李淑女，冀滿豐，黎康發(fā)

廣東省深圳市松崗人民醫(yī)院藥劑科，廣東深圳 518105

清咽口服液是根據(jù)古典醫(yī)方半夏厚樸湯加味組成，由制半夏、厚樸、茯苓、蘇葉、姜汁、赤芍、郁金、全瓜蔞、桔梗、黃芪、海浮石、石菖蒲、冰片等藥味組成，具有健脾燥熱、化痰散結(jié)、行氣開郁、活血止痛之功效，可使脾氣健旺、氣機(jī)順暢、痰郁消散，臨床試用于慢性咽炎的治療，效果顯著。本文就清咽口服液對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的解熱抗炎作用進(jìn)行藥效學(xué)研究，以期為該藥的臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試藥

清咽口服液（本課題組自行制備，每毫升相當(dāng)于原生藥1 g，用時(shí)以生理鹽水稀釋到所需濃度）；阿司匹林腸溶片（江蘇平光制藥有限公司產(chǎn)品，規(guī)格：25 mg，批號(hào)：20100718）；二甲苯（北京化學(xué)試劑廠產(chǎn)品，批號(hào)：20091221），2，4-二硝基苯酚（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：20100214），角叉菜膠（Sigma公司產(chǎn)品）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

8周齡ICR小鼠 40只，體重 18～22 g，清潔級(jí)，雌雄各半，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(粵)2008-0019；16周齡SD大鼠80只，體重180～220 g，清潔級(jí)，雌雄各半，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020。

1.3 儀器

PN002655型數(shù)字式電子體溫計(jì)（北京亞興泰機(jī)電設(shè)備有限公司），BS-124S型電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），PV-200型足趾容積測(cè)量?jī)x（成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品）。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 對(duì)2，4-二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱模型的解熱作用[1]取SD大鼠40只，隨機(jī)分為4組，即空白對(duì)照組（等體積生理鹽水），陽性藥對(duì)照組（阿司匹林0.1 g/kg），清咽口服液高劑量組（清咽口服液10.0 g/kg）、清咽口服液低劑量組（清咽口服液5.0 g/kg），每組10只，分別灌胃給藥，連續(xù)給藥3 d。末次給藥前，每隔30 min測(cè)量各鼠肛溫1次，連續(xù)2次，以平均值為基礎(chǔ)肛溫。末次給藥后30 min，按10 mg/kg劑量于每鼠背部皮下注射給予濃度為15 mg/ml的2，4-二硝基苯酚溶液致熱，分別于致熱后30、60、90 min測(cè)量各鼠肛溫1次，比較各組大鼠肛溫變化情況。

1.4.2 對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫的影響[2-3]取ICR小鼠40只，隨機(jī)分為4組，即空白對(duì)照組（等體積生理鹽水），陽性藥對(duì)照組（阿司匹林0.2 g/kg），清咽口服液高劑量組（20.0 g/kg）、清咽口服液低劑量組（10.0 g/kg），每組10只，分別腹腔注射給藥，連續(xù)給藥7 d。末次給藥后30 min，于各鼠左耳雙面涂以二甲苯0.05 ml/只，右耳不涂作為對(duì)照，20 min后處死小鼠，剪下左右耳廓，用直徑為6 mm的打孔器分別于左右耳廓相同位置取耳片，電子天平稱重，以左右兩耳重量差為腫脹度，計(jì)算腫脹抑制率。腫脹抑制率（%）=[（空白對(duì)照組腫脹度-給藥組腫脹度）/空白對(duì)照組腫脹度]×100%。

1.4.3 對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響[2-4]取SD大鼠40只，隨機(jī)分為4組，即空白對(duì)照組（等體積生理鹽水），陽性藥對(duì)照組（阿司匹林0.1g/kg），清咽口服液高劑量組（10.0g/kg）、清咽口服液低劑量組（5.0 g/kg），每組10只，分別腹腔注射給藥，連續(xù)給藥7 d。末次給藥前，以大鼠足跖容積測(cè)量?jī)x測(cè)量并記錄各鼠左后足容積。末次給藥30 min后，于每鼠左后足跖部皮下注射給予1%角叉菜膠0.1 ml，分別于致炎后0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 h以大鼠足跖容積測(cè)量?jī)x測(cè)量并記錄左后足容積各2次，取其平均值計(jì)算腫脹率。腫脹率（%）=[（致炎后左后足容積-致炎前左后足容積）/致炎前左后足容積]×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包處理數(shù)據(jù)，所有數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間采用 t檢驗(yàn)，以 P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)2，4-二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱模型的解熱作用

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，2，4-二硝基苯酚能明顯誘導(dǎo)大鼠體溫升高。清咽口服液高、低劑量組對(duì)2，4-二硝基苯酚致大鼠體溫升高均有明顯的抑制作用，與空白對(duì)照組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），高劑量組解熱作用強(qiáng)于低劑量組，與陽性藥阿司匹林解熱效果相當(dāng)。見表1。

