng)目和實(shí)驗(yàn)條件，3組運(yùn)動員在分別服用安慰剎、聯(lián)合抗氧化劑或大蒜素2周后，進(jìn)行一次性離心跑臺運(yùn)動，建立運(yùn)動員IX)MS模型。

1.2.2測試樣品的采集

服藥前、運(yùn)動前、運(yùn)動后即刻、24 h、48 h取受試者肘正中靜脈血4 mI，離心處理分離血清測定總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)與谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)，同時在運(yùn)動后相應(yīng)時相進(jìn)行肌肉疼痛等級測試，并記錄運(yùn)動時間。血液指標(biāo)在四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科生化室檢測。

1.2.3檢測指標(biāo)及儀器方法

T-AO(、采用FRAP法，SOD采用黃嘌呤氧化酶法，MDA采用TBA法，GSH-Px采用比色法，下肢肌肉酸痛程度的評定參考Borg12肌肉疼痛等級評價表。

1.2.4數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X-L-_SD)表示。統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS{or Windows 12.o版統(tǒng)計(jì)分析軟件完成。顯著性差異水平P<0.05，非常顯著性差異水平P<0.01。

2研究結(jié)果

2.1運(yùn)動持續(xù)時間與肌肉酸痛程度的比較

B組(46.4i4.1)min、C組(47.2+4.2)min運(yùn)動員運(yùn)動時間均顯著長于A組(42.0±2.4)min。運(yùn)動后3組運(yùn)動員下肢肌肉酸痛程度均逐日加重，24 h和48 h明顯重于運(yùn)動后即刻。B組運(yùn)動后各時相均顯著低于A組，其中運(yùn)動后24 h作常顯著性差異；C組運(yùn)動后各時相均低于A組，其中運(yùn)動后即刻、24h呈顯著性差異。B、C 2組間未見顯著性差異。

2.2血清TAOC、SOD、MDA與GSH Px水平的比較

3組運(yùn)動員血清T-AOC水平均呈遞增趨勢，B、c 2組運(yùn)動后各時相均顯著高于A組同時相；各組間服藥前、運(yùn)動前SOD活性未見顯著性差異，B、c 2組服藥后SOD水平有所升高，運(yùn)動后即刻SOD活性B組高于A組(P<0.05)，A組和B組SOD活性均高于C組(P<0，01)，運(yùn)動后24 h B組SOD活性高于A組(P<0.01)，運(yùn)動后48 h B、C 2組雖高于A組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；運(yùn)動后各組MDA水平均呈升高趨勢，運(yùn)動后即刻B組MDA水平高于c組(P

3分析與討論

3.1大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑對運(yùn)動員運(yùn)動后IX)MS的影響

IX)MS是由劇烈的、不習(xí)慣的運(yùn)動所引起的，尤其在大強(qiáng)度離心運(yùn)動后更為明顯，這種酸痛通常在運(yùn)動結(jié)束后24 h才出現(xiàn)(即延遲性)}24～48 h達(dá)高峰、持續(xù)5～7 d或更長時間后逐漸緩解、消失。本研究中，大強(qiáng)度離心跑臺運(yùn)動后，各組各時相運(yùn)動員肌肉酸痛程度均呈遞增趨勢，24 h和48 h均明顯重于運(yùn)動后即刻，符合DOMS的變化規(guī)律；B、c組運(yùn)動后各時相下肢肌肉酸痛程度均低于A組，其中多時相呈顯著性差異，且B組(46.4~4.1)min、C組(47.2±4.2)rain運(yùn)動員運(yùn)動時間均顯著長于A組，提示大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑可能具有減緩大強(qiáng)度離心運(yùn)動所致DOMS的功效，而具體機(jī)制可通過3組運(yùn)動員運(yùn)動后不同時相血抗氧化指標(biāo)的改變來解釋。

3.2大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑對運(yùn)動員運(yùn)動后抗氧化能力的影響

DOMS的產(chǎn)生機(jī)制可歸結(jié)為機(jī)械損傷學(xué)說和代謝紊亂學(xué)說，被認(rèn)為是機(jī)械性外力作用和代謝性刺激的綜合作用，可能誘發(fā)、加重骨骼肌微結(jié)構(gòu)的損傷。在DOMS所誘發(fā)的運(yùn)動性骨骼肌微細(xì)損傷早期，機(jī)械性損傷因素占主導(dǎo)地位，隨之代謝因

