張耀騰,于曉蕾,曲明麗,向文勝,陳國慶,李 睿,李繼昌

(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,黑龍江哈爾濱150030;2.浙江海正藥業(yè)股份有限公司,浙江臺(tái)州318000)

米爾貝肟(milbemycin oxime)屬于大環(huán)內(nèi)酯類,是米爾貝霉素A3和A4的肟衍生物,其中A4≥80%。自日本三共株式會(huì)社于1967年發(fā)現(xiàn),經(jīng)過近20年的改良,于1986年正式以商品名米爾貝霉素A在日本上市以來,成為當(dāng)時(shí)惟一以單一成分可以同時(shí)防治犬心絲蟲及腸道寄生蟲的產(chǎn)品。美國于20世紀(jì)90年代初批準(zhǔn)該藥上市,2003年又批準(zhǔn)該藥與氯芬奴隆的復(fù)方藥品上市[1],1997年我國臺(tái)灣地區(qū)推出臺(tái)灣諾華有限公司生產(chǎn)的倍脈心(成分為米爾貝肟),作為犬貓預(yù)防心絲蟲與治療腸道寄生蟲的內(nèi)服藥,是米爾貝肟首次在中國應(yīng)用[2]。米爾貝肟進(jìn)入寄生蟲體內(nèi)會(huì)強(qiáng)化γ-氨基丁酸(GABA)的結(jié)合力,使氯離子持續(xù)進(jìn)入細(xì)胞膜內(nèi),使膜電位持續(xù)處于超極化狀態(tài)而中斷神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo),使寄生蟲癱瘓麻痹而死亡[3-4],通常用來防治犬貓大部分常見的寄生蟲病。由于米爾貝肟對體內(nèi)外寄生蟲均有很好的驅(qū)殺作用,且對伊維菌素類藥物敏感的犬毒性較小,其應(yīng)用和研究越來越受到重視。為了評價(jià)米爾貝肟片的安全性,本文對犬食喂相當(dāng)于臨床推薦劑量的1、3、5、10倍藥物后,對其血常規(guī)及肝腎功能指標(biāo)等進(jìn)行了測定試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 24只本地健康雜種犬,體重5～10 kg,購于黑龍江省哈爾濱市市郊。觀察其健康狀況(精神狀態(tài),飲食等),并測體溫、心跳和呼吸數(shù)(正常范圍:體溫37.5℃～39℃;心跳70～120次/min;呼吸10～30次/min),將確定健康的犬在試驗(yàn)條件下喂養(yǎng)一周,然后進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 藥品與儀器 米爾貝肟片(2.5 mg/片),由浙江海正藥業(yè)股份有限公司提供。BC-2800型全自動(dòng)三分群血液細(xì)胞分析儀(邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司),D240V型全自動(dòng)血液生化分析儀(南京神州英諾華醫(yī)療科技有限公司),DK-600B型電熱恒溫水槽(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司),TDL-40B型高速離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)方法 試驗(yàn)犬稱重后,隨機(jī)分成0.5、1.5、2.5、5.0 mg/kg 4個(gè)劑量組(分別為臨床推薦劑量的1、3、5、10 倍),每組 6只,雌雄各半。于給藥前(0 d,作為健康對照)及給藥后的1、3、7、14 d用無抗凝真空采血管取靜脈血3 mL,放37℃水浴中0.5 h,3 000 r/min離心10 min,取血清做血液生化分析。測定肝功能指標(biāo):谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、膽堿酯酶(CHE)、總蛋白(TP)、直接膽紅素(D.BIL)、總膽紅素(T.BIL)、白蛋白(ALB)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、堿性磷酸酶(ALP)、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT);腎功能指標(biāo):尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、尿酸(UA)。另同時(shí)取全血(肝素鈉抗凝)做血常規(guī)分析,測白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、紅細(xì)胞平均容積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCH)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)、血紅蛋白(HGB)等指標(biāo)。

在給藥后6 h內(nèi)檢查犬的心跳、呼吸、體溫是否異常,每天觀察犬的精神狀態(tài)及飲食狀況,并記錄0、1、3、7、14 d時(shí)的體溫 ,于試驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱重。

2 結(jié)果

2.1 一般指標(biāo) 以0.5、1.5、2.5、5.0 mg/kg的劑量給藥后,犬只沒有出現(xiàn)心跳、呼吸、精神狀態(tài)、飲食等方面的異常,體重?zé)o異常變化,體溫也在正常范圍內(nèi),且各個(gè)劑量組在用藥后1、3、7、14 d與用藥前相比無顯著差異(P＞0.05)。