表1 清咽口服液對(duì)2，4-二硝基苯酚致大鼠發(fā)熱模型的解熱作用（，n=10）

表1 清咽口服液對(duì)2，4-二硝基苯酚致大鼠發(fā)熱模型的解熱作用（，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05

組別 劑量（g/kg）基礎(chǔ)肛溫（℃）給藥后肛溫變化值（℃）30 min 60 min 90 min空白對(duì)照組陽性藥對(duì)照組清咽口服液高劑量組清咽口服液低劑量組-0.110.05.036.50±3.6237.05±3.6936.84±3.7236.69±3.591.42±0.040.71±0.06*0.75±0.07*0.92±0.09*1.51±0.050.73±0.07*0.78±0.07*0.94±0.08*1.39±0.040.84±0.07*0.79±0.08*0.93±0.08*

2.2 對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，二甲苯能明顯誘導(dǎo)小鼠耳腫脹。清咽口服液高、低劑量組對(duì)二甲苯致小鼠耳片急性炎癥反應(yīng)均有明顯的抑制作用，與空白對(duì)照組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），高劑量組抗炎作用強(qiáng)于低劑量組，與陽性藥阿司匹林抗炎效果相當(dāng)。見表2。

表2 清咽口服液對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹率的影響（，n=10）

表2 清咽口服液對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹率的影響（，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05

組別 劑量（g/kg）-0.220.010.0空白對(duì)照組陽性藥對(duì)照組清咽口服液高劑量組清咽口服液低劑量組耳腫脹度（mg）2.18±0.310.96±0.10*1.06±0.09*1.21±0.17*腫脹抑制率（%）-55.9651.3844.50

2.3 對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，1%角叉菜膠能明顯誘大鼠足跖腫脹。清咽口服液高、低劑量組對(duì)1%角叉菜膠引起的大鼠足跖腫脹性炎癥反應(yīng)均有明顯的抑制作用，與空白對(duì)照組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），高劑量組抗炎作用強(qiáng)于低劑量組，與陽性藥阿司匹林抗炎效果相當(dāng)。見表3。

3 討論

清咽口服液根據(jù)中醫(yī)理論及多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，并反復(fù)驗(yàn)證，由古典醫(yī)方加味及現(xiàn)代藥理研究組合而成。現(xiàn)代藥理研究表明[5-7]，組成清咽口服液的藥味多數(shù)具有祛痰、鎮(zhèn)咳、抗炎、抗菌、活血等作用，部分藥物尚可增強(qiáng)機(jī)體免疫力，從而防止病情反復(fù)發(fā)作。

本研究結(jié)果顯示，按10 mg/kg劑量于大鼠背部皮下注射濃度為15 mg/ml的2，4-二硝基苯酚溶液30 min后，各組大鼠體溫均有一定程度的升高，以生理鹽水組大鼠體溫升高最為顯著，表明大鼠發(fā)熱模型造模成功；清咽口服液各劑量組與阿司匹林組大鼠體溫升高不甚明顯，表明清咽口服液與阿司匹林均可顯著降低2，4-二硝基苯酚誘導(dǎo)的發(fā)熱大鼠的體溫，在30～90 min內(nèi)持續(xù)發(fā)揮顯著的解熱效果，清咽口服液解熱作用并呈一定的量效關(guān)系，高劑量組（10.0 g/kg）解熱作用強(qiáng)于低劑量組（5.0 g/kg），但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），與非甾體抗炎藥阿司匹林（0.1 g/kg）解熱效果相當(dāng)。

表3 清咽口服液對(duì)角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響（，n=10）

表3 清咽口服液對(duì)角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響（，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05

組別 劑量（g/kg）-0.110.05.0致炎后腫脹率（%）0.5 h 1 h 2 h 3 h 4 h空白對(duì)照組陽性藥對(duì)照組清咽口服液高劑量組清咽口服液低劑量組32.48±3.2821.31±2.09*22.37±2.46*24.79±2.50*39.27±4.1323.46±2.28*24.21±2.49*27.62±2.71*51.21±4.9126.52±2.71*25.88±2.62*31.44±3.09*54.32±4.8729.68±2.98*30.84±3.01*37.22±3.67*50.17±5.0227.42±2.64*28.15±2.92*32.43±3.30*

本研究結(jié)果亦顯示，清咽口服液有良好的抗炎作用，可明顯抑制二甲苯致小鼠耳片急性炎癥反應(yīng)及1%角叉菜膠致大鼠足跖腫脹炎癥反應(yīng)。其可在4h內(nèi)對(duì)1%角叉菜膠致大鼠足跖腫脹產(chǎn)生持續(xù)的抑制作用，且抗炎作用有劑量依賴性，高劑量組（10.0 g/kg）抗炎效果強(qiáng)于低劑量組（5.0 g/kg），但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），與非甾體抗炎藥阿司匹林（0.1g/kg）抗炎效果相當(dāng)。

本研究證實(shí)了清咽口服液具有較強(qiáng)的解熱、抗炎作用，其效果與非甾體抗炎藥阿司匹林解熱抗炎作用相當(dāng)，為臨床治療慢性咽炎提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但其解熱抗炎作用機(jī)制尚有待于進(jìn)一步深入研究。

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