武曉靜 徐 慧 莊件兵 趙厚民

(江蘇省理化測(cè)試中心，江蘇省食品營(yíng)養(yǎng)成分與有毒有害物質(zhì)檢測(cè)中心，南京 210042)

氣相色譜法測(cè)定甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B中的大孔樹脂有機(jī)溶劑殘留

武曉靜 徐 慧 莊件兵 趙厚民

(江蘇省理化測(cè)試中心，江蘇省食品營(yíng)養(yǎng)成分與有毒有害物質(zhì)檢測(cè)中心，南京 210042)

建立了氣相色譜法測(cè)定甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B中正己烷、苯、甲苯、萘等大孔樹脂有機(jī)溶劑殘留量的方法。以正庚烷為內(nèi)標(biāo)，樣品經(jīng)溶解直接進(jìn)樣測(cè)定，色譜柱為DB－1毛細(xì)管柱(30 m×0．25 mm，0．25μm)。在一定濃度范圍內(nèi)，有機(jī)溶劑濃度與其色譜峰面積與正庚烷色譜峰面積之比呈良好的線性，線性相關(guān)系數(shù)r＞0．999。有機(jī)溶劑添加回收率為93．8% ～100．7%，檢出限為0．125～0．5μg/mL。該方法快速、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便，能滿足大孔樹脂中苯等有機(jī)溶劑殘留的定量檢測(cè)。

甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B 大孔樹脂 氣相色譜 有機(jī)溶劑殘留 內(nèi)標(biāo)法

DM－130型大孔樹脂為苯乙烯骨架，根據(jù)大孔樹脂的基本骨架、填充劑和致孔劑的性質(zhì)，其大孔樹脂中可能含有烷烴類、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘等殘留［1，2］，因甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B的起始原料銀杏內(nèi)酯B((80%)原料在其提取過程中采用了DM－130型大孔樹脂，根據(jù)中國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅷ P《殘留溶劑測(cè)定法》［3］，其中苯屬于第一類溶劑，限度要求為0．000 2%，正己烷、甲苯、二甲苯屬于第二類溶劑，限度要求分別為0．029%、0．089%、0．217%，其它幾種溶劑在 2005年版藥典中未作具體要求，參照SFDA(The State Food and Drug Administration)對(duì)大孔樹脂的限度規(guī)定，以0．0020%計(jì)，對(duì)氣相色譜法測(cè)定樣品中可能殘留的正己烷、癸烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘等有機(jī)溶劑殘留進(jìn)行了研究。

目前有關(guān)大孔樹脂有機(jī)溶劑殘留的測(cè)定方法多數(shù)采用頂空氣相色譜法［4，5］。筆者采用直接進(jìn)樣法，建立了大孔樹脂溶劑殘留的試驗(yàn)方法。直接進(jìn)樣法不受頂空裝置的限制，具有操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，可以滿足大多數(shù)生產(chǎn)廠家苯乙烯型大孔樹脂有機(jī)溶劑殘留的檢測(cè)要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1．1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀:Varian CP－3800型，配CP－8410自動(dòng)進(jìn)樣器，氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，美國(guó)Varian公司;

正己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、正庚烷內(nèi)標(biāo)物:均為分析純，南京化學(xué)試劑有限公司;

二乙烯基苯:含量55%，上海安譜科學(xué)儀器有限公司;

萘:含量不低于99．0%，上?；瘜W(xué)試劑一廠;甲醇:色譜純;

甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B供試品:批號(hào)分別為071101、071212、091201，由某生產(chǎn)廠家提供。

1．2 色譜條件

色譜柱:DB－1毛細(xì)管柱(30 m×0．25 mm，0．25μm);氣化室溫度:220℃;柱溫:50℃，保持 3 min，以10℃/min升至200℃，再以20℃/min升至230℃，保持30 min;檢測(cè)器溫度:260℃;氮?dú)饬魉?1 mL/min;氫氣流速:30 mL/min;空氣流速:300 mL/min;分流比為 1∶10;進(jìn)樣體積:1 μL。

1．3 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液配制

分別精密量取正己烷、癸烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘適量，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶液稀釋，配制成正己烷(1 000μg/mL)、癸烷 (800 μg/mL)、苯 (500 μg/m)、甲 苯 (400 μg/mL)、二甲苯 (8 000 μg/mL)、苯乙烯 (800 μg/mL)、二乙烯基苯(800 μg/mL)、萘(800 μg/mL)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，以及正庚烷內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液(2500μg/mL)，放在4℃冰箱內(nèi)保存。使用時(shí)分別精密量取適量上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，配制成實(shí)驗(yàn)所需系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1．4 供試品溶液的配制

精確稱取銀杏內(nèi)酯衍生物供試品粉末約1．0 g于10 mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入正庚烷內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液100μL，加入適量甲醇，超聲10 min，用甲醇稀釋定容至刻度，混勻即得。

