呂偉德 周丹 朱巖，3

（1杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，杭州 310018；2桂林理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，廣西桂林 541004；3浙江大學(xué)化學(xué)系，杭州 310028）

離子色譜法測(cè)定復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪的含量

呂偉德1周丹2朱巖2，3

（1杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，杭州 310018；2桂林理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，廣西桂林 541004；3浙江大學(xué)化學(xué)系，杭州 310028）

建立離子色譜法測(cè)定復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪含量的方法。在色譜柱為IonPac SCS1（4mm×250mm），保護(hù)柱為IonPac SCG1（4mm×50mm），淋洗液為甲烷磺酸（4mmol／L）＋乙腈（26%），流速1.0mL／min，柱溫35℃，進(jìn)樣量7μL，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)215nm的條件下，測(cè)定結(jié)果表明，卡托普利和氫氯噻嗪在0.5～25μg／mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r分別為0.9997、0.9999，回收率分別為98.11%、94.24%。方法操作簡(jiǎn)單，靈敏度高、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于復(fù)方卡托普利片的質(zhì)量控制。

離子色譜法；復(fù)方卡托普利片；卡托普利；氫氯噻嗪

1 前言

復(fù)方卡托普利片是一種常用的抗高血壓藥物，由卡托普利和氫氯噻嗪兩種有效成分組成。中國(guó)藥典對(duì)該藥中兩種有效成分含量的測(cè)定采用的是高效液相紫外分光光度法［1］。國(guó)內(nèi)大多數(shù)報(bào)道都是采用反相高效液相色譜法，以甲醇－水－緩沖溶液、甲醇－四氫呋喃－水為流動(dòng)相檢測(cè)卡托普利和氫氯噻嗪的含量［2－4］。近年來(lái)，隨著離子色譜技術(shù)的發(fā)展，離子色譜在藥物分析中應(yīng)用越來(lái)越廣泛，特別是在藥物及合成中間體的分析、復(fù)雜組分中的某一組分鑒定、藥物離子的價(jià)態(tài)及形態(tài)分析等方面都起了很大的作用［5］。建立了一種離子色譜檢測(cè)復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪含量的新方法，方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、分析時(shí)間更短、檢出限更低。目前尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器及試劑

ICS－2100型離子色譜儀（美國(guó)戴安）、VWD紫外檢測(cè)器（美國(guó)戴安）、KQ－100DE型數(shù)控超聲儀、Millipore simplicity超純水機(jī)。

對(duì)照品卡托普利和氫氯噻嗪均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；復(fù)方卡托普利片為市售藥。

甲烷磺酸（分析純），乙腈（色譜純），實(shí)驗(yàn)用水為高純水（電阻率≥18.2MΩ·cm）。

2.2 色譜條件

色譜柱為IonPac SCS1（4mm×250mm），保護(hù)柱為IonPacSCG1（4mm×50mm），淋洗液為甲烷磺酸（4mmol／L）＋乙腈（26%），流速1.0mL／min，柱溫35℃，進(jìn)樣量7μL，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)215nm。按上述條件獲得的混合對(duì)照品（A）和樣品（B）的色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 對(duì)照品A和樣品B色譜圖Figure 1.IC chromatograms of chemical reference substances（A）and sample（B）.

2.3 溶液的制備

對(duì)照品儲(chǔ)備溶液（1 000mg／L）：分別準(zhǔn)確稱取0.010g（精確至0.0001g）干燥至恒重的卡托普利和氫氯噻嗪對(duì)照品，置于10mL容量瓶中，5mL乙腈超聲溶解并用超純水稀釋至刻度，搖勻，置于4℃冰箱內(nèi)保存；

供試品溶液：取復(fù)方卡托普利片10片，研成粉末，稱取粉末適量（約相當(dāng)于卡托普利10mg，氫氯噻嗪6mg），置于100mL容量瓶中，加10mL乙腈溶解，超聲15min提取，冷卻至室溫，超純水定容至刻度，搖勻，取1mL置50mL容量瓶中，超純水定容至刻度，搖勻。

2.4 測(cè)定方法

對(duì)照品和供試品經(jīng)過(guò)0.45μm有機(jī)濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣，進(jìn)樣量7μL。

3 結(jié)果與討論

3.1 線性關(guān)系

準(zhǔn)確量取對(duì)照品儲(chǔ)備液配成濃度分別為0.5、1、2、5、25μg／mL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），濃度為橫坐標(biāo)（X）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為：

卡托普利：Y＝0.2713X－0.0428，r＝0.9997；

氫氯噻嗪：Y＝1.2883X－0.0584，r＝0.9999；實(shí)驗(yàn)表明：卡托普利和氫氯噻嗪在0.5～25μg／mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.2 精密度實(shí)驗(yàn)

