馮素芳

新生兒溶血病(HDN)是由于母嬰血型不和，胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體循環(huán)使母體產(chǎn)生了相應(yīng)的Ig類抗體，該抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)，發(fā)生同種免疫而引起溶血。ABO-HDN的嬰兒黃疸較輕，且大多在出生后1～2 d出現(xiàn)黃疸，易被誤診為生理性黃疸。Rh-HDN的嬰兒產(chǎn)后立即發(fā)生溶血，出生2 h后黃疸指數(shù)可升高，必須盡快換血治療，否則，將發(fā)生膽紅素腦病或死亡［1］。因此，及時(shí)準(zhǔn)確的血清學(xué)檢測(cè)對(duì)新生兒溶血病的診斷與治療有重要價(jià)值。我院51例HDN患兒的血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年5月至2010年11月我院新生兒科送檢母嬰血型不和的新生兒黃疸血樣101例，其中男70例，女31例，男女患兒比例2.26∶1。必要時(shí)加送母親血樣本。

1.2 試劑和儀器 抗-A(B)血清，抗-D試劑，抗人球蛋白試劑，2-Me均由長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限公司提供。ABO標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞:本室自制。FYQ型免疫微柱孵育器，TD-3A型血型血清學(xué)離心機(jī)(長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限公司提供)。BASO-2002-2離心機(jī)。

1.3 方法 應(yīng)用微柱凝膠技術(shù)對(duì)母嬰標(biāo)本進(jìn)行ABO和Rh血型鑒定，患兒標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行溶血三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，具體操作參照文獻(xiàn)［2］。HDN的診斷標(biāo)準(zhǔn):母嬰血型不和，新生兒血漿和/或紅細(xì)胞放散液中檢出可致敏新生兒紅細(xì)胞的血型抗體者可診斷為HDN，以抗體放散實(shí)驗(yàn)為最終診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ABO系統(tǒng)HDN按血型統(tǒng)計(jì)結(jié)果 A型檢出率為69.2%，B型檢出率54.5%，A型HDN與B型HDN檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.57，P ＞0.05)。見表1。

表1 ABO系統(tǒng)HDN檢出率按血型計(jì)算 例

2.2 Rh系統(tǒng)新生兒溶血病統(tǒng)計(jì)結(jié)果 51例HDN中RH系統(tǒng)新生兒溶血病3例，檢出率為0.06%。A、B、AB患兒各1例，3例RH新生兒溶血病中直抗實(shí)驗(yàn)為(2+～4+)，釋放實(shí)驗(yàn)均為(3+)。見表2。

表2 Rh系統(tǒng)HDN的統(tǒng)計(jì)

2.3 檢出HDN的樣本三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性結(jié)果 ABO系統(tǒng)HDN直抗實(shí)驗(yàn)陽性率為12.5%，游離抗體實(shí)驗(yàn)陽性率為70.8%，放散實(shí)驗(yàn)陽性率為100%。RH系統(tǒng)HDN直抗實(shí)驗(yàn)陽性率為100%，游離抗體實(shí)驗(yàn)陽性率為66.7%，放散實(shí)驗(yàn)陽性率為100%。見表3。

表3 檢出HDN的樣本三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性結(jié)果 例(%)

3 討論

ABO系統(tǒng)新生兒溶血病，多發(fā)生于O型母親和A型或B型的嬰兒，本次統(tǒng)計(jì)結(jié)果A型和B型嬰兒之間的發(fā)病率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。由于自然界廣泛存在A，B血型物質(zhì)，如某些植物、花粉、細(xì)菌中，O型母親通常在受孕前就已經(jīng)接觸過A、B血型物質(zhì)的刺激，并產(chǎn)生了相應(yīng)的抗-A和抗-B的Ig抗體［3］，因此ABO血型不和而發(fā)生HDN的機(jī)率相當(dāng)大。文獻(xiàn)報(bào)道的檢出率是54.5%［4］，而本次統(tǒng)計(jì)的結(jié)果是49.0%與文獻(xiàn)的檢出率相符合。