2 結(jié)果與討論

2．1 系統(tǒng)適用性

選用DB－1色譜柱，對(duì)有機(jī)溶劑標(biāo)準(zhǔn)混合溶液進(jìn)樣分析。其中二乙烯基苯中添加乙基乙烯基苯作為穩(wěn)定劑，故色譜圖中在8．766、8．907 min處有兩個(gè)乙基乙烯基苯峰，但不影響分離，目標(biāo)物均達(dá)到了良好的分離。分離度(R s)依次為 9．6、9．9、10、16、1．6、5．0、1．2、33、19、2．1、4．5、2．8、12，色譜分離結(jié)果見圖1。在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B供試品均無干擾峰。

圖1 有機(jī)溶劑色譜分離圖

2．2 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

分別精密量取1．3中配制的各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量與正庚烷內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液100μL，稀釋配制成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，編號(hào)分別為1#～5#，按1．2色譜條件分別測(cè)定。以有機(jī)溶劑與正庚烷色譜峰的峰面積之比為縱坐標(biāo)(y)，以有機(jī)溶劑濃度為橫坐標(biāo)(x)進(jìn)行線性回歸，各有機(jī)溶劑的線性方程、線性范圍及其相關(guān)系數(shù)見表1。

表1 有機(jī)溶劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線及其相關(guān)系數(shù)

2．3 檢出限

按照1．2色譜條件，取1．3配制的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋至適當(dāng)濃度，進(jìn)樣分析，以3倍信噪比計(jì)算得各溶劑的檢出限分別為正己烷 0．16μg/mL、苯0．10 μg/mL、甲苯 125 μg/mL、二甲苯0．25 μg/mL、苯乙烯 0．5 μg/mL、癸烷 0．25 μg/mL、二乙烯基苯0．5 μg/mL、萘 0．25 μg/mL。

2．4 精密度試驗(yàn)

取2．2中配制的3#標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1．2色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖。計(jì)算各溶劑與內(nèi)標(biāo)物色譜峰的峰面積比值及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，各有機(jī)溶劑的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為:正己烷0．34%、苯1．2%、甲苯 0．15%、二甲苯 0．29、苯乙烯 1．3%、癸烷0．62%、二乙烯基苯 1．2%、萘 0．43%，說明本法精密度良好。

2．5 回收試驗(yàn)

分別準(zhǔn)確稱取供試品(批號(hào)為071101)3份于10 mL容量瓶中，分別加入適量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液100μL，加入適量甲醇，超聲10 min，用甲醇稀釋定容至刻度，按1．2色譜條件進(jìn)樣分析。分別計(jì)算各溶劑與內(nèi)標(biāo)物色譜峰面積比值，并計(jì)算各組分的回收率，結(jié)果見表2。

表2 回收試驗(yàn)結(jié)果

2．6 樣品測(cè)定

按照1．2色譜條件和1．4供試品溶液制備方法，采用內(nèi)標(biāo)定量法測(cè)定了批號(hào)為071101、071212、090201的3批銀杏內(nèi)酯原料中的有機(jī)溶劑殘留量，結(jié)果均未檢出。

3 結(jié)語

本實(shí)驗(yàn)建立的氣相色譜法不受頂空裝置的限制，具有操作簡(jiǎn)單、快速，測(cè)量準(zhǔn)確等特點(diǎn)，能滿足苯乙烯型大孔樹脂有機(jī)溶劑殘留的檢測(cè)要求。

［1］ 范偉贏，王柏章．大孔吸附樹脂分離法對(duì)提純中藥有效成分的影響因素［J］．廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，26(5):544－546 ．

［2］ 凌寧生，劉志青，李林，等．中藥用D－101型大孔樹脂苯系列殘留物分析研究［J］．中草藥，2002，33(2):122－124．

［3］ 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典［M］．二部．北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:附錄54．

［4］ 劉東，楊敏芝，杜守穎，等．頂空氣相色譜法測(cè)定大孔樹脂提取物中的殘留溶劑研究［J］．藥物分析雜志，2009(11):1 877－1880．

［5］ 來國(guó)防，程賓，周蘭，等．頂空氣相色譜法檢測(cè)三七總皂苷中大孔樹脂殘留物［J］．商丘師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2009(6):71－73．

ABSTRACTA method was developed for the determination of n － hexane，n － decane，benzene，toluene，styrene，naphthalene etc．residues in dimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate by GC．Sample was injected directly after dissolving with n－h(huán)eptane as internal standard．The column was DB －1 capillary column(30 m ×0．25 mm，0．25 μm)．The concentration of organic residues were linear with peak areas ratio of it to n－h(huán)eptane in certain range，correlation coefficient r＞0．999．The recoveries of organic solvents were 93．8% －100．7%，the detection limitswere in the range of0．125 －0．5 μg/mL．Themethod is fast，accurate and simple for the analysis of organic residues in dimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate．

KEYWORDSdimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate，macroporous resin，GC，organic residue

DETERM INATION OF ORGANIC RESIDUES IN DIMETHYLAM INOETHYL GINKGOLIDE B MESYLATE BY GC

Wu Xiaojing，Xu Hui，Zhuang Jianbin，Zhao Houmin
(Jiangsu Test Center for Physics and Chemistry，Jiangsu Test Center for Nutrition and Toxicant in Food，Nanjing 210042，China)

2010-10-25