取濃度為2μg／mL的對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，測(cè)得卡托普利、氫氯噻嗪峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為1.03%和0.86%，方法的穩(wěn)定性符合技術(shù)要求。

3.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

按上述色譜條件在0、1、2、3、6、8、12、18、24h測(cè)定，測(cè)得卡托普利和氫氯噻嗪含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值分別為2.53%、2.12%，結(jié)果表明：供試品溶液在配制24h內(nèi)穩(wěn)定。

3.4 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)

采取加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)法，按供試品配制方法在其中加入適量對(duì)照品配制成低、中、高3個(gè)不同的濃度點(diǎn)，以外標(biāo)法計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1，卡托普利和氫氯噻嗪的平均回收率分別為98.11%、94.24%，說(shuō)明方法有較好的準(zhǔn)確度。

表1 復(fù)方卡托普利片的回收率（n＝3）Table 1 The methodological recovery of the compound captopril tablets

3.5 樣品測(cè)定

按照2.3制備樣品溶液，在2.2色譜條件下測(cè)定，由峰面積值根據(jù)線性回歸方程計(jì)算含量（見(jiàn)表2），測(cè)量結(jié)果符合中國(guó)藥典中此藥物有效成分含量的要求，所測(cè)藥品合格。

表2 復(fù)方卡托普利片含量測(cè)定結(jié)果（n＝5）Table 2 The determination results of the compound captopril tablets ／%

4 結(jié)語(yǔ)

卡托普利和氫氯噻嗪都是有機(jī)胺類化合物，基于其在酸性條件下以有機(jī)陽(yáng)離子的形式存在，可以采用陽(yáng)離子交換柱分離檢測(cè)。首次采用離子色譜法測(cè)定了復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪的含量，方法簡(jiǎn)單，快速，結(jié)果準(zhǔn)確。若血漿或尿液經(jīng)過(guò)合適的前處理后，也可用離子色譜法進(jìn)行藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究，有利于進(jìn)一步控制并提高藥品質(zhì)量。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：578.

［2］鄔方寧，劉樹(shù)春.HPLC法測(cè)定復(fù)方卡托普利片的含量［J］.天津藥學(xué)，1997，9（2）：64－66.

［3］胡海廷，陳權(quán)，劉建華.HPLC法測(cè)定復(fù)方卡托普利片中兩種成分的含量［J］.洛陽(yáng)師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，28（5）：64－66.

［4］Ivanovic D，Medenica M，Malenovic A，et al.Validation of the RP－HPLC method for analysis of hydrochloro－thiazide and captopril in tablets［J］.PRACTITIONER’S REPORT，2004（9）：76－81.

［5］張培敏，周淡春，朱巖.離子色譜在制藥分析中的新進(jìn)展［J］.藥物分析雜志，2007，27（1）：151－155.

Determination of Contents of Captopril and Hydrochlorothiazide in Compound Captopril Tablets by Ion Chromatography

LV Weide1，ZHOU Dan2，ZHU Yan2，3
（1.HangzhouVocationalandTechnicalCollege，Hangzhou310018，China；2.CollegeofChemistryandBiologyEngineering，GuilinUniversityofTechnology，Guilin，Guangxi541004，China；3.DepartmentofChemistry，ZhejiangUniversity，Hangzhou310028，China）

An analytical method for quantitative determination of captopril and hydrochlorothiazide in compound captopril tablets by ion chromatography（IC）was established.The method was performed on IonPac SCS1（4mm×250mm）chromatographic column and IonPac SCG1（4mm×50mm）guard column.The chromatographic conditions were：the mixture of 4mmol／Lmethanesulfonic acid solution and 26%acetonitrile was used as the mobile phase；the flow rate was 1mL／min，the column temperature was 35℃；the injection volume was 7μL，and the detection wavelength was 215nm.The results showed that the calibration curves of captopril and hydrochlorothiazide had good linearity in the range of 0.5～25μg／mLwith the correlation coefficient of 0.9997and 0.9999，respectively.The average recovery for captopril and hydrochlorothiazide was 98.11%and 94.24%，respectively.The method was proved to be simple，sensitive，accurate，and reliable for evaluating the quality of compound captopril tablets.

ion chromatography；compound captopril tablets；captopril；hydrochloro－thiazide

呂偉德，男，副教授，主要從事植物栽培及生物理化分析研究。E－mail：lwd2007＠163.com

O657.7＋5；TH833

A

2095－1035（2012）03－0073－03

10.3969／j.issn.2095－1035.2012.03.023

2012－07－06

2012－07－31

浙江省自然科學(xué)基金一般項(xiàng)目（Y2110945）；浙江省科技項(xiàng)目分析測(cè)試項(xiàng)目（2011C37065）。