呂春秋 ，劉曉松 ，黃文雯 ，李湧 ，盧煒 ，寧恩創(chuàng)

（1.廣西出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，南寧 530021； 2.廣西大學(xué)輕工與食品工程學(xué)院，南寧 530004）

氣相色譜法檢測(cè)食品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉方法的改進(jìn)*

呂春秋1，劉曉松1，黃文雯2，李湧1，盧煒1，寧恩創(chuàng)2

（1.廣西出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，南寧 530021； 2.廣西大學(xué)輕工與食品工程學(xué)院，南寧 530004）

利用微量取樣及簡(jiǎn)化衍生化過程，對(duì)氣相色譜法測(cè)定食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的方法進(jìn)行改進(jìn)。用改進(jìn)后的方法對(duì)綠豆糕、全脂牛奶、威拿咖啡、車?yán)遄庸⒒始颐?種食品進(jìn)行了檢驗(yàn)，加標(biāo)回收率為91.20%～102.7%，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.13%～8.06%（n=7）。該法操作簡(jiǎn)便，靈敏度好，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)試劑的使用。

氣相色譜法；環(huán)己基氨基磺酸鈉；衍生化；微量取樣

環(huán)己基氨基磺酸鈉是一種甜味劑，其甜度是蔗糖的50倍，被廣泛應(yīng)用于食品加工中。經(jīng)過長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)，國(guó)外研究人員發(fā)現(xiàn)環(huán)己基氨基磺酸鈉的代謝產(chǎn)物環(huán)己胺對(duì)心血管系統(tǒng)和睪丸具有毒性，可誘發(fā)機(jī)體癌變?，F(xiàn)今歐盟及美洲地區(qū)已經(jīng)禁止把環(huán)己基氨基磺酸鈉添加到食物中去［1］。我國(guó)食品的種類繁多，甜味食品占很大的消費(fèi)量，同時(shí)白糖的價(jià)格較高，有的不法商家為了節(jié)省成本，往其產(chǎn)品中添加過量的環(huán)己基氨基磺酸鈉，從而嚴(yán)重危害消費(fèi)者的人身安全，因此環(huán)己基氨基磺酸鈉的監(jiān)測(cè)非常重要［2］。

我國(guó)最新國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2760-2011［3］中規(guī)定環(huán)己基氨基磺酸鈉在食品中的使用量為0.65～8.00 g／kg之間。目前國(guó)內(nèi)外檢測(cè)食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉含量的主要方法有氣相色譜法、比色法、薄層色譜法［4］、高效液相色譜法［5］、離子色譜法［6,7］、氣相色譜／質(zhì)譜儀聯(lián)用法［8,9］，其中氣相色譜法是應(yīng)用最多的方法，GB／T 5009.97-2003［4］是目前國(guó)內(nèi)檢測(cè)食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉最常用的方法。在實(shí)際工作中，該方法的樣品處理步驟過于繁雜，且試劑消耗量大，衍生化步驟繁瑣。筆者對(duì)用氣相色譜檢測(cè)食品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉含量的國(guó)標(biāo)法進(jìn)行了改進(jìn)，簡(jiǎn)化了檢測(cè)步驟，減少了試劑的使用量，使其檢測(cè)時(shí)間縮短，操作更簡(jiǎn)易，同時(shí)降低了檢測(cè)的成本。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：7890A-FID型，美國(guó)Agilent公司；

超聲波清洗器：KQ5200E型，昆山市超聲儀器有限公司；

臺(tái)式離心機(jī)：L-420型，長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司；

渦旋振蕩器：VOTEX GENIE2型，美國(guó)SIENTIFIC INDUSTRIES INC公司；

振蕩器：YAMATO-SA300型，日本YAMATO SCI-ENTIFIC CO.，LTD 公司；

循環(huán)冷卻機(jī)：JULBAO FP40-MC型，德國(guó)優(yōu)萊博技術(shù)（北京）有限公司；

正己烷：HPLC級(jí)；

氯化鈉：分析純；

硫酸溶液：100 g／L；

亞硝酸鈉溶液：50 g／L；

環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品：純度為99%，編號(hào)Schlosser-str 6A-86199，德國(guó) Dr-Ehrenstorfer GmbH-Bgm公司。

1.2 氣相色譜測(cè)定條件

色譜柱：DB-FFAP氣相色譜柱，60 m×0.32 mm,1 μm；H2流速：40 mL／min；N2流速：25 mL／min；空氣流速：400 mL／min；進(jìn)樣口溫度：230℃；檢測(cè)器溫度：250℃；升溫程序：初始溫度為70℃，保持13 min，以 25℃／min升溫至170℃，保持1 min；進(jìn)樣量：1 μL；用保留時(shí)間定性，峰面積外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。

1.3 樣品處理

稱取干樣1 g（濕樣2 g）于15 mL離心管中，加水至 5 mL，渦旋 1 min，超聲 30 min，以 3 500 r／min離心5 min，取1 mL上清液于15 mL離心管中，加水至2 mL，置于冰浴中，依次加入0.5 mL 硫酸溶液，0.5 mL 亞硝酸鈉溶液，混勻，保持冰浴條件，置于振蕩器上振蕩30 min，加入約0.3 g的氯化鈉，溶解后加入1 mL正己烷，渦旋1 min，以3 500 r／min離心5 min，最后吸取正己烷層裝瓶，待進(jìn)樣。

