吉慶勇，嚴 芳，何衛(wèi)中

(浙江省麗水市農(nóng)業(yè)科學研究院，浙江 麗水 323000)

惠明白茶為千年珍稀古茶，原產(chǎn)于浙江省景寧畬族自治縣惠明寺，每年3-5月，茶芽潔白如玉，滋味特別甘甜鮮醇。據(jù)檢測，惠明白茶成品，氨基酸含量特別高，茶多酚少，香味獨特?？萍既藛T從20世紀80年代末就開始繁殖試驗，由于惠明白茶樹齡大，枝條柔弱，營養(yǎng)物質、內(nèi)源激素不足，扦插繁殖效果不理想［1］，或生根后由于生長勢弱，芽葉生長非常緩慢，移栽成活率極低。插穗生根過程靠消耗插穗的營養(yǎng)物質來維持其生命活動，而且生根早期插穗基部傷口的愈合和新根的形成需要消耗大量的體內(nèi)營養(yǎng)［2-4］，因而會造成扦插生根后的幼苗品質下降。及時補充體內(nèi)營養(yǎng)，培育健壯的扦插生根苗，采用外源生根激素和營養(yǎng)物質的補充是行之有效的方法。ABT生根粉是一種廣譜、高效復合型植物生長促進劑，具有補充外源激素與促進植物體內(nèi)內(nèi)源激素合成的功效，能促進植物不定根形成。長效控釋肥的肥效均衡、持續(xù)、釋放周期長等特點為插穗及生根后茶苗提供礦質營養(yǎng)物質，能促進其生長［5］。據(jù)此，作者利用ABT外源激素刺激及扦插基質內(nèi)添加長效控釋肥作為一種扦插介質，開展惠明白茶扦插試驗，研究其對惠明白茶扦插生根的影響，并從內(nèi)源激素含量、營養(yǎng)物質、核酸等幾個方面對其影響生根的機理進行初步探討。

1 材料與方法

試驗于2007年5-10月在浙江省麗水市農(nóng)業(yè)科學研究院科技園茶葉繁殖基地進行。插穗采自景寧畬族自治縣惠明寺的惠明白茶樹上當年生木質化健壯新梢，插穗采后立即放入保濕箱內(nèi)，運回麗水試驗基地。插穗長5～6 cm，留1～2節(jié)2～4葉，繁殖方法采用全光照彌霧扦插育苗的方法，扦插時間為5月26日。長效控釋肥使用的美國辛普勞公司生產(chǎn)的愛貝施園藝長效控釋肥料，其有效成分主要為N 21%，P2O55%，K2O 12%，Mg 1.0%，S 5.O%，Cu 0.05%，F(xiàn)e 0.25%，Mn 0.05%，Zn 0.05%。扦插基質為松鱗60%～65%，泥炭30%～35%，珍珠巖5%。設3個處理和對照，處理的插穗扦插前切口全部用ABT1號生根粉300mg·kg-1浸泡30min，處理1基質中添加長效緩釋肥0.5% ～2.5%(V∶V，下同);處理2基質中添加長效緩釋肥2.5%～4.5%;處理3基質中添加長效緩釋肥4.5%～6.5%;以清水處理與扦插基質不添加長效緩釋肥為對照 (CK)。采用完全隨機區(qū)組設計，每個處理100根插穗，重復3次。各處理保持相對一致的環(huán)境條件。

扦插10 d后開始觀察記錄，每5 d觀察1次，分別記錄愈傷組織出現(xiàn)期、切口愈合期、不定根出現(xiàn)期、生根率、成活苗的平均生根數(shù)及根長等。在生根期采用高效液相色譜法 (HPLC)測定插穗切口附近韌皮部的 IAA、ABA、GA3含量，用蒽酮比色法測定可溶性總糖含量，用凱氏定氮法測定全氮含量，用紫外吸收法測定核酸含量。

2 結果與分析

2.1 生根情況

從表1、圖1可以看出，與對照相比，各處理愈傷組織出現(xiàn)、切口愈合、不定根發(fā)生提前，插穗的生根率提高，成活苗的平均生根數(shù)分別增加了29.66%、66.85%、89.20%，成活苗的平均根長分別增加31.25%、25.37%、17.38%。

方差分析和多重比較結果表明，3個處理插穗的生根率、生根數(shù)及根長與對照差異極顯著。處理間生根率極顯著，處理2生根率最高，成活苗根長最長;處理間的生根數(shù)差異極顯著，說明插穗用ABT浸泡、基質中添加長效緩釋肥對于增加插穗根的數(shù)量、長度有明顯效果。綜合以上情況，惠明白茶插穗用ABT浸泡后，長效緩釋肥占基質體積比2.5%～4.5%處理的生根效果最好。

圖1 ABT、長效控釋肥對惠明白茶扦插生根的生根數(shù)、根長的影響

表1 ABT、長效控釋肥對惠明白茶嫩枝插穗生根的影響

2.2 生根期內(nèi)源激素含量

ABT和添加長效緩釋肥處理的惠明白茶插穗，生根期內(nèi)插穗基部GA3和IAA含量、IAA/ABA均比對照有極顯著的增加 (表2)。3個處理 GA3含量分別是對照的1.61倍、3.63和2.53倍，IAA含量分別是對照的2.43倍、3.73倍和3.50倍，IAA/ABA比值分別是對照的9.68倍、20.85倍和19.70倍，ABA含量則低于對照。

