華文浩，王慧珠，趙 輝，李 敏，張 燕，田敬華，王玉光

空腸彎曲菌 (campylobacter jejuni，CJ)是一種革蘭陰性彎曲桿菌，是引起急性胃腸炎最常見的病因之一，也可引起格林－巴利綜合征、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、瑞特病和肝炎等嚴(yán)重并發(fā)癥，最嚴(yán)重的并發(fā)癥是格林－巴利綜合征，是外周神經(jīng)系統(tǒng)的急性脫髓鞘疾?。?］。近年來，CJ感染率在世界各地普遍呈上升趨勢(shì)［2］。在發(fā)展中國(guó)家，CJ是兒童因腹瀉死亡的重要病因［3］。本研究對(duì)北京、河南、新疆三地253例HIV/AIDS相關(guān)性慢性腹瀉患者的糞便標(biāo)本進(jìn)行CJ檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 病例入選及排除標(biāo)準(zhǔn) 入選標(biāo)準(zhǔn):HIV感染者經(jīng)過免疫印跡法 (Western blotting，WB)確認(rèn)為HIV抗體陽(yáng)性，慢性腹瀉次數(shù)＞3次/d，腹瀉時(shí)間＞1個(gè)月，年齡在18～70歲。排除標(biāo)準(zhǔn):近1個(gè)月內(nèi)接受過影響本試驗(yàn)觀察的藥物治療患者;應(yīng)用高效抗病毒治療 (HAART)藥物 (主要指蛋白酶抑制劑)導(dǎo)致慢性腹瀉者;電子腸鏡檢查腸道腫瘤和慢性潰瘍性結(jié)腸炎患者。

1.2 一般資料 選擇2009年11月—2010年12月在全國(guó)4家醫(yī)院住院或是門診的HIV/AIDS相關(guān)性慢性腹瀉患者253例為研究對(duì)象。其中北京地壇醫(yī)院30例，北京佑安醫(yī)院37例，新疆烏魯木齊北郊醫(yī)院37例，河南上蔡縣中醫(yī)醫(yī)院149例。其中男143例，女110例;年齡20～69歲，平均 (42.9±10.4)歲。104例患者居住在城市，149例患者居住在農(nóng)村。25例CD4≥500個(gè)/μl，130例 CD4200 ～499個(gè)/μl，98例 CD4＜200個(gè)/μl。

1.3 方法

1.3.1 微需氧培養(yǎng) 留取患者的糞便標(biāo)本于無菌盒中，立即接種于具有高度選擇性SKIRROW(Oxoid公司的產(chǎn)品)培養(yǎng)基平板上，將接種好標(biāo)本的平板放入微需氧產(chǎn)氣袋中 (氧氣5%，二氧化碳10%，氮?dú)?5%)，封閉好后立即放置42℃孵箱內(nèi)培養(yǎng)48 h。

1.3.2 CJ鑒定 (1)培養(yǎng)48 h后觀察SKIRROW菌落的形態(tài)及染色。(2)生化反應(yīng):氧化酶 (+)動(dòng)力 (+)，最后用API Campy彎曲桿菌生化鑒定試劑盒 (生物梅里埃公司生產(chǎn))進(jìn)行CJ鑒定。

1.4 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株 ATCC 29482(天壇生物制品有限公司)細(xì)菌菌種復(fù)蘇，接種于SKIRROW培養(yǎng)基。

2 結(jié)果

從253例HIV/AIDS相關(guān)性慢性腹瀉患者的糞便中共檢測(cè)出2株CJ，感染率為0.8%。其中1例患者來自北京，男性，28歲，2009年確診為HIV抗體陽(yáng)性，正在接受HAART治療。HIV的感染途徑是性接觸，2010年1月入組檢測(cè)，糞便為稀便，大便次數(shù)5～6次/d，便常規(guī)檢測(cè) WBC:3～6個(gè)/HP，RBC:4～9個(gè)/HP。CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)91個(gè)/μl，患者處于 AIDS期。另1例患者來自河南，女性，39歲，2003年確診為HIV抗體陽(yáng)性，正在接受HAART治療，HIV的感染途徑是有償獻(xiàn)血，2010年10月入組檢測(cè)，糞便為稀便，大便次數(shù)4～5次/d，便常規(guī)檢測(cè)未見異常，CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)302個(gè)/μl，處于HIV感染的有癥狀期。