含脂肪及蛋白質(zhì)較多的樣品，在樣品前處理時(shí)需要除去其所含的脂肪和蛋白質(zhì)，避免影響樣品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的準(zhǔn)確定性與定量［10］；對(duì)于饅頭等蓬松樣品，則需加大浸泡水分的量，使其完全浸透樣品，最后收集所有的提取液進(jìn)行濃縮，濃縮至與普通樣品離心后上清液的量相當(dāng)。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

取0.05 g環(huán)己基氨基磺酸鈉固體標(biāo)樣配制成濃度為10 mg／mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別取1，0.5，0.25，0.125，0.065 mL置于15 mL離心管中，加水定容至1 mL，制得 10，5，2.5，1.25，0.065 mg／mL 系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，進(jìn)樣分析，以質(zhì)量濃度對(duì)峰面積進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)譜圖

在設(shè)定的色譜條件下，得到標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液（1 mg／g）的氣相色譜圖如圖1所示。由色譜圖可知環(huán)己基氨基磺酸鈉的保留時(shí)間為13.255 min左右，且響應(yīng)值高，出峰清晰。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

對(duì)1.4中系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣分析，以質(zhì)量濃度（X，mg／mL）對(duì)色譜峰面積（Y）進(jìn)行線性回歸，得到線性回歸方程為Y=87.016 960 7X-7.835 628 9，線性相關(guān)系數(shù)r=0.999 5。

圖1 環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

以信噪比（S／N＝3）計(jì)算，環(huán)己基氨基磺酸鈉的檢出限為4 mg／kg。

2.3 精密度試驗(yàn)

稱取兩個(gè)樣品，按檢測(cè)方法進(jìn)行平行試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見表1。由表1可知，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.13%～8.16%,表明該方法的精密度較高。

表1 精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4 加標(biāo)回收試驗(yàn)

取綠豆糕、全脂牛奶、威拿咖啡、車?yán)遄庸⒒始颐?種常見食品進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)，加標(biāo)量分別為1.0，1.5，2.0 mg，試驗(yàn)結(jié)果見表2。結(jié)果表明該方法的加標(biāo)回收率在91.20%～103.04%之間，符合檢測(cè)要求。

表2 加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)語(yǔ)

用微量法檢測(cè)食品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉，該方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)耗時(shí)少，食品稱樣量小，減少了實(shí)驗(yàn)試劑的用量，可以同時(shí)檢測(cè)大批量樣品。該方法重現(xiàn)性好，檢測(cè)準(zhǔn)確度高，可應(yīng)用于果脯、蜜餞、咖啡、糕點(diǎn)等食品中環(huán)己基氨基璜酸鈉的檢測(cè)。

［1］沈偉健，黃娟，沈崇鈺，等.氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定含蛋白食品中的甜蜜素［J］.分析試驗(yàn)室，2007，26(6)： 93-95.

［2］劉先華.氣相色譜法測(cè)定糕點(diǎn)中環(huán)己基氨基磺酸鈉的方法改進(jìn)［J］.食品工程，2010，6(2)： 61-63.

［3］GB 2760-2011 食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)［S］.

［4］GB／T 5009.97-2003 食品中環(huán)己基氨基璜酸鈉的測(cè)定［M］.

［5］王敏，郭德華，韓麗，等.HPLC法快速分離和檢測(cè)食品中微量甜蜜素含量［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17(18)： 1 421-1 422.

［6］傅暉蓉，謝維平，黃盈煜，等.自動(dòng)淋洗－電導(dǎo)離子色譜法測(cè)定食品中甜蜜素［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17(12)： 126-128.

［7］鐘志雄，梁春惠，姚敬，等.離子色譜法測(cè)定食品中的甜蜜素和苯甲酸［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2005，15(9)： 1 062-1 064.

［8］姜宏，于維森，曲青.用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）確證酸奶中甜蜜素［J］.職業(yè)與健康，2007，17(1)： 65-66.

［9］史玉坤，喻麗娟.甜蜜素衍生產(chǎn)物的色譜／質(zhì)譜確定［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2006，16(5)： 617-618.

［10］林娟.食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的氣相色譜分析［J］.科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào)，2009，25： 120.

Improvement of Gas Chromatography Method for Determination of Sodium Cyclamate in Food

Lu Chunqiu1, Liu Xiaosong1, Huang Wenwen2, Li Yong1, Lu Wei1, Ning Enchuang2
（1.Technical Center of Guangxi Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau，Nanning 530021，China； 2. Institute of Light Industry and Food Engineering of Guangxi University，Nanning 30004，China）

The gas chromatography method used for the determination of the sodium cyclamate in food was improved by using trace sampling and simplifying the process of derivatization. Mungbean cake，whole milk, Whaler coffee，cherries preserved fruit and royal plum were detected by the improved method. The recoveries were 91.20%-102.7%，relative standard deviation of detection results was 1.13%-8.06%(n=7). The improved method is feasible，simple，sensitive and accurate，and it saves the amount of experimental reagents.

gas chromatography method; sodium cyclamate; derivatization; trace sampling

O657.7

A

1008-6145（2012）04-0037-03

10.3969／j.issn.1008-6145.2012.04.011

* 廣西大型儀器協(xié)作網(wǎng)科研項(xiàng)目

聯(lián)系人：劉曉松； E-mail： lxs3344@126.com

2012-05-29