王靈娟，鄭世民

（東北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學學院，黑龍江 哈爾濱 150030）

血液的有形成分主要由紅細胞（red blood cell，RBC）、白細胞（white blood cell，WBC）和血小板三部分組成，對于RBC人們一直認為是血液內(nèi)數(shù)量最多的有形成分，具有運輸O2和CO2的功能，在機體內(nèi)只有WBC執(zhí)行免疫功能。然而，自Siegel等[1]在1981提出了“紅細胞免疫系統(tǒng)（red cell immune system，RCIS）”的概念后，打破了人們的傳統(tǒng)觀念，相繼引起了國內(nèi)外學者們的高度重視，但與人類RBC免疫功能方面的研究相比，動物RBC免疫功能的研究比較晚，特別是禽類RBC免疫功能方面的研究甚少。本文對禽類RBC免疫功能及其與某些疾病的研究進行了綜述。

1 RBC免疫功能的發(fā)現(xiàn)

1930年相關(guān)文獻報道，錐蟲在抗血清及補體存在時可黏附到人類RBC上，并且對不同人的RBC黏附能力不同，推測RBC膜上存在著免疫相關(guān)物質(zhì)。20世紀50年代Nelson R A[2]首次發(fā)現(xiàn)哺乳動物的RBC具有清楚IC的功能，1963年Nishioka R[3]證實，上述黏附是因為RBC表面存在補體C 3b受體（C 3breceptor，C 3bR）的原因。Fearon D T[4]從RBC膜上分離出CR－1，并對其進行定性、定量研究，證明血液中95%以上的CR－1都存在于RBC膜上。Medof M 等[5]證明RBC的CR－1黏附IC后能抑制IC的致炎作用。隨后國內(nèi)外學者陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，血清中存在一種紅細胞免疫黏附促進因子、自身RBC能促進T淋巴細胞產(chǎn)生γ－干擾素、紅細胞NK細胞增強因子（natural killer enhancing factor，NKEF）的分泌，RBC還可產(chǎn)生特異性腫瘤壞死因子誘導因子（tumor necrosis factor－inducible factor，TNFIF）及RBC趨化因子受體（erythrocyte chemokine receptor，ECKR），從此更新了人們對RBC功能的傳統(tǒng)認識，對RBC免疫的研究也逐漸成為熱點。

2 RBC免疫相關(guān)物質(zhì)

RBC含有許多與免疫相關(guān)的物質(zhì)，如補體受體（complement receptor，CR）CR－1、CR－3、CD（cluster of diferentiation，CD）分子、LFA－3、MCP、DAF、SOD、阿片肽受體、NK細胞激活因子（natural killer activating factor，NKAF）以及ECKR等，這些物質(zhì)都是通過 RBC 表面 CR－1發(fā)揮免疫功能[6－7]。

2.1 補體受體

雖然禽類的RBC（有核、呈橢圓形）與哺乳動物的RBC有所不同，有研究表明，鵪鶉、鵝、茶花雞、云南麻鴨及櫻桃谷鴨等的RBC上存在C 3bR，說明了禽類RBC膜上存在C 3bR，也證明了RBC免疫不但在哺乳動物中存在，在禽類體內(nèi)也同樣成立[8]。禽類的RBC上存在著C 3bR，如CR－1和CR－3，其中重要受體之一CR－1，主要表達于RBC、中性粒細胞、單核細胞、B淋巴細胞、T淋巴細胞、樹突狀細胞等[9]。RBC表面的CR－1是RBC免疫黏附部位，機體內(nèi)大多數(shù)補體免疫復(fù)合物（C 3bimmune complex，C 3b－IC）都是通過CR－1連接到 RBC膜上，該受體結(jié)合C 3b的能力比其他受體強，因此，CR－1的多少、表達的高低直接影響了循環(huán)IC的清除[10]。

C 3bR，能將IC充分黏附到RBC膜上，通過血液循環(huán)運送到肝臟及脾臟中，通過巨噬細胞發(fā)揮作用而被清除，而RBC自身不受破壞，從IC解離后重新進入血液循環(huán)，繼續(xù)執(zhí)行其功能[11－13]。

