金 偉，閆夢(mèng)菲，胡超云，徐亞琴，謝 茵，全 紅，畢小平 (山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院基礎(chǔ)綜合實(shí)驗(yàn)室，太原 03000;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;通訊作者，E-mail:bixping@yahoo.com.cn)

完整的皮膚是人體的天然屏障，在其保護(hù)下人體能夠抵抗外來(lái)病菌的感染，不會(huì)導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生病變，但是一旦皮膚受損，造成與外界相通，甚至完全裸露［1］，各種病菌由傷口侵入宿主，定植后開始生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生毒素，致使傷口膿腫、發(fā)炎，嚴(yán)重時(shí)可能導(dǎo)致潰爛甚至癌變。金黃色葡萄球菌是最為常見的導(dǎo)致感染的革蘭陽(yáng)性球菌，其后依次為表皮葡萄球菌、糞腸球菌和尿腸球菌［2，3］。

目前人們普遍采用抗生素治療傷口感染，但是長(zhǎng)時(shí)間大劑量使用抗生素，會(huì)造成患者體內(nèi)菌群失調(diào)，形成內(nèi)源性感染［4］;此外，由于濫用抗生素而出現(xiàn)的細(xì)菌的耐藥性問題，導(dǎo)致耐藥菌株越來(lái)越多，許多疾病的預(yù)防和治療面臨“無(wú)藥可用”的難題，對(duì)人類健康造成更大的威脅［5］，使臨床創(chuàng)面感染的治療面臨更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。而二氧化氯具有殺菌作用迅速，起效濃度低，不易產(chǎn)生三氯甲烷等致癌物質(zhì)，消毒作用后殘留生成物為水、氯化鈉和微量二氧化碳有機(jī)糖等無(wú)毒物質(zhì)［6］，且所進(jìn)行的毒理學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果均為無(wú)毒，無(wú)或輕微刺激性，無(wú)致突變性［7］。但是將二氧化氯用于臨床作為創(chuàng)面治療制劑的研究報(bào)道不多。同時(shí)本文首次發(fā)現(xiàn)該凝膠劑還具有快速止血的作用。

本文以自制二氧化氯緩釋凝膠，對(duì)家兔進(jìn)行皮膚刺激性試驗(yàn)并觀察其創(chuàng)面愈合效果。結(jié)果顯示二氧化氯緩釋凝膠能夠在創(chuàng)傷表面上形成一層保護(hù)膜，切斷其與外界細(xì)菌的接觸，具有快速止血、緩釋殺菌效能。其原因是由于二氧化氯凝膠既可以隔斷創(chuàng)面與外界環(huán)境的直接聯(lián)系，其基質(zhì)還具有較強(qiáng)的生物相容性，不油膩，對(duì)傷口也起到一定的保護(hù)作用。據(jù)報(bào)道創(chuàng)面的濕潤(rùn)環(huán)境有促進(jìn)局部生長(zhǎng)因子的蓄積作用［8］，從而促進(jìn)創(chuàng)面上皮化，加速創(chuàng)面愈合［9］。二氧化氯凝膠用于治療開放性傷口的感染及快速止血，且療效滿意，為臨床患者創(chuàng)面感染的治療提供一種新的合理有效的用藥方案。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 材料與儀器 市售莫匹羅星軟膏(中美天津史克制藥有限公司09030282)，二氧化氯緩釋凝膠(實(shí)驗(yàn)室自制)，二氧化氯凝膠空白基質(zhì)(實(shí)驗(yàn)室自制)，硫化鈉(天津市北辰方正試劑廠)，甲醛(天津市北辰方正試劑廠)，醫(yī)用酒精(德州安捷高科消毒制品有限公司)，鹽酸利多卡因注射液(081109)。

1.2 動(dòng)物 試驗(yàn)家兔 6只，1.8－2.2 kg，雄性，由山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.3 單次給藥對(duì)家兔皮膚刺激性試驗(yàn)［10］

1.3.1 實(shí)驗(yàn)方法 隨機(jī)選取受試家兔3只，在脊柱兩側(cè)各選兩個(gè)3.0 cm×3.0 cm面積的去毛區(qū)，用8%的硫化鈉溶液脫毛，24 h后無(wú)破損即可使用。實(shí)驗(yàn)前用75%(V/V)乙醇消毒背部脫毛區(qū)，每只家兔4個(gè)脫毛區(qū)分別涂抹二氧化氯緩釋凝膠、凝膠空白基質(zhì)、生理鹽水、1.5%甲醛溶液，涂抹后用紗布覆蓋并用醫(yī)用橡膠固定。分別貼敷固定24 h后，移去貼敷物，用溫水清潔貼敷面并吸干。

1.3.2 觀察項(xiàng)目 觀察并記錄移去斑貼物后1 h、24 h和48 h后皮膚的紅斑及水腫情況。將無(wú)紅斑、勉強(qiáng)可見紅斑、中度紅斑、嚴(yán)重紅斑、紫紅色紅斑應(yīng)有焦痂形成等分別計(jì)為0－4.00分。無(wú)水腫、勉強(qiáng)可見水腫、皮膚隆起輪廓清楚、水腫隆起1 mm并范圍擴(kuò)大等分別計(jì)為0－4.00分。動(dòng)物紅斑形成總分與水腫形成總分之和除以動(dòng)物數(shù)為平均反應(yīng)值。反應(yīng)平均值＜0.50為無(wú)刺激，0.5－ ＜2.00為輕度刺激性，2.00－6.00 為中度刺激性，＞6.00 為強(qiáng)刺激性。

