郝永娟　霍建飛　高葦　劉春艷　王勇

摘要：采用抑菌圈法和含毒介質法測定幾種殺菌劑對黃瓜細菌性斑點病和大白菜軟腐病的抑制作用。結果表明，抑菌效果較好的為農(nóng)用鏈霉素、新植霉素和水合霉素；丙森鋅對黃瓜細菌性斑點病較好，而對大白菜軟腐病則較差；氫氧化銅、噻菌銅及中生菌素抑制作用一般；春雷霉素抑菌活性較差。

關鍵詞：殺菌劑；防治； 黃瓜細菌性斑點??；大白菜軟腐病

中圖分類號： S642.2 文獻標識碼： A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006－6500.2012.06.022

黃瓜細菌性斑點病又稱黃瓜細菌性角斑病，是黃瓜生產(chǎn)中危害較重的一種病害,以保護地受害最重,相對濕度在80%以上,葉面有水膜時極易發(fā)病,屬低溫、高濕病害。晝夜溫差大、結露重且時間長時發(fā)病重。大白菜軟腐病是一種重要的細菌性病害,在全國各地均有發(fā)生，對于生長期和儲藏期的大白菜都能造成危害，嚴重影響大白菜的產(chǎn)量與品質。在適宜的環(huán)境條件下，可造成大白菜減產(chǎn)50%以上，甚至絕收。這兩種病害是目前天津地區(qū)蔬菜生產(chǎn)上發(fā)病頻繁、危害嚴重的細菌性病害。及時控制病害的發(fā)展，篩選有效的防治藥劑，對指導生產(chǎn)具有重要意義。當前防治細菌性病害以抗生素和銅制劑為主，筆者選用了幾種常見藥劑對黃瓜細菌性斑點病原菌及大白菜軟腐病菌進行了室內(nèi)抑菌測定，以為田間防治細菌性病害提供科學依據(jù)。

1材料和方法

1.1材 料

供試菌株：黃瓜細菌性斑點?。≒seudomonas syringaepv. Lachrymans）;大白菜軟腐病(Erwinia carotovora subsp. carotovora)，均為天津市植物保護研究所蔬菜病害室分離保存，具中等致病力的菌株。

供試藥劑：72%農(nóng)用鏈霉素WP（石家莊曙光制藥廠）；88%水合霉素SP(成都普惠生物工程有限公司)；90%新植霉素（石家莊曙光制藥廠）；53.8%可殺得（有效成分為氫氧化銅）干懸浮劑（美國杜邦公司）；3%克菌康（有效成分為中生菌素）WP（廈門凱立生物制品有限公司）；20%龍克菌（有效成分為噻菌銅）懸浮劑（浙江龍灣化工有限公司）；70%丙森鋅WP（拜耳作物科學公司）；6%春雷霉素WP(興農(nóng)藥業(yè)上海有限公司)。

1.2方法

采用抑菌圈法測定， 供試黃瓜細菌性斑點病菌株及大白菜軟腐病菌株在LB平板上培養(yǎng)12 h,長滿平皿后采用倍量稀釋法將菌液稀釋為108 cfu·mL-1。將滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)加入45 ℃左右的LB培養(yǎng)基10 mL，自然冷卻、凝固后，用微量移液槍加入500 μL菌液,用L型滅菌玻棒涂抹均勻。將參試藥劑分別稀釋5個濃度梯度，放入直徑5 mm的滅菌紙碟，吸取藥液后放入平板上，每皿3個，每個濃度3皿重復，以吸附無菌水作空白對照。置于28 ℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24 h后調查抑菌圈的大小，比較不同藥劑的抑菌效果。

采用含毒介質法中的最低抑制濃度法測定,每種藥劑選5個濃度進行多次測定,求抑菌最低有效濃度。將配置的系列藥液濃度4 mL分別與定量36 mL LB培養(yǎng)基混合，充分搖勻后倒入3個平皿（直徑9 mm）內(nèi)，待其凝固后用接種環(huán)挑取少許培養(yǎng)好的菌苔，在含藥培養(yǎng)基上劃線, 置于28 ℃下培養(yǎng)2 d后,檢查細菌生長情況,每種濃度重復3次,計算抑菌最低有效濃度，并以無菌水作空白對照。在培養(yǎng)基平板上有細菌生長的, 用“+”表示,該濃度就用“C+”表示;無細菌生長或接菌點干縮者為抑制生長,用“-”表示,該濃度就用“C-”表示。計算方法:每種藥劑設5個濃度,根據(jù)公式C′=（C++C-）/2,求出抑菌最低有效濃度C′,再求該藥劑3次重復試驗的平均值C= (C′1+C′2+C′3)/3, 該平均值即為該藥劑的抑菌最低有效濃度。

2結果與分析

2.1 藥劑對病菌的抑制作用

3結論與討論

參試的8種藥劑對黃瓜細菌性斑點病和大白菜軟腐病菌均表現(xiàn)出不同程度的抑制效果。綜合抑菌圈法和含毒介質法，農(nóng)用鏈霉素、新植霉素、水合霉素效果均很好；丙森鋅對黃瓜細菌性斑點病菌表現(xiàn)較好的抑菌效果，而對于大白菜軟腐病菌的抑制作用較差；氫氧化銅、噻菌銅、中生菌素及春雷霉素有一定的抑菌活性。

黃瓜細菌性斑點病和大白菜軟腐病是蔬菜生產(chǎn)中最主要的細菌性病害，分別為丁香假單胞菌和軟腐歐文氏菌引起的。農(nóng)用鏈霉素是防治多種細菌病害的抗生素類藥劑，對黃瓜細菌性斑點病和大白菜軟腐病同樣有很好的治療效果。新植霉素為農(nóng)用鏈霉素和土霉素的混劑，集合兩種抗生素的抑菌位點，抑菌作用較好；水合霉素可以阻斷菌體蛋白質的合成和DNA的復制，對細菌有較好的殺滅作用，對長期使用農(nóng)用鏈霉素產(chǎn)生抗性的病菌作用更好。丙森鋅是具廣譜作用的殺菌劑，具有保護作用，在發(fā)病前應用效果較好；春雷霉素是殺菌譜較廣的抗生素，對多種真菌和細菌均有抑制作用；中生菌素對細菌具有很強的觸殺作用，對植物滲透性強，但不內(nèi)吸，因而具有很好的保護作用。氫氧化銅即可殺得為無機銅的殺菌劑，可殺得是一種極細微的可濕性粉劑，呈多孔針形晶體，在單位質量上所具有的顆粒最多，比其它銅制劑更能釋放出大量的可殺菌的二價銅離子。噻菌銅為噻唑類有機銅殺菌劑，集噻唑基團及二價銅離子的雙重殺菌作用，對多種細菌病害均有較好的抑制作用。

本試驗僅是幾種藥劑在離體條件下對黃瓜細菌性斑點病和大白菜軟腐病病菌的相對抑制效果，具體評價應進行藥劑的毒力測定和殺菌劑在植株上的防治效果試驗。參試的8種藥劑均為市場上廣泛應用的藥劑，抗生素類藥劑在生產(chǎn)應用時應注意使用次數(shù)及濃度，避免抗藥性的產(chǎn)生及對人畜的安全；無機銅類殺菌劑應避免高濃度藥害的發(fā)生。

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