劉 嘉,鄭軼文,李 巖,張曉紅,姜 龍,左恩俊

(1.大連醫(yī)科大學(xué) 中山學(xué)院 2008級(jí)口腔醫(yī)學(xué)專業(yè)，遼寧 大連 116085； 2.大連醫(yī)科大學(xué) 中山學(xué)院，遼寧 大連 116085； 3.大連醫(yī)科大學(xué) 口腔醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116044)

口腔印模由于直接接觸患者的唾液甚至血液, 表面常攜帶有大量細(xì)菌、病毒及真菌等病原微生物, 這些微生物不消除就會(huì)造成石膏模型的污染，最終會(huì)導(dǎo)致醫(yī)務(wù)人員、患者和技工之間的交叉感染。而常規(guī)消毒方法，如浸泡、噴涂等，會(huì)對(duì)印模及模型的精度和物理性能帶來(lái)影響[1-2]。使用消毒液調(diào)拌印模材，又會(huì)給患者口腔黏膜帶來(lái)不同程度刺激。然而應(yīng)用消毒液調(diào)拌超硬石膏，可有效解決上述問(wèn)題。本研究使用3種消毒液調(diào)拌超硬石膏，探討其對(duì)口腔常見(jiàn)細(xì)菌的殺菌效果。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

超硬石膏(上海賀利氏古莎齒科有限公司)，2% 戊二醛、0.5%84消毒液、0.5%碘伏(山東利爾康消毒科技有限公司)，蒸餾水，營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、沙保培養(yǎng)基(青島海博生物技術(shù)有限公司),表皮葡萄球菌ATCC 12228、白色念珠菌ATCC 10231、綠膿桿菌ATCC 9027(上海鑫閔生命科學(xué)有限公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備

DRP-9002型電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)，EX-200A型電子天平(沈陽(yáng)精密天平儀器有限公司)，Z型立式壓力蒸汽滅菌器(常州銳品精密儀器有限公司)， PSE型潔凈工作臺(tái)(蘇州真田潔凈設(shè)備有限公司), SK-1快速混勻器(江蘇省金壇市友聯(lián)儀器研究所),AX-2000齒科真空調(diào)拌機(jī)(天津愛(ài)鑫醫(yī)療設(shè)備有限公司)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 材料和器械消毒：實(shí)驗(yàn)所需調(diào)碗、調(diào)刀、燒杯、燒瓶、量筒等均經(jīng)121 ℃壓力蒸氣滅菌處理20 min。超硬石膏粉用電子天平稱取單份后，鋪成薄層于超凈操作臺(tái)中紫外線臭氧消毒2 h。蒸餾水和各消毒液均經(jīng)無(wú)菌處理。

1.3.2 制備細(xì)菌懸液：取4～14代表皮葡萄球菌培養(yǎng)平板,挑取菌苔,以無(wú)菌生理鹽水稀釋至濃度106個(gè)/mL。用同樣方法分別制備白色念珠菌菌懸液和綠膿桿菌菌懸液。

1.3.3 實(shí)驗(yàn)分組：制備126個(gè)直徑10 mm，厚5 mm的圓柱體硅橡膠印模，經(jīng)高溫高壓消毒后，按所染菌種分為表皮葡萄球菌組,白色念珠菌菌組和綠膿桿菌組。每組42個(gè)印模，其中2個(gè)印模不染菌灌注石膏模型后為陰性對(duì)照組。

1.3.4 染菌：用微量加樣器取10 μL菌懸液均勻涂于各組印模表面。分別用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏和無(wú)菌蒸餾水與超硬石膏粉按照22 mL∶100 g的水粉比于真空攪拌機(jī)中調(diào)拌超硬石膏30 s，然后灌注石膏模型。每組各調(diào)拌液均灌注10個(gè)石膏模型試件，無(wú)菌蒸餾水調(diào)拌組為陽(yáng)性對(duì)照組。1 h后脫模。

1.3.5 洗菌：將各試件分別投入含5.0 mL無(wú)菌生理鹽水的試管中。用電動(dòng)混勻器混合20 s，將菌洗下形成菌懸液。

1.3.6 細(xì)菌接種和培養(yǎng)：取菌懸液1 mL按一定倍數(shù)稀釋后, 取10 μL接種于滅菌培養(yǎng)基,37°恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h后觀察計(jì)數(shù)菌落數(shù),計(jì)算殺菌率。殺菌率=(陽(yáng)性對(duì)照組菌落數(shù)-消毒組菌落數(shù))/陽(yáng)性對(duì)照組菌落數(shù)×100%。由于每個(gè)石膏模型表面細(xì)菌接種量及采樣量相同,故以集落形成單位(colony-forming units,CFU)計(jì)數(shù)表示回收菌數(shù)，算得各組平均殺菌率。參照歐洲消毒實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，殺菌率達(dá)到99.99%視為消毒合格。

2 結(jié) 果

不同種類(lèi)消毒液調(diào)拌超硬石膏對(duì)3種細(xì)菌的消毒效果見(jiàn)表1。2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏調(diào)拌超硬石膏對(duì)3種細(xì)菌的殺菌率為100%，消毒合格。

