摘要：目的：建立測(cè)定火炭星膠囊中鹽酸小檗堿含量的高效液相色譜方法。方法：采用InertsilODS-3色譜柱（Φ4.6μm×250mm），流動(dòng)相為乙腈-0.4%磷酸（體積比22∶78），流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為349nm。結(jié)果：鹽酸小檗堿在0.06~1.2μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，平均回收率為100.7%，RSD=1.4%（n=9）。結(jié)論：所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好，可作為火炭星膠囊質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)的依據(jù)。
　　關(guān)鍵詞：火炭星膠囊；鹽酸小檗堿；高效液相色譜法；含量測(cè)定
　　中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
　　文章編號(hào)：1007-2349（2011）03-0053-02
　　火炭星膠囊是由火炭星、香菇、黃連、苦參、天花粉等22味中藥組成的純中藥制劑，具清熱解毒、活血化瘀、軟堅(jiān)散結(jié)、消痼排毒、祛疴除邪、扶正培本的功效。黃連，清熱燥濕、瀉火解毒，其有效成分為鹽酸小檗堿，為處方中君藥。筆者參照有關(guān)文獻(xiàn)［1~2］，采用高效液相色譜法測(cè)定該制劑中鹽酸小檗堿的含量，為控制該制劑質(zhì)量控制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　1儀器與試藥
　　島津2010A液相色譜儀系統(tǒng)，配島津LCsolution工作站；乙腈（色譜級(jí)），水（超純水），其余試劑均為分析純；鹽酸小檗堿對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，含量測(cè)定用，編號(hào)：0773-9910），火炭星膠囊（云南文山民族民間醫(yī)藥研究所）
　　2方法與結(jié)果
　　2.1色譜條件與系統(tǒng)實(shí)用性試驗(yàn)色譜柱：InertsilODS-3色譜柱（Φ4.6μm×250mm）；流動(dòng)相：乙腈-0.4%磷酸體積比（22：78）；檢測(cè)波長(zhǎng)：349nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL；流速1.0mL/min。
　　2.2溶液的制備精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加流動(dòng)相制成對(duì)照品儲(chǔ)備溶液①（0.01202mg?mL-1）、對(duì)照品儲(chǔ)備溶液②（0.1202mg?mL-1）及對(duì)照品溶液（0.024mg?mL-1）。取火炭星膠囊10粒，精密稱定，研細(xì)，取細(xì)粉0.5g，精密稱定，精密加入流動(dòng)相25mL，稱定重量，超聲處理30min，靜置60min，稱重，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。按火炭星膠囊處方及制備工藝制備缺黃連藥材的陰性樣品，按供試品溶液的制備法制備，作為陰性對(duì)照品溶液。
　　2.3方法學(xué)考察干擾性試驗(yàn)：精密吸取2.2項(xiàng)下3種溶液各10μL，注入液相色譜儀。結(jié)果供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上有相應(yīng)的色譜峰，而陰性對(duì)照品溶液則無(wú)，表明陰性對(duì)照品溶液對(duì)測(cè)定無(wú)干擾（見圖1）。
　　2.3.1線性關(guān)系考察精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備溶液①5μL、對(duì)照品儲(chǔ)備溶液②1、2、3、5、7、8、10μL注入液相色譜儀。以鹽酸小檗堿進(jìn)樣量x對(duì)峰面積值Y作線性回歸，回歸方程為Y=3459195x+7058，r=0.99998（n=8），鹽酸小檗堿在0.06~1.2μg范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。
　　2.3.2重復(fù)性試驗(yàn)分別精密稱取同一批樣品6份，按供試品溶液制備法制備溶液，進(jìn)樣，結(jié)果RSD=1.9%（n=6）。
　　2.3.3穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，測(cè)定6次，每次間隔4h，結(jié)果峰面積值的RSD=1.2%（n=6）。表明供試品溶液在室溫保存24h內(nèi)測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定。
　　2.3.4加樣回收試驗(yàn)精密稱取已知鹽酸小檗堿含量的同一批樣品（0.8341mg?g-1）9份，分別精密加入對(duì)照品儲(chǔ)備溶液②3、4、6mL，各3份，揮干溶劑，按供試品溶液的制備法制備并測(cè)定含量，計(jì)算回收率，平均回收率為100.7%，RSD=1.4%（n=9）。
　　2.4樣品含量測(cè)定取本品適量，按供試品溶液的制備法制備溶液2份，分別精密吸取10μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算。12批樣品樣品鹽酸小檗堿的含量分別為0.20、0.15、0.15、0.25、0.20、0.22、0.25、0.25、0.26、0.26、[LL]0.27、0.30mg/粒（n=2）。
　　3討論
　　火炭星膠囊成分復(fù)雜，測(cè)定干擾較多，經(jīng)反復(fù)篩選，選定以乙腈-0.4%磷酸（體積比22：78）為流動(dòng)相。采用此流動(dòng)相，基線平穩(wěn)，樣品中鹽酸小檗堿峰形對(duì)稱，與相鄰色譜峰分離度較好，保留時(shí)間適宜，系統(tǒng)穩(wěn)定。通過(guò)對(duì)不同流動(dòng)相比例與流速、不同品牌色譜柱及不同液相色譜儀測(cè)定結(jié)果的考察，認(rèn)為所采用測(cè)定方法具較好的適應(yīng)性。結(jié)果表明所用方法重復(fù)性良好，回收率高，操作簡(jiǎn)便，可用于該制劑的質(zhì)量控制。[KH*1D]
　　參考文獻(xiàn)：
　　［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2005年版［M］.一部.北京：北京化學(xué)工業(yè)出版社，2005：213~214.
　　［2］王寶芹.中成藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2001：34~40.
　　（收稿日期：2010-12-16）