RBC膜上的CR－1是一種分子質(zhì)量為160ku～260ku的單鏈糖蛋白，具有多肽性，有4個功能相同的同種異型[14]；CR－3則是由α、β兩條鏈構(gòu)成的分子質(zhì)量分別為165ku和95ku的糖蛋白。研究表明，通過基因重組技術(shù)產(chǎn)生的可溶性CR－1能阻斷由IC引起的補體活化產(chǎn)生炎癥的超急性排斥反應(yīng)、異種移植引起的超急性排斥反應(yīng)以及自身免疫性疾病等[15－16]。

2.2 CD分子

RBC所含的CD分子主要包括CD 58、CD 55、CD 44等，分布于RBC表面。

2.2.1 CD 58 又稱為LFA－3，是免疫細胞及RBC膜上廣泛存在的糖蛋白，分子質(zhì)量為55ku～70ku，結(jié)構(gòu)與CD2相似，能夠與T細胞表面CD2相互結(jié)合，起到遞呈抗原和間接調(diào)控免疫應(yīng)答的作用，是CD2的天然配體。RBC還可通過CD 58與CD2的結(jié)合而參與細胞信號的轉(zhuǎn)導，為T淋巴細胞活化提供輔助（協(xié)同）刺激信號，T淋巴細胞被激活后，與B淋巴細胞相互作用，而促使其增殖、分化產(chǎn)生免疫球蛋白[17]。RBC的某些免疫功能，如免疫黏附功能等都是在CD 58與CD2協(xié)同作用下實現(xiàn)的。

2.2.2 CD 55 又叫DAF，是RBC表面分離出來的具有促進補體C3轉(zhuǎn)化酶衰變的免疫分子[18]。結(jié)構(gòu)為單鏈糖蛋白，分子質(zhì)量為70ku，主要表達于RBC、粒細胞、大多數(shù)淋巴細胞、單核細胞等成熟血細胞以及一些非血液系統(tǒng)的組織細胞，如皮膚、心、肺、肝細胞等[19]。DAF能與RBC膜上的多種功能蛋白（如CR1、MCP等）相互協(xié)調(diào)抑制補體活化，該抑制作用在補體激活后的級聯(lián)反應(yīng)動態(tài)調(diào)節(jié)過程中起重要作用[20]。

2.2.3 CD 44 為黏附分子中的單鏈蛋白，分子質(zhì)量為80ku～90ku，主要表達于RBC、免疫細胞、內(nèi)皮細胞及腫瘤細胞上，能夠參與細胞與細胞，細胞與基質(zhì)之間的黏附功能，并且在清除循環(huán)系統(tǒng)中轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞等發(fā)揮重要作用。

2.3 超氧化物歧化酶

超氧化物岐化酶（super oxide dismutase，SOD）具有強烈的抗氧化作用，具有清除作用，保持自由基的生成與降解處于動態(tài)平衡狀態(tài)[21]。RBC含有高濃度的SOD，能清除生物氧化產(chǎn)生的超氧陰離子自由基及氧化代謝產(chǎn)物（reactive oxygen metabolites，ROM），終止自由基連鎖反應(yīng)，及時消滅進入體內(nèi)的致病原，保護細胞免受損傷[22]。

2.4 其他物質(zhì)

RBC表面還存在一些其它免疫相關(guān)的物質(zhì)，如阿片肽受體、ECKR、NKEF等。其中，阿片肽受體表達于細胞膜上，通過與血液中的β－內(nèi)啡肽結(jié)合而調(diào)節(jié)機體的免疫功能，并且參與抗體合成、淋巴細胞增殖及NK細胞的毒性作用；ECKR，如IL－8R家族的IL－8RA，當IL－8RA與配體IL－8結(jié)合后能參與IL－8與粒細胞之間的調(diào)節(jié)等[23]。RBC膜上高密度的IL－8R，能與血清中的IL－8特異性結(jié)合，調(diào)節(jié)炎癥的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸；RBC膜上的NKEF是一種可溶性細胞因子，具有抗氧化功能，能調(diào)節(jié)NK細胞活性，增強NK細胞對腫瘤細胞的殺傷和抑制作用[23]。

