李功營 宋金帶 劉明平

紫龍雙柏油皮膚毒理學(xué)研究

李功營1宋金帶1劉明平2

（1 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣州 510405；2 廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州 510405）

觀察紫龍雙柏油對豚鼠皮膚的毒性反應(yīng)。完整皮膚和破損皮膚豚鼠各30只，隨機(jī)分為3組，即紫龍雙柏油、濕潤燒傷膏、基質(zhì)對照組組，觀察多次重復(fù)給予紫龍雙柏油對豚鼠完整及破損皮膚的皮膚刺激反應(yīng)；豚鼠60只，隨機(jī)分為3組，觀察紫龍雙柏油對豚鼠的致敏反應(yīng)。紫龍雙柏油對豚鼠完整皮膚和破損皮膚均未見明顯紅班、水腫等刺激反應(yīng)；豚鼠多次接觸紫龍雙柏油均未見紅斑、水腫等皮膚過敏反應(yīng)。紫龍雙柏油外用未見明顯皮膚毒性反應(yīng)，臨床使用是安全的。

紫龍雙柏油；皮膚毒理學(xué)；實驗研究

紫龍雙柏油以本院傳統(tǒng)中藥制劑紫龍膏和雙柏油膏為基本方加減組成復(fù)方制劑, 由紫草、當(dāng)歸、冰片、薄荷腦、樟腦、黃柏、扁柏、大黃、澤蘭、地榆、白及、虎杖等組成。李功營等對紫龍雙柏油療效實驗性深Ⅱ度燒傷大鼠的療效進(jìn)行了研究[1]，為進(jìn)一步探討其臨床用藥的安全性、紫龍雙柏油皮膚刺激性和過敏反應(yīng)，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物 白色豚鼠90只，體重250-300g，雌雄各半，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：0032425。

1.2 試劑 2，4-二硝基氯苯（DNCB），上海試劑一廠生產(chǎn)，批號：060901；硫化鋇：廣東番禺力強(qiáng)化工廠產(chǎn)品，批號051013。

1.3 藥物 紫龍雙柏油的組方及制備：紫龍雙柏油由紫草、當(dāng)歸、冰片、薄荷腦、樟腦、黃柏、扁柏、大黃、澤蘭、地榆、白及、虎杖等組成。取冰片、薄荷腦、樟腦另存?zhèn)溆?；取余下中藥用麻油浸泡過夜，第2天保持120℃加熱煎煮1h，過濾，待涼至100℃以下，取冰片、薄荷腦、樟腦混合研細(xì)成粉末后加入混勻，分裝，100℃煮沸滅菌30min即可。

美寶濕潤燒傷膏，汕頭美寶制藥有限公司產(chǎn)品，批號051006。

1.4 方法

1.4.1 紫龍雙柏油對豚鼠完整及破損皮膚的刺激性試驗 取健康豚鼠60只，實驗前24h背部兩側(cè)對稱選兩處脫毛，面積約40cm2，去毛后隨機(jī)取30只做完整皮膚組。破損皮膚組30只在脫毛區(qū)皮膚處用注射針頭劃“#”字型傷口，以有滲血為度。分別隨機(jī)分為3組：即基質(zhì)對照組、紫龍雙柏油組、濕潤燒傷膏，隨即將紫龍雙柏油（1ml/只）、濕潤燒傷膏（1g/只）均勻涂于背部皮膚，基質(zhì)對照組涂等量麻油，1h內(nèi)重復(fù)涂藥3次。給藥后分別于2、12、24、48、72h觀察涂抹處皮膚出現(xiàn)有無紅斑和水腫等情況。皮膚刺激性評分標(biāo)準(zhǔn)及評價標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)[1]進(jìn)行。