2.2 血常規(guī)指標(biāo)分析 各劑量組血常規(guī)所有指標(biāo)在用藥后的1、3、7、14 d,與用藥前(對照組)相比差異不顯著(P＞0.05),各劑量組之間差異也不顯著(P＞0.05),說明米爾貝肟片在0.5～5.0 mg/kg劑量范圍對血液常規(guī)指標(biāo)沒有明顯的影響。部分結(jié)果見表1。

2.3 血清生化指標(biāo)分析 各劑量組血清生化所有指標(biāo)在用藥后的 1、3、7、14 d,與用藥前(對照組)相比差異不顯著(P＞0.05),各劑量組之間差異也不顯著(P＞0.05),說明米爾貝肟片在0.5～5.0 mg/kg劑量范圍內(nèi)對肝腎功能指標(biāo)沒有明顯的影響。部分結(jié)果見表2和表3。

3 討論

米爾貝肟能有效預(yù)防犬心惡絲蟲,治療犬蛔蟲,鉤蟲,鞭蟲,螨蟲等病,是一種很好的寵物用抗體內(nèi)外寄生蟲藥物。據(jù)報(bào)道[5]它與結(jié)構(gòu)和性質(zhì)十分相像的伊維菌素相比,更為安全,副作用更少,甚至對伊維菌素敏感的品種對其副作用也很少見。國外文獻(xiàn)報(bào)道,已經(jīng)在超過75種犬上證實(shí)了米爾貝肟的安全性,包括柯利犬,妊娠犬,繁殖期公犬、母犬以及2周齡以上的幼犬。成年犬內(nèi)服 LD50大于 200 mg/kg[6]。但國內(nèi)還沒有相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行報(bào)道。

本結(jié)果表明,米爾貝肟對血常規(guī)指標(biāo)無影響,提示該藥不會(huì)引起貧血及影響紅細(xì)胞的免疫和防御功能等。肝臟和腎臟是動(dòng)物體內(nèi)最重要的藥物代謝和排泄器官,而一些血清生化指標(biāo)的變化可直接反映肝腎功能是否正常。如GPT、GOT、CHE可反映肝細(xì)胞有無受損及嚴(yán)重程度;TP、ALB可反映肝細(xì)胞蛋白合成代謝功能;T.BIL、D.BIL可反映肝臟排泄、分泌及解毒功能;ALP、GGT是診斷膽汁淤積指示酶(包括同工酶)有幫助的酶指標(biāo);CRE、BUN是腎小球?yàn)V過功能的診斷和過篩指標(biāo);UA是反映腎小管排泌功能的指標(biāo)。從試驗(yàn)結(jié)果看,各劑量組在用藥后的1、3、7、14 d,這些指標(biāo)均在正常范圍內(nèi),且與用藥前相比在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異,且各劑量組之間也無顯著差異。說明米爾貝肟片劑對肝腎功能指標(biāo)無明顯影響,此與國外研究結(jié)果相一致。

表1 不同藥物劑量組犬血常規(guī)主要指標(biāo)的變化(±SD)

表1 不同藥物劑量組犬血常規(guī)主要指標(biāo)的變化(±SD)

注:給藥后與給藥前相比差異不顯著(P＞0.05);劑量之間差異不顯著(P＞0.05);相互之間差異不顯著(P＞0.05)。下表同

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表2 不同藥物劑量組犬血清肝功能主要指標(biāo)的變化(±SD)

表2 不同藥物劑量組犬血清肝功能主要指標(biāo)的變化(±SD)

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綜上所述,米爾貝肟在最大推薦劑量10倍(5 mg/kg)下對血常規(guī)、肝腎功能及體溫、體重?zé)o明顯影響,且也無臨床異常。加上國外T ranquilli等[8]的研究,當(dāng)以5.0 mg/kg體重高劑量給最敏感的柯利犬來評價(jià)米爾貝肟的安全性時(shí),有40%的犬只出現(xiàn)輕微的精神沉郁,24 h后恢復(fù)正常,說明米爾貝肟對犬的安全范圍很大。

表3 不同藥物劑量組犬血清腎功能指標(biāo)的變化(±SD)

表3 不同藥物劑量組犬血清腎功能指標(biāo)的變化(±SD)

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[1]王建華.新型寵物用抗寄生蟲藥:米爾貝肟[N].中國畜牧獸醫(yī)報(bào),2008-10-22-011.

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