3 RBC的免疫功能

3.1 清除免疫復(fù)合物

CR－1存在于禽類RBC、中性粒細胞、巨噬細胞及T、B淋巴細胞膜表面。有學者通過電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，RBC膜上的CR－1分布呈現(xiàn)散在和集簇兩種形式，其中，RBC膜表面約一半以上的CR－1以相對固定的串珠狀結(jié)構(gòu)突出且聚集成簇狀存在于RBC表面[24]。CR1的這種集簇分布形式更有利于它與C 3b－IC的結(jié)合，盡管單個 WBC表面的CR－1較RBC多，但血液中RBC的總數(shù)遠大于 WBC數(shù)，因此，RBC對清除體內(nèi)循環(huán)IC起著重要作用[25]。CR－1的這種清除免疫復(fù)合物的作用具有減少臟器、血管中免疫復(fù)合物的沉積，抑制了炎癥介質(zhì)的釋放以及激活免疫細胞等功能[26]。

3.2 增強吞噬細胞的吞噬作用

RBC含有高濃度的具有強力抗氧化作用的SOD，SOD是廣泛存在于機體中的重要金屬結(jié)合酶，SOD家族是惟一將超氧陰離子轉(zhuǎn)化為過氧化氫的抗氧化酶，可清除吞噬過程中產(chǎn)生的具有抑制吞噬作用的ROM，而促進吞噬細胞的吞噬作用，是機體內(nèi)重要的清除酶[27]。RBC對自身產(chǎn)生的各種變異細胞和侵入機體的各種有害物質(zhì)都具有免疫黏附作用，被黏附后的物質(zhì)易被吞噬細胞吞噬。

3.3 識別和儲存抗原

Garvey I S[28]通過將3H標記的牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）注入新生兔體內(nèi)后觀察發(fā)現(xiàn)，血液循環(huán)中的RBC和肝血管內(nèi)的RBC表面均黏附有3H－BSA，且存在4周～6周；當將兔血清白蛋白注入新生兔體內(nèi)時則不出現(xiàn)上述現(xiàn)象，證明了RBC具有對自身和非自身抗原具有識別和儲存的能力。

3.4 促進淋巴細胞的免疫功能

RBC具有促進淋巴細胞增殖、分化以及調(diào)節(jié)T淋巴細胞活性的功能，并可影響特定T淋巴細胞亞群對內(nèi)、外刺激的應(yīng)答[29]。

RBC膜表面的LFA－3能與T淋巴細胞膜上的CD2分子結(jié)合，促使T淋巴細胞分化，表面IL－2R表達增加，促進細胞因子的分泌。RBC還可通過將補體C 3b先降解為iC 3b，后者進一步被降解為C 3c和C 3dg－IC，而C 3dg－IC通過與B淋巴細胞上的CR2結(jié)合而誘導B淋巴細胞的增殖、分化，并產(chǎn)生抗體[30]。因此，RBC的存在與否，可直接增強或減弱由于T、B等淋巴細胞生長異常而引起的病理變化。

3.5 效應(yīng)細胞樣作用

RBC膜表面存在過氧化物酶及細胞色素氧化酶，當RBC發(fā)生免疫黏附時，局部的過氧化物酶活性增強，吞噬細胞起殺傷細胞的作用，使RBC直接銷毀黏附的抗原物質(zhì)，從而起到效應(yīng)細胞樣作用。

4 RBC免疫與禽類某些疾病

RBC免疫功能主要體現(xiàn)在紅細胞的免疫黏附（red cell immune adhesion，RCIA），在人或其他動物疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中紅細胞受體花環(huán)率（erythrocyte C 3breceptor rate，E－C 3bRR）、紅細胞免疫復(fù)合物花環(huán)率（erythrocyte immune complex rate，E－ICRR）以及RBC免疫促進因子活性和抑制因子活性均會出現(xiàn)不同程度的變化。

4.1 紅細胞免疫與禽主要傳染性疾病

4.1.1 雞傳染性法氏囊病 國外學者[31]通過對感染傳染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）的雛雞RBC免疫功能研究的結(jié)果顯示，雛雞感染IBDV后，血液中IC含量上升，E－C 3b RR下降，而E－ICRR上升，充分說明了IBDV侵入機體后引起雞RBC免疫功能降低。