表1 不同種類(lèi)的消毒液調(diào)拌超硬石膏的消毒效果Tab 1 Disinfection effects of gypsum mixed with different kinds of disinfectant

3 討 論

眾所周知，口腔印模在制取過(guò)程中會(huì)直接接觸到患者的唾液甚至血液，表面可能攜帶大量致病菌。Gerhardt等[3]研究表明傳統(tǒng)的流水沖洗最多只能去除40%～90%的細(xì)菌，如不經(jīng)過(guò)特殊消毒處理即灌注石膏模型，就會(huì)造成石膏模型的污染，成為多種傳染性疾病的感染源。

本實(shí)驗(yàn)選用的3種菌較有代表性?？谇恢袡z出的葡萄球菌多屬表皮葡萄球菌，可導(dǎo)致泌尿系統(tǒng)感染、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎等，亦可參與牙周病、口角炎等混合細(xì)菌感染[4]。白色念珠菌是歐洲殺真菌實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)(EN1257:1995)規(guī)定菌種，是口腔最常見(jiàn)真菌，特別是長(zhǎng)期使用義齒的患者，口腔中常寄生大量白色念珠菌[5]。白色念珠菌主要引起鵝口瘡、口角糜爛等黏膜皮膚感染；支氣管炎、肺炎等內(nèi)臟感染以及腦膜炎等中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染。綠膿桿菌為條件致病菌，當(dāng)機(jī)體抵抗力降低時(shí)，易引起多種感染。綠膿桿菌抵抗力較強(qiáng)，對(duì)干燥、紫外線及某些化學(xué)消毒劑有一定抵抗力[6]。

不同細(xì)菌對(duì)消毒方式有不同的耐受力，故消毒學(xué)實(shí)驗(yàn)選用的菌種應(yīng)為有代表性的標(biāo)準(zhǔn)菌株，或者是有實(shí)際意義和對(duì)消毒方法有較高耐受性的菌株[7]。目前有些對(duì)印模、模型消毒效果的評(píng)價(jià)研究，采用的細(xì)菌標(biāo)本多為混合菌液或?yàn)橐恍┑挚沽Σ粡?qiáng)的細(xì)菌，這些細(xì)菌既不是口腔常見(jiàn)菌，抵抗力又差。研究結(jié)果實(shí)際意義不大。本實(shí)驗(yàn)?zāi)M病理狀態(tài)下致病菌濃度相對(duì)較高的情況，對(duì)石膏模型進(jìn)行單獨(dú)沾染和培養(yǎng)，既能較好地反映消毒劑的消毒效果，又具有較高的臨床意義。

2%戊二醛、0.5%84消毒液、0.5%碘伏是醫(yī)院中最常用的3種消毒劑，取材方便，且均具有廣譜殺菌作用，消毒效果可靠。李磊等[5]研究結(jié)果顯示使用2%戊二醛、0.1%碘伏、0.5%次氯酸浸對(duì)沾染白色念珠菌,金黃色葡萄球菌,血鏈球菌的印模浸泡消毒5～10 min可達(dá)到消毒效果。郭華等[8]認(rèn)為利用0.5% 84消毒液調(diào)拌藻酸鹽印模材，可完全殺滅大腸桿菌和金葡菌并有效殺滅枯草芽胞桿菌和綠膿桿菌。Rentzia等[9]認(rèn)為將不可逆水膠體印模材加入到0.5% NaOCl消毒液120 s即可殺滅全部綠膿桿菌。

目前對(duì)石膏模型的常見(jiàn)消毒方法有浸泡/噴霧法、熏蒸法、微波法、紫外線照射等多種方法。但卻存在影響模型的精度、強(qiáng)度和消毒不充分等問(wèn)題，多數(shù)方法均需要特殊的設(shè)備才能完成石膏模型的消毒。周利根等[10]用2%中性強(qiáng)化戊二醛消毒液浸泡消毒模型后，浸泡消毒的模型精度和硬度與標(biāo)準(zhǔn)模型比較有明顯差異。Abdullah等[2]反復(fù)用水和0.525%次氯酸鈉浸泡Ⅲ型和Ⅳ型石膏模型，出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的線性尺寸膨脹和壓縮強(qiáng)度下降。消毒液直接調(diào)拌超硬石膏進(jìn)行自身消毒，簡(jiǎn)化了消毒程序，增加了消毒液與微生物接觸時(shí)間，在石膏凝固的過(guò)程中即完成了消毒過(guò)程，降低了繁瑣的消毒過(guò)程給終模型帶來(lái)的誤差，既能對(duì)模型表面又能徹底的滲入模型內(nèi)部從而保證了消毒效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏調(diào)拌超硬石膏,1h后脫模,對(duì)3種細(xì)菌的殺菌率為100%。且有研究表明由消毒液調(diào)拌超硬石膏粉對(duì)超硬石膏的抗壓強(qiáng)度,抗彎強(qiáng)度及精度無(wú)明顯影響[11]。因此，使用2%戊二醛、0.5% 84消毒液、0.5%碘伏調(diào)拌超硬石膏消毒法是一種簡(jiǎn)便、省時(shí)、可靠的消毒方法。

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