素產(chǎn)生重要作用。機(jī)械性損傷因素主要是運(yùn)動訓(xùn)練負(fù)荷刺激和肌纖維本身力學(xué)性質(zhì)相互作用導(dǎo)致的肌纖維結(jié)構(gòu)損傷，其中自由基的攻擊是導(dǎo)致生物膜系統(tǒng)的離子泵、肌漿網(wǎng)及線粒體等影響生命活動的重要的細(xì)胞器的功能障礙，從而引起膜損傷的因素之一；促使骨骼肌微結(jié)構(gòu)損傷的代謝因素主要有氧自由基脂質(zhì)過氧化和細(xì)胞內(nèi)鈣離子代謝紊亂，因此，自由基損傷影響了IX)MS的整個發(fā)展過程。

在許多研究中，常以SOD、MDA與GSH-Px水平評定機(jī)體運(yùn)動過程中的自由基損傷程度。SOD是清除超氧自由基的內(nèi)源性金屬離子的有效清除劑，其活性的變化可間接反映運(yùn)動中自由基的生成量和體內(nèi)物質(zhì)代謝情況。由于超氧陰離子是活性氧生成過程中的初始產(chǎn)物，因此，SOD也被看作為活性氧防御的第一線。生理?xiàng)l件下它能有效地清除體內(nèi)的代謝物，與其他抗氧化酶協(xié)同保護(hù)細(xì)胞膜和生物大分子免受氧自由基的攻擊，故SOD也是細(xì)胞膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能完整性的保護(hù)酶之一。MDA與SOD是反映脂質(zhì)過氧化程度的一對指標(biāo)。IVIDA是機(jī)體脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的重要代謝產(chǎn)物，其大小反映了脂質(zhì)過氧化的程度，可作為細(xì)胞被氧自由基攻擊的定量指標(biāo)，間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。其含量越高，脂質(zhì)過氧化程度也越高。GSH-Px是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的酶，它能特異性地催化還原型的谷胱甘肽變?yōu)檠趸偷墓入赘孰模宄蹶庪x子0—2、羥自由基·OH和過氧化氫Hz 02，減輕和阻斷脂質(zhì)過氧化物的損害，可以起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整性的作用。本研究結(jié)果(見表1)顯示：B、c 2組服藥后SOD水平有所升高，運(yùn)動后即刻(P<.05)、24 h(P％0.01)SOD活性B組高于A組，運(yùn)動后h B、C 2組均高于A組；運(yùn)動后各組MDA水平均呈升高趨勢，B、C 2組運(yùn)動后24 h低于A組(P

機(jī)體內(nèi)存在有2大系統(tǒng)對抗自由基：第一是非酶促體系：維生素B、c、E，微量元素等，占清除自由基功能的20％。第二是酶促體系：SOD、GSH-Px、過氧化氫酶(CAT)等，占清除自由基功能的80％。人體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)可通過消除自由基和活性氧以免引發(fā)脂質(zhì)過氧化；分解過氧化物，阻斷過氧化鏈；去除起催化作用的金屬離子3種途徑來發(fā)揮作用。大多數(shù)研究機(jī)體抗氧化能力的實(shí)驗(yàn)常以機(jī)體某種特定的抗氧化成分的變化來反映，如SOD、GSH-Px等；但由于這些方法僅分析了機(jī)休某種特定的抗氧化成分，而單一的抗氧化成分難以準(zhǔn)確反映生物體實(shí)際抗氧化應(yīng)激能力，尚不能完全說明氧化損傷已經(jīng)發(fā)生及其程度，且機(jī)體抑制不同氧化物的效率也各不相同，因此評價機(jī)體真正的抗氧化能力是很困難的。因此，將抗氧化作用的測量推廣到更廣的氧化物范圍，有助于更好地理解在不同條件下，機(jī)體運(yùn)動后的不同時相組織對氧化刺激的抵抗力或易感性，而總抗氧化能力(T-AOC)則反映了機(jī)體酶促及非酶促抗氧化體系中總抗氧化、清除自由基的能力。本研究顯示：3組運(yùn)動員血清T AOC水平均呈遞增趨勢，B、c 2組運(yùn)動前及運(yùn)動后各時相均顯著高于A組同時相，表明大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑能提高運(yùn)動機(jī)體的抗氧化能力，減小過氧化損傷，從而減輕IX)MS。