4.1.2 禽流感 馬宏偉等[30]通過對雛鴨感染H5N1亞型禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）后RBC免疫功能的研究，結(jié)果表明，AIV侵入雛鴨體內(nèi)后，E－C 3bRR下降，E－ICRR上升，血清中RBC免疫促進因子活性降低，而抑制因子活性升高，導致了雛鴨RBC免疫黏附功能降低，免疫功能調(diào)節(jié)紊亂。

4.1.3 新城疫 吳凌等[32]對肉雞感染非典型新城疫后E－C 3bRR和E－ICRR變化研究表明，非典型新城疫病毒可以導致RBC免疫功能降低，CR1活性降低，E－C 3bRR下降，E－ICRR升高。

4.1.4 馬立克病 研究者對雛雞感染馬立克病病毒強毒（vMDV）后對其RBC免疫功能的變化進行研究，結(jié)果表明，雛雞感染 MDV后E－C 3bRR下降，E－ICRR明顯上升[33]。

4.1.5 腎型傳染性支氣管炎 通過對感染腎型傳染性支氣管炎病毒（Nephropathogenic infectious bronchitis virus，NIBV）NIB后的雛雞RBC免疫功能研究顯示，雛雞感染NIB后，由于RBC膜上“空位”CR1的數(shù)量和活性降低導致雞RBC免疫功能降低，致使 E－C 3bRR降低，E－ICRR升高[34]。

4.2 紅細胞免疫與禽類主要中毒性疾病

楊光等[35]對雛雞銅中毒后RBC免疫功能變化進行研究，結(jié)果表明，E－C 3bRR和E－ICRR均降低，說明過量的銅能降低C 3bR的數(shù)量和活性，導致禽類RBC免疫功能降低。

張陸等[36－37]對鉛、鎘及鉛－鎘聯(lián)合脅迫致雛雞中毒后致雛雞RBC免疫功能及RBC膜的損傷進行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，鉛、鎘單獨染毒以及鉛－鎘聯(lián)合脅迫致雛雞中毒均使RBC膜受損，免疫功能紊亂，E－C 3bRR降低，E－ICRR升高。

有學者[38]對蛋雞鋁中毒后，RBC免疫功能變化的研究結(jié)果顯示，隨鋁含量的增加E－C 3bRR明顯降低，E－ICRR則明顯升高，表明鋁能明顯抑制雞RBC免疫活性，使RBC免疫功能降低，清除IC的能力下降，血清中IC增多。

研究者通過對雛雞吸食高硒日糧后RBC免疫功能變化的研究，結(jié)果表明雛雞吸食過量的硒后，RBC數(shù)量降低，RBC免疫功能低下，同時E－C 3bRR降低，E－ICRR升高[39]。

4.3 紅細胞免疫與禽其他疾病

有學者通過對雛雞感染柔嫩艾美耳球蟲后RBC免疫功能變化進行研究，結(jié)果表明雛雞感染柔嫩艾美耳球蟲后RBC免疫功能降低，E－C 3bRR降低，E－ICRR升高[40]。

雛雞感染包涵體肝炎病毒（Inclusion body hepatitis virus，IBHV ）后，其 E－C 3bRR下降，E－ICRR上升，表明IBHV能夠引起RBC免疫功能下降，免疫調(diào)控功能失常[41]。

5 結(jié)語

綜上所述，RBC免疫功能在醫(yī)學界研究比較廣泛，近年來動物醫(yī)學界對其研究逐漸產(chǎn)生了興趣，尤其是對哺乳動物RBC免疫方面進行了相關(guān)研究，并且在臨床診斷中上得到了廣泛應(yīng)用，但在RBC免疫功能、免疫機制以及RBC免疫相關(guān)物質(zhì)的應(yīng)用還有待于進一步探討，如禽類和哺乳動物RBC的免疫相關(guān)物質(zhì)的特性、功能、免疫機制是否相同以及RBC與WBC在機體內(nèi)發(fā)揮的免疫調(diào)控機制等，從而使RBC免疫功能更加完善的為人類和動物疾病的臨診診斷和治療提供科學依據(jù)。

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