由于新生兒A(B)抗原密度比成人低，結(jié)合抗體亦較少，再加上試驗(yàn)檢測(cè)時(shí)機(jī)即標(biāo)本送檢時(shí)間的影響，故許多新生兒ABO溶血病的標(biāo)本直接實(shí)驗(yàn)呈弱陽性，甚至大多數(shù)標(biāo)本呈陰性［5］。而Rh-HDN的直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)相當(dāng)強(qiáng)，一般≥++。因此直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)陽性的強(qiáng)弱是區(qū)別ABO和Rh溶血病重要證據(jù)。本文ABO-HDN直抗實(shí)驗(yàn)陽性率為12.5%(6/48)，Rh-HDN的陽性率為100%(3/3)，從表2可以看出Rh-HDN的直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)結(jié)果為(++～++++)。本文3例Rh-HDN中有2例患兒RH陽性，其母RH陰性，是由抗-D抗體引起。1例患兒高度黃疸，總膽紅素:425 μmol/L，為第二胎第二產(chǎn)，但患兒和其母ABO和Rh血型均相同，溶血病“三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)”結(jié)果顯示:直接實(shí)驗(yàn)陽性(++++)，放散實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)陽性(+++)，中心血站疑難血型室抗體鑒定是由抗-E抗體引起，確診為ABO系統(tǒng)以外新生兒溶血病。經(jīng)換血治療，痊愈出院。有文獻(xiàn)報(bào)道，Rh(D)血型檢測(cè)作為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，Rh血型系統(tǒng)的意外抗體中，以抗-E的頻率超過抗-D［6］。游離實(shí)驗(yàn)是檢測(cè)新生兒血清中是否存在與其紅細(xì)胞不配合的ABO以外抗體和/或Ig-A(B)，可提示病情嚴(yán)重程度?？贵w釋放試驗(yàn)由于使用間接抗人球蛋白方法分別檢測(cè)放散液和酶處理的紅細(xì)胞，因而敏感度最高，1項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性即可確診HDN。本文ABO-HDN和RH-HDN抗體實(shí)驗(yàn)陽性率均為100%，這也支持HDN實(shí)驗(yàn)室主要依據(jù)是患兒紅細(xì)胞放散液中被檢出來自母體對(duì)應(yīng)的特異性抗體的原則。

綜上所述，新生兒溶血病三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)是公認(rèn)可靠的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法，確診HDN實(shí)驗(yàn)室主要依據(jù)是患兒紅細(xì)胞放散液中被檢出來自母體的對(duì)應(yīng)的特異性抗體［7］。臨床上對(duì)那些黃疸且母嬰血型不合的溶血病新生兒，要及時(shí)送檢血清學(xué)檢測(cè)，以早期明確診斷，及時(shí)治療。

1 劉達(dá)莊主編.免疫血液學(xué).第1版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002.97-102.

2 廖長(zhǎng)征，黃衍鋒.微柱凝膠技術(shù)用于新生兒溶血病診斷的效果評(píng)價(jià).中國熱帶醫(yī)學(xué)，2007，3:436-437.

3 王慕主編.兒科學(xué).第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2000.108-110.

4 倪建萍.154例新生兒ABO溶血病檢測(cè)結(jié)果分析.中國優(yōu)生與遺傳雜志，2007，15:79-82.

5 劉明霞，渾守永，王玉芝.孕前抗體篩查對(duì)預(yù)防新生兒溶血病的臨床意義.齊魯護(hù)理雜志，2010，16:123.

6 吳遠(yuǎn)軍，吳勇，陳寶嬋.Rh血型抗體的檢測(cè)及結(jié)果分析.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2008，24:604-606.

7 吳遠(yuǎn)軍，吳勇.母嬰血型不合HDN患兒致敏紅細(xì)胞的抗體特異性.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2008，24:727-728.