3.3大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑抗氧化能力的比較

人體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)可分為3級，不同的抗氧化劑在不同的階段實(shí)現(xiàn)其功能：一級抗氧化劑，如SOD、GSH Px等，可防止新的自由基產(chǎn)生；二級抗氧化劑，如維生素C、尿酸等，能在已產(chǎn)生自由基激發(fā)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)前將之清除；三級抗氧化劑，如DNA修復(fù)酶、蛋氨基氧硫基還原酶等，能修復(fù)被自由基損傷的細(xì)胞。

在本研究中，大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑各項(xiàng)抗氧化指標(biāo)的變化趨勢有一定的差異，表現(xiàn)為：B組運(yùn)動員血SOD、GSH—Px水平運(yùn)動后各時相均高于C組同時相，其中運(yùn)動后即刻SOD水平呈非常顯著性差異；B組運(yùn)動員血MDA水平運(yùn)動后48 h顯著低于c組同時相。引起該結(jié)果的原因可能是：大蒜素組運(yùn)動員運(yùn)動時間(47.2+4.2)長于聯(lián)合抗氧化劑組(46.414.1)，可能消耗了更多SOD、GStJ Px等酶促體系中的抗氧化物來減少新的自由基產(chǎn)生，使聯(lián)合抗氧化劑似更有利于提高SOD與GSH Px水平，限制MDA的升高幅度。雖然c組運(yùn)動員運(yùn)動時間長于B組，但c組運(yùn)動員血TAOC水平運(yùn)動后24 h與48h均高于B組同時相，但指標(biāo)無顯著性差異。對于大蒜素相比聯(lián)合抗氧化劑所體現(xiàn)的更有利于T-AOC水平提高的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們理解為：本研究中組成聯(lián)合抗氧化劑的3種物質(zhì)V。Vc與se均屬非酶促體系，可通過分解過氧化物，阻斷過氧化鏈，在已產(chǎn)生自由基激發(fā)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)前將之清除來發(fā)揮重要作用，并不能防止新的自由基產(chǎn)生，也不能修復(fù)被自由基損傷的細(xì)胞；而大蒜素的消除自由基作用可能體現(xiàn)在更多的階段，從而使大蒜素具備更好的抗氧化能力。該結(jié)果的出現(xiàn)是否由于量效關(guān)系還有待進(jìn)一步深入研究。4結(jié)論

B、c組運(yùn)動員運(yùn)動后各時相下肢肌肉酸痛程度均顯著低于A組，且B組(46.4±4.1)min、c組(47.2±4.2)mln運(yùn)動時問均明著長于A組(42.0±2.4)min，提示大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑可能具有減緩大強(qiáng)度離心運(yùn)動所致DOMS的功效。

B、c 2組血清T-AOC水平運(yùn)動后各時相均顯著高于A組同時相，其中B組運(yùn)動后即刻、24 h與C組各時相呈非常顯著性差異；B、c 2組服藥后SOD水平有所升高，運(yùn)動后即刻(P<0.05)、24 h(P-<0，01)SOD活性B組高于A組，運(yùn)動后48 hB、c 2組均高于A組；B、C 2組MDA水平運(yùn)動后24 h低于A組(P<0.05)，其他各時相升高幅度均低于A組；運(yùn)動后即刻B、c 2組血清GSH-Px活性高于A組(P<0.05)，B組運(yùn)動后48 h高于A組(P<0.01)。以上結(jié)果提示：大蒜素可能通過清除自由基與減輕鈣超載介導(dǎo)的細(xì)胞損傷等作用，而3種單體抗氧化劑Vr、Vc及se通過協(xié)同抗氧化與維持生物膜的結(jié)構(gòu)和功能的作用，減小大強(qiáng)度離心運(yùn)動引起的自由基損傷和細(xì)胞膜通透性改變，減輕IX)MS。

C組運(yùn)動員運(yùn)動時間(47.2±4.2)長于B組(46.4±4.1)，且血T AOC水平運(yùn)動后24 h與48 h均高于B組同時相的變化結(jié)果提示：大蒜索可能較聯(lián)合抗氧化劑具有更好的抗氧化能。參考文獻(xiàn)：

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