王立群 王 娟 陳 波 姜 勇 黃巧冰

南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，廣州 510515

MRP8／MRP14通過損傷細(xì)胞骨架蛋白和連接蛋白介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞通透性增高

王立群 王 娟 陳 波 姜 勇 黃巧冰

南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，廣州 510515

目的：探討多耐藥相關(guān)蛋白8（MRP8）、多耐藥相關(guān)蛋白14（MRP14）及MRP8-14復(fù)合物對單層內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響及其機制。方法：分別采用不同濃度的MRP8、MRP14及MRP8-14復(fù)合物刺激單層臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，并設(shè)立對照組進(jìn)行比較，于不同時間點測定跨細(xì)胞電阻以反映通透性變化；同時采用熒光染色法顯示 MRP8、MRP14及MRP8-14復(fù)合物刺激后內(nèi)皮細(xì)胞F-actin、VE-cadherin、ZO-1的形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果：與正常對照組相比，MRP8以劑量依賴性方式引起內(nèi)皮細(xì)胞通透性升高，30min內(nèi)通透性逐漸增大，在30min～120min通透性變化不明顯，呈現(xiàn)平臺期；MRP14以劑量依賴和時間依賴方式引起內(nèi)皮細(xì)胞通透性升高，在120min內(nèi)通透性逐漸增高，未見平臺期出現(xiàn)；MRP8-14復(fù)合物以劑量依賴和時間依賴方式引起內(nèi)皮細(xì)胞通透性升高，在120min內(nèi)通透性逐漸增大，未見平臺期出現(xiàn)。另外，MRP8、MRP14及MRP8-14復(fù)合物介導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞通透性增高是Ca2＋依賴性的，在無Ca2＋條件下無法導(dǎo)致通透性增高。在形態(tài)學(xué)方面，MRP8、MRP14以及 MRP8-14復(fù)合物均能引起F-actin、VE-cadherin、ZO-1的改變，MRP刺激后，F(xiàn)-actin應(yīng)力纖維形成明顯，VE-cadherin和ZO-1出現(xiàn)裂隙，呈現(xiàn)出鋸齒樣形態(tài)。結(jié)論：MRP8、MRP14及MRP8-14復(fù)合物均能通過損傷內(nèi)皮細(xì)胞骨架蛋白和連接蛋白導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞通透性升高。

（本課題為教育部創(chuàng)新團(tuán)隊基金項目，NO.IRT0703）