CJ可形成無色半透明毛玻璃樣小菌落，單個(gè)菌落呈中心凸起，周邊不規(guī)則，無溶血現(xiàn)象。CJ為革蘭陰性桿菌，菌體輕度彎曲似逗點(diǎn)狀，長(zhǎng)1.5～5.0μm，寬0.2～0.8μm。兩菌體的末端相接時(shí)呈s形，螺旋狀。菌體一端或兩端有鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，在暗視野鏡下觀察似飛蠅 (見圖1)。

圖1 空腸彎曲菌 (×100，油鏡)Figure 1 Campylobacter jejuni

3 討論

CJ是近十幾年來被認(rèn)識(shí)的在全球廣泛流行的人獸共患病原菌［4］。美國(guó)和其他工業(yè)化國(guó)家，CJ感染引起的腹瀉超過沙門菌、志賀菌及大腸埃希菌O157:H7引起腹瀉的2～7倍［5－6］。CJ能引起散發(fā)性和地方流行性的胃腸炎暴發(fā)，特別是在有缺陷性的個(gè)體，如癌癥患者、艾滋病患者、糖尿病患者、嬰幼兒和老年人等［7］。

1980年由安徽省蕪湖市衛(wèi)生防疫站首先從2例急性腹瀉患者中分離出似胎兒彎曲菌腸道亞種彎曲菌，1981年由司馬慧蘭從上海急性腹瀉患兒糞便中分離出似胎兒彎曲菌，同時(shí)又從雞糞便中檢出該菌，隨后我國(guó)CJ感染的研究一度出現(xiàn)高峰。20世紀(jì)80年代十幾個(gè)省 (市、自治區(qū))開展了較多的有關(guān)動(dòng)物帶菌率和人群感染率的調(diào)查。我國(guó)雞中該菌的帶菌率高達(dá)50.0%～70.0%，腹瀉患者中檢出率為3.0% ～11.0%，兒童腹瀉患者檢出率為7.0% ～15.0%，明顯高于成年人［8－10］。本研究從253例HIV感染慢性腹瀉患者的糞便中共檢測(cè)出2株CJ，2例患者均為成年人，分別處于AIDS期和HIV感染的有癥狀期，CJ感染率與CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)的關(guān)系因病例數(shù)較少，有待今后進(jìn)一步探討。CJ主要傳播途徑是被污染的食物和水，未經(jīng)消毒的井水或地面水、污染的牛奶、熟食通常是引起散發(fā)和暴發(fā)的主要原因。家畜、家禽是重要貯存宿主，其感染率在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家居細(xì)菌性食源性感染的首位。由于經(jīng)濟(jì)、氣候、人口密度以及種族的差異，發(fā)展中國(guó)家的感染率明顯高于發(fā)達(dá)國(guó)家，通常為發(fā)達(dá)國(guó)家的10～100倍，但患者的臨床癥狀較輕。人類對(duì)空腸彎曲菌普遍易感，感染者中男女比例為1.2～1.5∶1。

近些年來，CJ在世界各地己鑒定出14種彎曲菌，但是在美國(guó)99%以上的感染為CJ感染。CJ導(dǎo)致的腹瀉發(fā)病率較高，對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和醫(yī)療資源造成的影響不可忽視，僅美國(guó)一年就因感染彎曲菌而損失數(shù)十億美元。在美國(guó)和其他國(guó)家，每年約有250萬(wàn)例彎曲菌感染，其中13 000例需住院治療。在我國(guó)CJ與沙門菌所引起的腹瀉同樣常見，且已超過志賀菌引起的腹瀉。上海、北京、福建等地多次報(bào)道因該菌污染食物所引發(fā)的疾病。研究資料顯示，雞是彎曲菌重要的貯存宿主，人常因食入被CJ污染的食品等而感染［11］，雞肉是CJ感染人類的主要污染源?？刂齐u群彎曲菌的攜帶率是控制人彎曲菌病的重要前提［12］，必須整頓種禽養(yǎng)殖行業(yè)，制定并嚴(yán)格執(zhí)行行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)［13］。在搞好禽場(chǎng)管理的基礎(chǔ)上，建立法定的彎曲菌清潔禽群及孵化場(chǎng)的特定準(zhǔn)則，切實(shí)做好生物安全工作，也將有助于控制和消滅雞彎曲菌病的流行?？刂坪徒档屠夏昙绑w弱人群感染彎曲菌疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

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