刺激分值：（紅斑反應(yīng)總分+水腫反應(yīng)總分）/動物數(shù)。

刺激分值＜0.5為無刺激；＜3為輕度刺激；＜6為中度刺激；＞6為強(qiáng)度刺激。

結(jié)果表明：紫龍雙柏油、濕潤燒傷膏對完整皮膚，破損皮膚均未出現(xiàn)紅斑和水腫等皮膚刺激反應(yīng)，刺激指數(shù)均小于0.5。

表1 多次給藥期間皮膚刺激性試驗觀察結(jié)果

1.4.2 紫龍雙柏油皮膚過敏性試驗 將30只豚鼠隨機(jī)分成3組，即紫龍雙柏油、基質(zhì)對照組和2，4-二硝基氯苯組。實驗前24h將豚鼠背部對稱兩側(cè)脫毛，面積約40cm2。致敏接觸：分別涂擦紫龍雙柏油、0.25% 2，4-二硝基氯苯各0.1ml于豚鼠左側(cè)脫毛區(qū)，基質(zhì)對照組涂等量麻油，6h后用溫水清洗。另分別于第7天、14天重復(fù)給藥1次，共3次。激發(fā)接觸：于末次給藥致敏后14d，將紫龍雙柏油、0.25%2，4-二硝基氯苯各0.1ml分別涂于右側(cè)脫毛區(qū)，6h后溫水清凈后即刻觀察，分別于24、48、72h觀察皮膚過敏反應(yīng)情況。按參考文獻(xiàn)[1]皮膚紅斑、水腫進(jìn)行評分，并計算出各組反應(yīng)平均值。按皮膚致敏性評價標(biāo)準(zhǔn)對皮膚致敏性進(jìn)行評價，并計算致敏反應(yīng)發(fā)生率。判斷受試物過敏反應(yīng)，同時觀察豚鼠有否哮喘、站立不穩(wěn)等全身性過敏反應(yīng)。實驗結(jié)果見表2。

公式：反應(yīng)平均值=（紅斑形成總分+水腫形成總分）/動物數(shù)

致敏反應(yīng)發(fā)生率=有過敏反應(yīng)豚鼠數(shù)/豚鼠總數(shù)

2 結(jié)果

表2 皮膚過敏實驗觀察結(jié)果

結(jié)果表明，各組動物精神狀態(tài)、行為活動、飲食、糞便及體重變化等情況正常，亦未出現(xiàn)哮喘、站立不穩(wěn)、休克等全身性過敏反應(yīng)。激發(fā)給藥后6、24、48、72h觀察：2，4-二硝基氯苯組豚鼠左側(cè)皮膚受試區(qū)均出現(xiàn)輕、中度紅斑，并見水腫，致敏率達(dá)100%；紫龍雙柏油、基質(zhì)對照組豚鼠均未見紅斑、水腫等皮膚過敏反應(yīng)。

3 討論

紫龍雙柏油由紫草、當(dāng)歸、冰片、薄荷腦、樟腦、黃柏、扁柏、大黃、澤蘭、地榆、白及、虎杖等加麻油高溫熬制而成。本研究結(jié)果顯示紫龍雙柏油對豚鼠完整皮膚和破損皮膚均未見明顯紅斑、水腫等刺激反應(yīng)；豚鼠多次接觸紫龍雙柏油均未見紅斑、水腫等皮膚過敏反應(yīng)。方中紫草、當(dāng)歸、黃柏、大黃、地榆、虎杖等外用均未見明顯皮膚刺激性及過敏反應(yīng)的報道。曾有外用冰片[3]致皮膚過敏的報道，其對皮膚粘膜局部有刺激作用，可引起過敏反應(yīng)，但本油膏未見皮膚刺激性和過敏反應(yīng)，可能與方中白及所含粘液質(zhì)對創(chuàng)面皮膚粘膜的保護(hù)及麻油[4]作為天然抗氧化劑，同時富含維生素E，能維護(hù)毛細(xì)血管通透性，可減低皮膚刺激性和過敏反應(yīng)有關(guān)。

[1] 李功營,宋金帶,劉明平.紫龍雙柏油治療燒傷藥效學(xué)研究[J].新中醫(yī),2011, 43(10):199-120.

[2] 徐淑云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2001, 3(4):229,238.

[3] 曲鳳麗.冰片外用致皮膚過敏反應(yīng)一例[J].齊魯藥事,2004,23(4):60.

[4] 徐強(qiáng),張朝暉.油膏制作中麻油的中醫(yī)作用機(jī)制探討[J].中醫(yī)外治雜志,2011,21(2):62-63.

10.3969/j.issn.1672-2779.2012.01-093

1672-2779（2012）-01-0150-02

（本文校對：韓世輝 收稿日期：2011-11-20）