表2 添加長效控釋肥對惠明白茶插穗生根期內(nèi)源激素含量的影響

2.3 插穗生理生化代謝

2.3.1 可溶性糖

從圖2可以看出，惠明白茶插穗在生根過程中可溶性總糖含量均先升高后降低，但3個處理都明顯高于對照。綜合生根率來看，處理2生根率最高，其可溶性總糖變化幅度最大;對照生根率最低，其可溶性總糖變化也最緩和;其他處理生根率都高于對照，可溶性總糖含量變化幅度也大于對照?？梢?，插穗切口部位的可溶性總糖含量與生根的關系密切，這與前人［5］研究結果一致。

圖2 各處理生根過程中可溶性總糖含量的變化

從不同處理的變化曲線看，6月10日至7月1日可溶性總糖含量呈逐漸增加的趨勢，這是由于插穗剪切后，插穗內(nèi)的貯藏淀粉水解，使可溶性總糖含量急劇增加，并且在插穗基部積聚;而經(jīng)過處理的插穗比對照增加幅度更大，可能是植物生長調(diào)節(jié)劑使某些酶的活性增加，從而加速淀粉等水解。7月1日至8月16日為插穗愈傷組織形成和生根期，需要消耗大量的營養(yǎng)物質。處理和對照平均消耗總糖分別為17.5、16.1、13.3和9.2mg·g-1，因此可溶性總糖含量呈現(xiàn)迅速下降趨勢。3個處理下降幅度均比對照大，這與試驗中觀察到3個處理愈傷組織和根形成比對照快的現(xiàn)象相吻合。8月16日以后可溶性總糖含量呈現(xiàn)比較緩慢下降趨勢，可能是由于根已大量形成并迅速伸長，插穗成為完整植株，代謝功能趨于完備，積累的營養(yǎng)物質大于根生長消耗的營養(yǎng)物質。

2.3.2 全氮

從圖3可以看出，惠明白茶插穗全氮含量在愈傷組織形成前 (5月26日至6月11日)上升，在愈傷組織和根形成過程中 (6月11日至8月16日)下降。這種變化趨勢與總糖的變化幾乎同步，說明插穗生根除需要糖類外，還需要消耗一定量的氮類物質，全氮含量是影響惠明白茶插穗生根的因素之一。從圖3還可看出，3個處理全氮含量變化幅度較對照大，從5月26日至6月11日氮的積累量明顯多，在愈傷組織和根的形成過程中氮的消耗也明顯比對照多，結合生根情況分析，3個處理的插穗生根效果好于對照，可能與插穗用ABT、長效控釋肥處理促進了氮素在插穗基部的積累，并且在一定范圍內(nèi)全氮含量愈高對生根愈有利有關。

圖3 各處理生根過程中全氮含量的變化

2.3.3 核酸

圖4 各處理生根過程中核酸含量的變化

從圖4可以看出，在不定根原基誘導期核酸含量總體呈上升趨勢，而在不定根形成期則呈先下降后升高的趨勢，處理比對照變化幅度大。方差分析表明，插穗在扦插后生根過程中核酸含量的變化與處理后時間的關系極顯著，說明嫩枝插穗的生根與核酸含量有緊密聯(lián)系，不同處理間對插穗的核酸含量變化沒有顯著差異，說明營養(yǎng)物質對核酸的調(diào)控作用強度類同。

3 小結與討論

插穗用ABT浸泡和扦插基質中添加長效控釋肥對惠明白茶插穗生根和后期植株生長有顯著的促進作用，可持續(xù)、均衡為插穗補充礦質營養(yǎng)，能極顯著提高插穗生根率，增加成活苗的生根數(shù)、根長，促進插穗萌芽，明顯縮短生根時間?；|中添加長效控釋肥還極顯著提高插穗內(nèi)源GA3和IAA、可溶性總糖和全氮的含量、IAA/ABA比值，降低ABA含量，其中以長效控釋肥占基質體積比的2.5%～4.5%處理的生根效果最好，插穗的生根率、成活苗的生根數(shù)、成活苗的根長均比對照增加，生根時間比對照縮短了25 d。經(jīng)過處理的插穗其生根過程中內(nèi)源激素、營養(yǎng)物質、核酸含量與對照相比均發(fā)生了極顯著變化，說明內(nèi)源激素、營養(yǎng)物質、核酸含量均是惠明白茶扦插的影響因素［6］。在一定范圍內(nèi)，較高的IAA/ABA比值、可溶性總糖、全氮、核酸含量有利于惠明白茶插穗生根，這與前人研究其他植物的結果一致［7-8］。自然條件下惠明白茶扦插生根率低可能與其插穗中IAA/ABA的比值、可溶性總糖及全氮含量較低有關。

ABT和長效控釋肥處理對惠明白茶扦插生根的促進作用可能與以下幾方面原因有關。外源激素(ABT)激活插穗細胞內(nèi)生化物質代謝，顯著提高了插穗生根期GA3、IAA、核酸含量，降低了ABA含量，從而提高了IAA/ABA比值，促進了不定根原基細胞的大量分裂，使DNA快速復制，進而促進不定根形成。長效控釋肥提高了插穗基部的可溶性總糖及全氮含量，為插穗生根提供了較充足的營養(yǎng)物質，在不定根的形成期可溶性糖被運輸?shù)讲逅牖?，保證了不定根的形成所需要的大量營養(yǎng)物質。在不定根形成后插穗具有了吸收外界養(yǎng)分的能力，促進了葉片的光合作用，長效控釋肥為生長恢復期的插穗提供了均衡、充足的生長物質，故在不定根形成后插穗中可溶性糖含量開始積累上升，3個處理插穗的不定根、根長顯著高于未處理，這可能是外源營養(yǎng)能提高惠明白茶插穗生根率和提高生根后的幼苗品質的主要原因。

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