1.4 二氧化氯緩釋凝膠作用效果試驗(yàn) 取剩余3只家兔，實(shí)驗(yàn)前處理方法同1.3.1項(xiàng)下。實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水清洗，用1%鹽酸利多卡因注射液局部麻醉，在每個(gè)脫毛區(qū)制造開放性創(chuàng)傷面，以皮肉翻開、出血為度，傷口創(chuàng)面約為2.0 cm×0.2 cm。每只家兔的3個(gè)創(chuàng)傷面分別涂抹二氧化氯緩釋凝膠、凝膠空白基質(zhì)、莫匹羅星軟膏(作為陽(yáng)性對(duì)照)，第4個(gè)創(chuàng)傷面不做任何處理(作為陰性對(duì)照)。其中二氧化氯緩釋凝膠和凝膠空白基質(zhì)每日一次涂于創(chuàng)傷面，莫匹羅星軟膏按照使用說(shuō)明書涂抹。之后均用紗布覆蓋并用醫(yī)用橡膠固定。觀察并記錄7 d內(nèi)各創(chuàng)傷面愈合情況，計(jì)算平均愈合率［11］:

愈合率=(術(shù)后第1天面積－照片當(dāng)天面積)/術(shù)后第1天面積×100%。

2 結(jié)果

2.1 單次給藥對(duì)家兔皮膚的刺激性 涂抹二氧化氯緩釋凝膠、生理鹽水和凝膠空白基質(zhì)的3只家兔受試部位均無(wú)紅斑、無(wú)水腫;涂抹1.5%甲醛溶液的3只家兔受試部位均在1 h觀察時(shí)出現(xiàn)中度紅斑(評(píng)分為2.00)和勉強(qiáng)可見水腫反應(yīng)(評(píng)分為1.00);24 h觀察時(shí)均出現(xiàn)勉強(qiáng)可見紅斑(評(píng)分為1.00)和無(wú)水腫反應(yīng);48 h觀察時(shí)則均無(wú)紅斑、無(wú)水腫。因此計(jì)算得涂抹二氧化氯緩釋凝膠、生理鹽水和凝膠空白基質(zhì)三種處理方式對(duì)家兔皮膚平均刺激反應(yīng)評(píng)分均為0，說(shuō)明二氧化氯緩釋凝膠、生理鹽水和凝膠空白基質(zhì)對(duì)家兔皮膚均無(wú)刺激;涂抹1.5%甲醛溶液組對(duì)家兔皮膚平均刺激反應(yīng)評(píng)分為6.00，說(shuō)明1.5%甲醛溶液對(duì)家兔完整皮膚有強(qiáng)刺激性。

2.2 二氧化氯緩釋凝膠作用效果 涂抹二氧化氯緩釋凝膠和莫匹羅星軟膏的創(chuàng)傷面在用藥7 d后傷口均愈合，傷口平均愈合率為100%，且相同時(shí)間內(nèi)涂抹二氧化氯緩釋凝膠的創(chuàng)傷面平均愈合率比涂抹莫匹羅星軟膏的創(chuàng)傷面平均愈合率高。而二氧化氯凝膠空白基質(zhì)和陰性對(duì)照的創(chuàng)傷面7 d后傷口均未能完全愈合。涂抹二氧化氯緩釋凝膠的創(chuàng)傷面用藥5 min后傷口立即止血，止血效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于莫匹羅星軟膏以及二氧化氯凝膠空白基質(zhì)和陰性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1和圖1。

3 討論

二氧化氯緩釋凝膠以卡波姆940與CMC-Na作為主要輔料基質(zhì)，可能包裹二氧化氯分子，形成骨架型的緩釋制劑，在適宜的pH條件下緩慢釋放二氧化氯并發(fā)揮作用，達(dá)到殺菌消毒、保護(hù)受傷創(chuàng)面的目的。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)，涂藥5 min后，二氧化氯緩釋凝膠能夠快速止血且止血效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于其他三組。關(guān)于二氧化氯的快速止血作用目前尚未見報(bào)道，其止血機(jī)制有待于進(jìn)一步深入的研究。

本文雖然僅對(duì)3只兔子做了開放性創(chuàng)面的藥效研究，但自制二氧化氯緩釋凝膠，用藥頻率低，一天只需一次，使用方便，具有保護(hù)創(chuàng)傷面、防止傷口感染、快速止血、愈合時(shí)間短等作用，療效滿意。需要注意的是涂擦次數(shù)不能過(guò)頻，否則傷口周圍很可能出現(xiàn)硬皮，這可能是由于二氧化氯本身的氧化性所致。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)為臨床上開放性創(chuàng)面感染的治療及愈合提供了一種有效的途徑，具有一定的臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

表1 不同方法處理后創(chuàng)面平均愈合率 (n=3)Tab 1 The average rate of the wound healing after different treatments at different time points (n=3)

圖1 不同方法處理后創(chuàng)面愈合情況Fig 1 The results of wound healing after using different treatments at different time points

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